不同劑量甲潑尼龍對大鼠急性肺損傷治療效果及肺泡巨噬細胞在其中的作用

不同劑量甲潑尼龍對大鼠急性肺損傷治療效果及肺泡巨噬細胞在其中的作用

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1、徐州醫(yī)學院碩士學位論文不同劑量甲潑尼龍對大鼠急性肺損傷治療效果及肺泡巨噬細胞在其中的作用姓名:劉大鵬申請學位級別:碩士專業(yè):麻醉學指導教師:龐慶豐2012-04徐州醫(yī)學院碩士學位論文不同劑量甲潑尼龍對大鼠急性肺損傷治療效果及肺泡巨噬細胞在其中的作用中文摘要目的觀察不同劑量甲潑尼龍(methylprednisolone,MPL)對大鼠急性肺損傷(acutelunginjury,ALl)治療效果的差異,并探討不同劑量MPL對肺泡巨噬細胞(alveolarmacrophages,AM)影響的不同在其中的作用。方法90只雄性成年清潔級大鼠隨機分為5組(n=18):對照組(Ns組)、損傷組(LPS

2、組)、小劑量治療組(LPS+MPL3mg組)、中劑量治療組(LPS+MPL30mg組)、大劑量治療組(LPS+MPLl80mg組)。尾靜脈注射脂多糖(1ipopolysaccharides,LPS)5mg/k酬(連續(xù)三天)制作急性肺損傷模型。首次尾靜脈注射LPSlh后,三個治療組分別連續(xù)腹腔注射MPL3mg/kg/d(LPS+MPL3mg組)、30mg/kg/d(LPS+MPL30mg組)或180mg/kg/d(LPS+MPLl80mg組);三天后,每天同一時間各治療組腹腔注射相應(yīng)劑量MPL。LPS組尾靜脈注射LPSlh后,連續(xù)腹腔注射生理鹽水(normalsaline,NS)2ml/k

3、g/d,三天后,每天同一時間相應(yīng)劑量NS。對照組:尾靜脈、腹腔分別注射相應(yīng)容量的NS。于制模后12h、7d和14d各組隨機處死6只大鼠并取材。實驗期間每日觀察動物稱取體重,在規(guī)定時問處死動物后,結(jié)扎右側(cè)主支氣管,行左側(cè)支氣管肺泡灌洗,收集肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,BALF),取4陬l灌洗液,2毗l用于計數(shù)BALF中細胞總數(shù),2陬l進行Wright-Giemsa染色觀察AM比例;余下BALF離心后取上清采用酶聯(lián)免疫吸附法(EHSA)檢鋇t]III型前膠原(procollagentypeIII,PCIII)含量;細胞沉淀進行AM提取,用吖啶橙/溴化乙錠

4、雙熒光染色法檢測AM凋亡情況、髓過氧化物酶染色法檢測AM對凋亡中性粒細胞的吞噬活性。右肺中葉稱濕、干重,用于計算肺濕/干重比;下葉通過HE染任.,觀察肺組織病理學改變。徐州醫(yī)學院碩士學位論文結(jié)果(1)腹腔注射3mg和30mgMPL能有效抑制ALl大鼠體重下降趨勢并于造模9d后明顯高于LPS組(P<0.05),而這兩組之問無有統(tǒng)計學意義的差異(P>0.05);與以上兩組相比腹腔注射180mgMPL使ALI大鼠體重下降更明顯(P<0.05),在造模8d后明顯低于其他各治療組及LPS組(P<0.05),并呈不斷下降趨勢。(2)與LPS組相比,腹腔注射3mg和30mgMPL能有效減輕ALI大鼠右

5、肺中葉濕/干重比(P<0.05),到造模后14d時與NS組已無有統(tǒng)計學意義的差異(尸>0.05),且這兩組之間在造模7d、14d時無有統(tǒng)計學意義的差異(P>O.05);腹腔注射180mgMPL使肺濕/干重比在造模7d、14d時持續(xù)升高,并高于其他兩個治療組(P<0.05),到造模后14d后時已明顯高于LPS組。(3)與LPS組相比,腹腔注射3mg和30mgMPL能有效減輕ALI大鼠右肺下葉病理學評分,到造模后14d時與NS組己無有統(tǒng)計學意義的差異(P>0.05),且這兩組之間也無有統(tǒng)計學意義的差異(尸>O.05);腹腔注射180mgMPL卻使ALI大鼠右肺下葉病理學評分在造模7d、14d

6、時持續(xù)升高并高于其他兩個治療組(P<0.05),到造模后14d時已明顯高于LPS組。(4)與LPS組相比,腹腔注射3mg和30mgMPL能有效減少AU大鼠BALF中PCIII的含量,到造模后14d時與NS組已無有統(tǒng)計學意義的差異(P>0.05),且這兩組之間沒有有統(tǒng)計學意義的差異(P>0.05);腹腔注射180mgMPL使ALI大鼠BALF中PCIII的含量在造模7d、14d時持續(xù)升高并高于其他兩個治療組(P<0.05),到造模后14d時已明顯高于LPS組。(5)與LPS組相比,腹腔注射3mg和30mgMPL能有效減少AU大鼠BALF中的細胞總數(shù),到造模后14d時與NS組己無有統(tǒng)計學意義

7、的差異(P>0.05),且這兩組之間在造模7d、14d時無有統(tǒng)計學意義的差異(P>O.05);腹腔注射MPLl80mg使ALI大鼠7d、14d時持續(xù)升高并高于其他兩個治療組(尸<0.05),到造模后14d時已明顯高于LPS組。(6)與LPS組相比,腹腔注射3mg和30mgMPL,的ALl大鼠BALF中的AM比例在12h明顯下降(尸<0.05),但在造模7d及14d時逐漸回升,其中LPS+MPL3mg組到造模后14d時明顯高于其他兩個

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