fnc對荷h22小鼠腫瘤的抑制作用及其機制研究

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMaster碭eAntitumorEffectandtheMechanismofFNCinH22Tumor—bearingMiceBy：SunaLiuSupervisor：Prof．QingduanWangPharmacologyBasicalMedicalCollegeMay2012原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表

2、或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。學位論文作者：日期：年月日學位論文使用授權聲明本人在導師指導下完成的論文及相關的職務作品，知識產(chǎn)權歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭州大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文或與該學位論文直接相關的學術論文或成果時

3、，第一署名單位仍然為鄭州大學。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。學位論文作者：日期：年月摘要FNC對荷H22小鼠腫瘤的抑制作用及其機制研究研究生：劉素娜導師：王慶端鄭州大學基礎醫(yī)學院藥理學教研室河南鄭州450052背景和目的：目前，惡性腫瘤仍是世界上對人類健康危害最大的疾病之一。世界衛(wèi)生組織最新統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，目前全球平均每8個死亡病例中就有1人死于癌癥。我國衛(wèi)生部數(shù)據(jù)顯示，中國內(nèi)地每年新發(fā)癌癥約200萬例，死亡超過140萬例，每5位死亡病人中有一人死于癌癥。雖然現(xiàn)有許多種化療藥物，但都存在著自身的治療局限性及毒副作用。因此，開發(fā)安全有效的抗腫

4、瘤藥物是一項緊迫的任務。烈C(2’．脫氧．2’．氟．4’．疊氮胞苷)是一種新型的核苷類似物。我們前期的研究結果表明，多種人癌細胞經(jīng)高劑量(2mg／kg)和低劑量(O．5mg／kg)FNC處理后，細胞周期被阻滯于G1期或S期，并誘導其凋亡。FNC能夠在體外抑制多種人癌細胞的增殖，包括B細胞非霍奇金淋巴瘤、肺腺癌和急性髓細胞白血病等。有關FNC這些作用的確切分子機制尚不清楚。眾所周知，細胞周期調(diào)控因子的異常表達可以通過改變細胞周期引起細胞無限增殖而導致癌癥的發(fā)生，異常的細胞周期進程是腫瘤發(fā)生的重要因素。通常，大部分腫瘤的形成都源于細胞周期G1

5、／S轉換期出現(xiàn)了問題。本研究的目的是建立肝癌H22荷瘤小鼠模型，研究FNC對荷H22小鼠腫瘤的抑制作用，并進一步探討其抗腫瘤的分子機制，為其開發(fā)為臨床抗腫瘤治療藥物提供理論基礎。材料與方法：本課題采用建立肝癌H22荷瘤小鼠模型，連續(xù)尾靜脈注射FNC8天后剖瘤摘要稱重，計算抑瘤率：以cyclinD1、cyclinE和Rb為指標，分別測量瘤體內(nèi)cyclinD1、cyclinE和Rb的基因和蛋白表達量的變化，初步研究其抗腫瘤作用及分子機制。本研究共分兩部分，其內(nèi)容如下：第一部分FNC對肝癌H22實體瘤的抑制作用用傳代良好第7。8天的H22瘤細胞

6、接種于KM小鼠右腋下，每只動物接種2．4x106個細胞，24h后隨機分為空白對照組(生理鹽水)、5FU(15mg／kg)、FNC低(1mg／kg)、FNC中(2mg／kg)、FNC高(3mg／kg)劑量組，連續(xù)尾靜脈用藥8天后剖瘤稱重計算各組的抑瘤率，抑瘤率(％)=(對照組平均瘤重一用藥組平均瘤重)／對照組平均瘤重x100％，評價FNC體內(nèi)的抗腫瘤療效。第二部分FNC體內(nèi)抗腫瘤作用的分子機制研究用熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)法檢測瘤組織內(nèi)細胞周期蛋白cyclinD1、cyclinE和抑癌蛋白RbmRNA的表達量：用熒光倒置顯微鏡檢

7、測瘤組織內(nèi)cyclinD1、cyclinE和磷酸化Rb(ser780)蛋白的表達量，從而探究FNC在基因和蛋白水平上對cyclinD1、cyclinE和Rb(ser780)表達產(chǎn)生的影響。結果：1：通過計算抑瘤率，F(xiàn)NC(1，2，3mg／kg)和5FU(15mg／kg)對荷瘤小鼠肝癌H22抑瘤率依次為45．96％、52．53％、62．12％and63．13％。2：FNC各劑量組瘤體內(nèi)eyclinD1mRNA的表達均低于空白對照組，大劑量(3．0mg／kg)組與空白對照組比較有顯著性差異(p<0．05)。FNC各劑量eyclinEmRNA的

8、表達都高于空白對照組，并隨藥物濃度的升高而升高，大劑量組與空白對照組比較有顯著性差異(p