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《擬南芥氮素營養(yǎng)相關基因的圖位克隆及其初步功能驗證》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)分類號：盤"I【1籮jUDC：鋤5。：密級：單位代碼：10798擬南芥氮素營養(yǎng)相關基因的圖位克隆及其初步功能驗證Map--basedCloningofArabidopsisNNutritionGenesandPreliminary量。UnctJonalVerlllcatlonn·●_f’∽■二級學科：作物遺傳育種研究方向：分子遺傳育種研究生：麻艷超指導教師：東方陽教授徐江研究員所在院所：生命科技學院2014年6月萬方數(shù)據(jù)獨創(chuàng)性聲明lIIitlIIIIIIIIIIIIIIIIlY2762076本人聲明所呈交的學位論文是
2、本人在導師指導下進行的研究工作和取得的研究成果，除了文中特別加以標注和致謝之處外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得塑皇魚越豎整堂瞳或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學位論文作者簽名：季衣手互殛簽字日期：晰年∥月J尸日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解塑苧墾趑堙整堂睦有關保留、使用學位論文的規(guī)定。特授權塑蘭墾越堙堇堂睦可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，并采用影印、縮印或掃描等復制手段
3、保存、匯編以供查閱和借閱。同意學校向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤。(保密的學位論文在解密后適用本授權說明)學位論文作者簽名徘憋簽字日期．徹午年‘月壚萬方數(shù)據(jù)縮略詞英文縮寫英文全稱中文名稱K旺’NRNiRGS／GOGATGSGOGATASCPSaseRFLPPCRRAPDDAFSSRSSLPISSRSTSSCARAminoAcidTransporterNitrateReductaseNitriteTeductaseGlutamineSynthetase／GlutamateSynthasePathwayGlutami
4、neSynthetaseGlutamateSynthaseAsparagineSynthetaseCarbamylPhosphataseRestrictionFragmentLengthPolymorphismPolymeraseChainReactionRandomAmplifiedPolymorphicDNAAmplifiedFingerprintsSimpleSequenceRepeatsSimpleSequenceLengthPolymorphismInter-simpleSequenceRepeatSequence
5、TaggedSiteSequenceSharacterizedAmplifiedRegion氨基酸轉運體硝酸還原酶亞硝酸還原酶谷氨酰胺合成酶／谷氨酸合成酶途徑谷氨酰胺合成酶谷氨酸合成酶天冬酰胺合成酶氨甲酰磷酸酶限制性長度多態(tài)性聚合酶鏈反應隨機擴增多態(tài)性DNA分子標記DNA擴增指紋簡單序列片段簡單序列長度多態(tài)性簡單序列重復間區(qū)序列標簽位點序列特征化擴增區(qū)域cAPscleavedAmplifiedP。lYmorpllic酶切擴增多態(tài)性序列CS曰母訓珂瑁多念1王t}予少USequenceDeftvedCleavedAmplifie
6、dPolymorphic衍生的酶切擴增多態(tài)性dcAPss．equence序列廠r歲USNPSingleNucleotidePolymorphism單核苷酸多態(tài)性AS—PCRAllele．SpecificPCR等位基因特異性PCR萬方數(shù)據(jù)摘要氮素是植物生長發(fā)育所必需的礦質元素之一，同時是影響農作物產量的主要因素之一。隨著氮素資源和環(huán)境問題日益嚴峻，利用轉基因技術提高作物的氮素利用效率具有重要的理論和應用價值。本研究以由EMS誘變擬南芥C01．0生態(tài)型背景材料獲得的兩株耐低氮突變體Int3和Int5為材料，利用基因圖位克隆的方法
7、，篩選到與擬南芥氮素營養(yǎng)相關的重要基因。利用Int3突變體材料成功克隆到TT8基因，在擬南芥中，m基因的表達產物為TT8蛋白，該蛋白屬于堿性螺旋．環(huán)一螺旋(basic．helix—loop．helixdomain．bHLH)轉錄因子。在Int3突變體中，m基因外顯子上的第760個堿基由C突變?yōu)門，導致編碼氨基酸的密碼子由CAA突變?yōu)榻K止密碼子UAA，氨基酸翻譯提前終止，基因發(fā)生無義突變；通過對Int5突變體氮素相關基因圖位克隆，最終將目的基因定位于SSLP分子標記5-5654與5-5443兩個分子標記之間，標記之間距離為21
8、lkb，跨越了MKPll、F2K13和F5E19共3個BAC重疊克隆群。本研究還開發(fā)了21對SSLP分子標記和兩對CAPS分子標記，同時改進了根據(jù)SNP位點等位基因差異設計分子標記的方法，為基因檢測和圖位克隆提供更豐富的分子標記資源，節(jié)省研究時間，提高克隆效率。目前，丁髓基因研究表明該基因
