池塘養(yǎng)殖鰻鱺人工繁育技術(shù)研究

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1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文池塘養(yǎng)殖鰻鱺人工繁育技術(shù)研究姓名:謝駿申請學(xué)位級別:博士專業(yè):水生生物學(xué)指導(dǎo)教師:林浩然20041008謝駿池塘養(yǎng)殖鰻鱺人工繁育技術(shù)研究2004年10月摘要我國多年來采用降海鰻鱺作為親本進行人工繁殖研究,在理論和實踐兩方面都已取得較多成果,但以池塘養(yǎng)殖鰻鱺為親本進行人工催熟、催產(chǎn)和早期培育的研究末見報道。本論文研究了以池塘養(yǎng)殖鰻鱺作為親本,采用促性腺激素(GtH)放射免疫測定方法(GtHRIA)測定了誘導(dǎo)性腺成熟期削鰻鱺血清GtH的變化,測定了血清性類固醇激素(雌二醇E:和睪酮T)

2、的變化,研究了注射促性腺激素釋放激素類似物(GnRt卜A)和地歐酮(DOM)、人絨毛膜促性腺激素(hCG)和鯉腦垂體勻漿(CPE)、17Ⅱ,20B一雙羥孕酮(DHP)對鰻鱺排卵的影響;開展了強化親魚培育、高溫季節(jié)人工誘導(dǎo)鰻鱺成熟實驗,對鰻鱺進行了人工繁殖實驗,觀察了胚胎發(fā)育和胚后發(fā)育過程;利用PCR方法,克隆了與鰻鱺繁育相關(guān)的一氧化氮合酶基因(NOS),并進行了一氧化氮作用機理的初步研究。主要取得了以卜_的結(jié)果:1通過在飼料中添加鱈魚肝油,強化培育池塘養(yǎng)殖鰻鱺,經(jīng)過2個月的強化培育,其卯中脂肪酸的含量

3、發(fā)生變化:強化培育鰻鱺卵的高不飽和脂肪酸(PUFA)和n一3高不飽和脂肪酸顯著高于降海鰻鱺和添加豆油的鰻鱺(P

4、幅度上升。降海鰻鱺和池塘養(yǎng)殖鰻鱺人工誘導(dǎo)期間的GtH變化一致,兩者間沒有顯著差異(P>O.5)。在鰻鱺雌魚中,血清Ez水平在性腺發(fā)育后期達到高峰并且隨后在排卵后降低;在鰻鱺雄魚中,血清T水平在性腺發(fā)育后期顯著升高(P<0.01)。3當(dāng)體重指數(shù)(BWI)達115±9.12%時,卵徑達789.6±32.49m,此時為催產(chǎn)的適宜期,催產(chǎn)的效果明顯。本試驗通過采用記錄BWI變化并與觀察生殖孔開口、挖卵觀察進行比較,證明測定體重指數(shù)法的效果好、實用性強,初步中山太學(xué)博士學(xué)位豫文建立了鰻繡久_I灌熬囂量詫技術(shù)。4

5、采用hCG和鯉魚腦難體混合(CPE)組合、LHRH—A+DOM組合以及DHP對成熟鰻鱺進行催產(chǎn),均能健使鯁鳊排卵:DHP的催產(chǎn)效梁顯著優(yōu)于hCG+CPE、LItRH—A+DO~I兩種鰓合(PO.05)。不同濃度DHP誘導(dǎo)塘養(yǎng)鰻排卵實驗表明,DHP約用燮為1.O~2.0姆縫。5丌展商溫季節(jié)(7月一8月)催熟鰻鱺試驗,通過降低溫度至18±l℃,雄性鰻鯁激素筵理50囂焉(第5鐘注菇),有70%瓣令傣能夠或熟。逶過降低濕度至1

6、8±l℃,雌性嫂鱺激素處理90天后,GSI達43%:此時的自然水溫繯,瓣鯪鱺靜GSI儀秀14%左右,注射鄉(xiāng)}源激素也不能使鯁鱗性稼成熬。6鰻鱺的胚胎發(fā)育進程與溫度關(guān)系密切。在水溫為20.5℃時,胚胎發(fā)育需要時間為49h,所需積溫1005鷹·時;在水溫為22.5℃時,胚胎發(fā)育需要時間為39h,聯(lián)靄積溫878發(fā)·時;在水溫為24.5℃時,胚胎發(fā)彎需要時闥為34h,所需積溫833度·時。?在拳溱20±l℃,巍黃囊淤耀速度與日齡瓣關(guān)系曼撞數(shù)擺關(guān),可建公式Y(jié)=0.087e加5782“(R值O.9824)表示,6

7、日齡仔鰻卵黃消耗殆盡,11日齡初孵仔鯪翱黃囊潞耗究,7鶩

8、羚應(yīng)渡開鷺凝食。在7堪磊黲露,秘孵仔贛蠢日懿張合動作。在9-1lEj齡時,仔魚出現(xiàn)s型攻擊,在攻擊食物前身體彎成“s”型,然后迅速挺直身體前沖孺食。12.15日齡仔魚,板個剮兵“咬食攻擊墅”。選用輪蟲、小球藻、微囊餌料、蛋黃、鮑魚鼴精卵等培育初孵仔鰻,在輪蟲培育組中初孵仔鰻主動攝食。8通過PCR技術(shù)克隆鰻鱖一氧化氮合酶(NOS)基因。將日本鰻鱺暴瓣于濃度為3099/L的鎘溶液中2周,測定一氧化氮(NO)和鈣調(diào)鬣白(CAM)的交純滲提??p栗表鶚,

9、銹競爭蛙季露剁了缽內(nèi)銹與CaM豹結(jié)合,簿低了~氧化氮合酶的活性,從而降低了NO的產(chǎn)生。進行了NO對鰻鱺精子的影響試驗:在體矯孵育靜穗子中魏入不霞韻釜靜一鬣純氮供镩稿營鐫(SNP),發(fā)璦硝普鈉對精子活力的影響具有劑量依賴效應(yīng),低劑量時(10。o~104tool·L。)可以明撼促進耩予的運動;中劑藿(10每~104tool·L。)時對精予運動影響不大;崗劑量時(大予10。5mol·L。1)糖子活力明顯下降。在高濃度T004mol·L-1),隨時間延長,精予活

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