蝗蟲黃酮的提取分離和生物活性研究

蝗蟲黃酮的提取分離和生物活性研究

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1、陜西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文蝗蟲黃酮的提取分離和生物活性研究姓名:劉愛青申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程指導(dǎo)教師:段玉峰20070501蝗蟲黃酮的提取分離和生物活性研究劉愛青摘要本文采用比色法測(cè)定了不同品種不同產(chǎn)地蝗蟲體內(nèi)黃酮類化合物的含量,并采用正交試驗(yàn)優(yōu)化出蝗蟲黃酮提取的工藝條件。針對(duì)蝗蟲黃酮提取物,采用比色法研究其體外抗氧化能力;利用高脂飼料誘導(dǎo)小鼠高脂血癥模型,研究其降血脂作用;利用老少齡小鼠對(duì)照試驗(yàn)研究了其體內(nèi)抗氧化作用:通過運(yùn)動(dòng)小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn),研究了其抗疲勞作用。結(jié)果表明:1.采用正交試驗(yàn)優(yōu)化常規(guī)提取蝗蟲總黃酮的最

2、佳工藝條件為:以脫脂蝗蟲干粉為材料,90%的乙醇為溶劑,1:30(w/v)的料液比,65℃下提取2小時(shí)。在常規(guī)提取基礎(chǔ)上酶法輔助提取的最佳工藝條件是:利用用量為底物1%的復(fù)合酶,在pH=5.0,溫度為45℃的條件下酶解1.0h,然后應(yīng)用常規(guī)方法進(jìn)行提取。2.不同品種不同產(chǎn)地的蝗蟲體內(nèi)黃酮類化合物的含量具有較大的差異,其中總黃酮含量最高的是陜西長(zhǎng)安中華稻蝗,高達(dá)22.61mg/g,陜西長(zhǎng)安短星翅蝗體內(nèi)總黃酮含量最低,為3.79mg/g;同一品種不同產(chǎn)地的蝗蟲體內(nèi)總黃酮的含量也有差異,如內(nèi)蒙黃脛小車蝗的含量為17.68mg/g,而陜西長(zhǎng)安黃

3、脛小車蝗則為6.00mg/ga3.中華稻蝗總黃酮酶法輔助提取液的濃縮浸膏依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取分離,然后對(duì)得率最多的乙酸乙酯萃取部分進(jìn)行了多次柱色譜分離,并通過薄層色譜及顏色反應(yīng)進(jìn)行鑒定,證明得到了3個(gè)黃酮類組分。4.中華稻蝗各黃酮類組分均有較好的總抗氧化能力和較好的還原能力。除正丁醇萃取物的總抗氧化能力在20,ug/mL、40*,g/mL、60/,g/mL、809e./mI旅度范圍內(nèi)小于BHT的總抗氧化能力外,其余幾種黃酮類組分均大于BHT的總抗氧化能力,其中水相殘留物的抗氧化能力高達(dá)(223.73_+2。86)U/mL

4、在3陋g/mL、60弘g/mL、90ug/mL、12吮g/mL膿度范圍內(nèi),還原能力從大到小的順序是:水相殘留物、酶法粗提物、正丁醇萃取物、B耵、乙酸乙酯萃取物。中華稻蝗各黃酮類組分在各個(gè)自由基體系中均有較好的清除自由基的能力,且清除率和濃度成正比例關(guān)系;在3種萃取物中,水相殘留物在各自由基體系中的清除能力均大于BHT,清除羥基自由基的lCso為25.16_-'-0.64/.tg/mL、清除超氧陰離子自由基的1c-.50為35.06_-q).86“g/mL、DPPH為19.86.+1.24/zg/mL、脂質(zhì)過氧化為43.75-+0.94#

5、g/mL;其他兩種萃取物在不同體系中的清除率與Brrr大d,關(guān)系不確定。5.中華稻蝗黃酮提取物能顯著降低高脂血癥小鼠血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量,顯著提高了高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量,有降血脂作用。中華稻蝗黃酮提取物還能顯著降低動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)(AI),有預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的作用。6.中華稻蝗黃酮提取物三個(gè)劑量組均能極顯著降低老齡小鼠血清和組織脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量,高劑量組顯著提高血清和組織中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH—Px)和過氧化氫酶(CAT)的活性,中高劑量組

6、均能極顯著增強(qiáng)血清和組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性。結(jié)果說明中華稻蝗黃酮提取物具有抗氧化性。7.中華稻蝗黃酮提取物能明顯延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間,增加肝糖元的儲(chǔ)備量、提高血清乳酸脫氫酶(LDH)的活力,降低運(yùn)動(dòng)后血清尿素氮(BUN)含量的增加,說明中華稻蜱黃酮提取物在增加機(jī)體對(duì)運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的適應(yīng)能力、抵抗疲勞產(chǎn)生和加速疲勞消除方面具有明顯的作用。關(guān)鍵詞:蝗蟲黃酮類化合物提取純化生物活性ⅡThestudyontheextractionandseperationofflavonoidsfromlocustanditsbioactivityLiu

7、AiqingAbstractInthispaperflavoniodcontentofdifferentlocustvarietiesindifferentproducingareawasmeasuredandtheprocessingconditionsofflavoniodfromlocustwereoptimizedwithorthogonalexperiment.TheinvitroantioxidationactivityoflocustflavoniodextractsWasstudiedbyusingcolorimetry

8、method.Locustflavoniodextractshadhypocholesterolaemiainvivoinhypereholesterolaemicratsinducedbyhighfatd

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