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《熒光標記斑馬魚稚魚耳石的效果及其對抗氧化酶活力的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、西南大學碩士學位論文熒光標記斑馬魚稚魚耳石的效果及其對抗氧化酶活力的影響姓名：許莉佳申請學位級別：碩士專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖指導教師：李云20120601摘要熒光標記斑馬魚稚魚耳石的效果及其對抗氧化酶活力的影響水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)碩士研究生許莉佳指導老師李云教授隨著水產(chǎn)業(yè)發(fā)展和漁業(yè)資源保護的需求日益增多，魚類標忠技術(shù)也取得了很人進步，產(chǎn)生了多種標志方法。但這些方法在標記仔稚魚時存在很多的問題和不足，比如需要很長的時間或較高的經(jīng)濟成本，而且每種標忠方法岡標記原因、標記強度和標記鑒定等總有這樣或那樣的缺點與不足。魚體所受的脅迫和致死率
2、、標忠成本和勞動強度以及標志的檢測和同捕效果等是影響標志技術(shù)的重要岡素，而州熒光染料浸泡標記能夠滿足以上要求，并且可以在短時間內(nèi)實現(xiàn)人規(guī)模的標記放流活動。目前國內(nèi)往研究Hj熒光物質(zhì)浸泡標記水生動物時，多注重對熒光物質(zhì)濃度的選擇，熒光物質(zhì)的浸泡時間基本都定為24h，而對不同浸泡時間對耳彳i標記效果的影響情況研究較少，尤其是在熒光物質(zhì)浸泡標記魚類時對其機體有無脅迫、損傷及損傷程度等方面尚未見到有人報道。本研究選用國際標準水生實驗動物斑馬魚為實驗材料，采用鹽酸四環(huán)素和鈣黃綠素浸泡標記斑馬魚稚魚，確定適合標記斑馬魚稚魚的熒
3、光物質(zhì)以及最佳濃度、浸泡時間和浸泡方法；通過連續(xù)監(jiān)測土要的抗氧化酶活性指標——超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)，初步評估鹽酸四環(huán)素浸泡標記稚魚耳彳i時對其機體產(chǎn)生的脅迫影響，在一定程度上確定該方法的安全程度，旨在探討安全有效的熒光標記方法，以期為研究水產(chǎn)動物增殖放流標記鉻提供理論依據(jù)和實際參考。論文主要研究結(jié)果如下：1．鹽酸四環(huán)素(TCH)適合刪?。唏R魚稚魚耳彳i的熒光標記，黃色熒光標記率高達100％、標記效果良好且持久；在稚魚的三對耳彳i中，以微耳彳i的熒光標記
4、效果最佳、個體著異性最小，矢耳彳i其次；檢測TCH熒光標記時適宜的激發(fā)光源為監(jiān)光13(BP450．490)和黃綠光N2．1(BP515·560)，其中黃綠光N2．1(BP515．560)檢測效果更佳。2．鈣黃綠素不適?。唏R魚稚魚耳彳i的熒光標記。鈣黃綠素的綠色熒光與稚魚耳彳i的白發(fā)熒光顏色相近，不容易區(qū)分，熒光標記效果不顯并、標記率低：但檢測鈣黃綠素標記效果的適宜激發(fā)光源仍為監(jiān)光13(BP450．490)和黃綠光N2．1(BP515．560)，二對耳彳i中標記效果相兩南人學碩十學伊論文對良好的仍是微耳彳i，欠耳了
5、i其次。3．稚魚(尤其是小日齡)階段是適于熒光物質(zhì)浸泡標記的階段，胚胎時期的某些階段可能也適合熒光標記，但需要從浸泡后胚胎能否正常發(fā)育及出膜后魚苗質(zhì)量好壞等方面做進一步的深入研究。4．在一定范同內(nèi)，稚魚對熒光物質(zhì)的吸收與浸泡液濃度、浸泡持續(xù)時間旱正相關(guān)關(guān)系；在一定期限內(nèi)，同一濃度浸泡處理后，熒光標記強度隨稚魚的生長而呈現(xiàn)逐漸增強的趨勢。5．通過研究TCH對稚魚抗氧化酶活力的影響，能夠得出——在本實驗設(shè)置的濃度范圍內(nèi)，TCH對抗氧化酶SOD、CAT和GSH．PxYt-有誘導作川；24h浸泡處理下稚魚的抗氧化酶活力高y
6、-18h浸泡處理組，高濃度浸泡時間為24h時可能對稚魚機體造成了一定的氧化損傷，但這種損傷經(jīng)過一段時間后能恢復(fù)止常；而中低濃度組浸泡時間為24h或TCH各濃度組浸泡時間為18h時，稚魚機體的抗氧化酶系統(tǒng)基本能清除脅迫產(chǎn)生的活性氧自由基從而避免機體受到氧化損傷。6．從熒光染料的成本、浸泡濃度及時間、標記效果及持久性、脅迫影響等方面綜合評估，對斑馬魚稚魚，TCH溶液濃度為250mg／L、浸泡時間為18h時耳石熒光標記的效果最佳；TCH溶液濃度為150mg／L、浸泡時間為24h，或者TCH溶液濃度為250mg／L、浸泡時
7、間為24h時耳石熒光標記的效果也非常顯著。雖然后一處理可能會對魚體產(chǎn)生一定的氧化損傷，但這種損傷在較短的時間內(nèi)能夠恢復(fù)正常，因而往實際操作中也可予以考慮。Ⅱ關(guān)鍵詞：耳石標記鹽酸四環(huán)素鈣黃綠素斑馬魚抗氧化酶AbstracIMarkingJuvenileZebrafishwithFluorescentSubstancesandItsEffectsonAntioxidasesMastercandidateofAquaculture．XuLijiaSupervisor-Prof．LiYunAbstractFishmarki
8、ngtechniqueshavedevelopedinresponsetotherequirementsofaquaculturebreedingandfishstockconservation．Manyofthesemethodsareproblematicintermsofmarkingjuvenflefish，and／orarecosilyorvery
