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《胃癌腹膜轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白myosin--9促進(jìn)胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級(jí)博士學(xué)位論文胃癌腹膜轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白Myosin一9促進(jìn)胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移Peritonelmetastasisassociatedprotein】V【yosin一9inducesmigrationandinVasionofgastriccancer課題來(lái)源：自選課題學(xué)位申請(qǐng)人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)委員張磊李國(guó)新教授外科學(xué)學(xué)術(shù)型博士研究生第一臨床醫(yī)學(xué)院蘭平教授_一l。'7、1，～雷建教授張玉新教授黃宗海教授黃祥成教授2014年5月21日廣州博士學(xué)位論文胃癌腹膜轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白M
2、yosin．9促進(jìn)胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移博士研究生：張磊指導(dǎo)教師：李國(guó)新摘要胃癌是消化道常見(jiàn)惡性腫瘤之一，近年來(lái)隨著早期診斷、胃癌根治術(shù)和新輔助放化療等的發(fā)展，其預(yù)后有所改善，但其死亡率仍居惡性腫瘤死亡率的前列。影響胃癌預(yù)后的因素有很多，其中腹膜轉(zhuǎn)移在胃癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移中十分常見(jiàn)。胃癌腹膜轉(zhuǎn)移常合并有頑固性腹水和粘連性腸梗阻等癥狀，促使患者短期內(nèi)死亡。因此，如何有效的預(yù)測(cè)與控制腹膜轉(zhuǎn)移是目前提高進(jìn)展期胃癌療效的關(guān)鍵問(wèn)題之一。目前臨床上用于胃癌腹膜轉(zhuǎn)移早期診斷的方法主要包括腹腔液細(xì)胞學(xué)檢查和分子標(biāo)志物檢查等。腹腔液細(xì)胞學(xué)檢查是目前胃癌腹膜亞
3、臨床轉(zhuǎn)移早期預(yù)測(cè)的最常用方法和金標(biāo)準(zhǔn)，但是其敏感性較低，因?yàn)椴⒎撬薪笣{膜的進(jìn)展期胃癌均能檢測(cè)出腹膜脫落癌細(xì)胞。目前用于檢測(cè)的分子標(biāo)志物指標(biāo)包括CEA、CAl25、E．鈣粘素、p1整合素、MMPs、VEGF等，但是目前國(guó)內(nèi)外基礎(chǔ)研究尚未找到一種公認(rèn)的早期預(yù)測(cè)進(jìn)展期胃癌腹膜轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物。因此如何找到有效的胃癌腹膜轉(zhuǎn)移早期預(yù)測(cè)的分子標(biāo)志物，對(duì)于提高胃癌腹膜轉(zhuǎn)移的預(yù)防和治療，改善患者的預(yù)后具有重要現(xiàn)實(shí)意義。近年來(lái)開(kāi)展的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)為揭示腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制帶來(lái)了新的希望。蛋白質(zhì)組學(xué)(proteo“cs)及其相關(guān)技術(shù)是近年來(lái)新興的分子生物
4、學(xué)分支，是以基因編碼的所有蛋白質(zhì)組為研究對(duì)象，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，從而揭示蛋白質(zhì)功能以及基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制的一個(gè)新的研究領(lǐng)域，其核心技術(shù)摘要是以雙相凝膠電泳(Two-dimension2Llp01yac巧一l觚lidegelelec仃ophoresis，2·DE)為主的蛋白質(zhì)分離技術(shù)和以質(zhì)譜(maSsspec．仃ome仃y，MS)、生物信息學(xué)(Bioinfonnatics)為主的蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)。目前已經(jīng)有許多新的差異蛋白質(zhì)組分析方法用于實(shí)踐，其中熒光差異凝膠電泳(di毹rencegelelec仃ophoresis，DIG
5、E)技術(shù)由于繼承了二維凝膠電泳(似o．dimensionalelec仃ophoresis，2-DE)的高分辨率，同時(shí)又具備高重現(xiàn)性、高靈敏度、高通量和高動(dòng)態(tài)范圍等優(yōu)勢(shì)，使得DIGE日益受到關(guān)注，成為最受歡迎的定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究手段之一。DIGE技術(shù)通過(guò)對(duì)用不同的熒光染料對(duì)不同的蛋白樣品進(jìn)行標(biāo)記，在同一塊雙向凝膠中可同時(shí)分離多種蛋白樣品，并且每塊膠上均引入了內(nèi)標(biāo)，內(nèi)標(biāo)可以進(jìn)一步增加可信度，確保結(jié)果能反映出真實(shí)的生物學(xué)差異，避免了系統(tǒng)誤差對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。目前，蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)已在多種腫瘤中用于篩選和鑒定同早期診斷、預(yù)后以及化療敏感性等
6、相關(guān)的腫瘤標(biāo)記物。綜上所述，本課題主要關(guān)注的是尋找同胃癌腹膜轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白質(zhì)，并選擇其中一個(gè)差異蛋白進(jìn)行進(jìn)一步的功能驗(yàn)證和機(jī)制的初步研究。實(shí)驗(yàn)的第一部分使用2D．DIGE分離結(jié)合MALDITOF／TOF質(zhì)譜對(duì)胃癌組織和相應(yīng)腹膜轉(zhuǎn)移組織的差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行篩選鑒定，共鑒定出27種蛋白質(zhì)。其中在胃癌腹膜轉(zhuǎn)移組織中表達(dá)上調(diào)的有23個(gè)蛋白質(zhì)，表達(dá)下調(diào)的有4個(gè)蛋白質(zhì)，這為今后研究奠定了基礎(chǔ)。然后利用生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)在上述這些差異蛋白中，Myosin．9蛋白可能在肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架重組、肌動(dòng)蛋白纖維運(yùn)動(dòng)、血管生成、細(xì)胞．細(xì)胞間黏附以及蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)
7、等生物過(guò)程中發(fā)揮重要作用，根據(jù)以上結(jié)果我們推測(cè)Myosin．9可能參與了胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程。因此第二和第三部分我們對(duì)Myosin．9進(jìn)行了更深入的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)抑制Myosin．9的表達(dá)后，細(xì)胞的遷移和侵襲能力減弱，而粘附能力增加，裸鼠腹腔播散腫瘤結(jié)節(jié)形成數(shù)目也明顯減少。然后進(jìn)一步檢測(cè)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(ep油elial．mesenchymal仃a11sition，EMT)相關(guān)標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)，抑制Myosin．9的表達(dá)后，胃癌細(xì)胞EMT過(guò)程受到抑制?；谝陨辖Y(jié)果，我們認(rèn)為Myosin．9能夠促進(jìn)胃癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力，此過(guò)程可能是II博
8、士學(xué)位論文通過(guò)促進(jìn)胃癌細(xì)胞EMT而實(shí)現(xiàn)的。雖然本實(shí)驗(yàn)證實(shí)Myosin．9影響了胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力，但是惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展是多種基因和蛋白質(zhì)相互作用的結(jié)果，任何單個(gè)基因或蛋白質(zhì)都很難全面說(shuō)明腫瘤復(fù)雜的生物學(xué)行為，且Myosill．9在胃癌中更深
