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《雷公藤甲素、人羊膜包裹同種異體神經(jīng)修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文雷公藤甲素、人羊膜包裹同種異體神經(jīng)修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)研究姓名：王洪慶申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：田德虎201203中文摘要雷公藤甲素、人羊膜包裹同種異體神經(jīng)修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)研究摘要目的：隨著現(xiàn)代社會(huì)的發(fā)展，道路交通事故、各種外傷的發(fā)生率逐年增加，周圍神經(jīng)損傷及缺損的病人在臨床上日漸增多。在多數(shù)情況下，缺損距離<6cm的情況下，可以通過對(duì)神經(jīng)的游離來修復(fù)，當(dāng)缺損>6cm時(shí)，常常需要進(jìn)行移植來修復(fù)缺損，目前臨床治療神經(jīng)缺損的金標(biāo)準(zhǔn)是自體神經(jīng)移植。但是可供選取的自體神經(jīng)有限，并且造成神經(jīng)支
2、配區(qū)感覺和運(yùn)動(dòng)功能的障礙。近年來同種異體神經(jīng)移植因其原材料來源廣泛、在結(jié)構(gòu)上類似及容易獲得等優(yōu)點(diǎn)成為學(xué)者們研究的重點(diǎn)，但其存在的主要問題是粘連和免疫排異反應(yīng)，因?yàn)檫@些問題未能解決，所以同種異體神經(jīng)的臨床應(yīng)用尚無突破性進(jìn)展。如何減輕同種異體神經(jīng)移植后引起的免疫排斥反應(yīng)及其所導(dǎo)致的神經(jīng)粘連問題一直是困擾臨床廣泛應(yīng)用的最大難題。雷公藤甲素是中藥雷公藤的重要活性成分，具有抗炎、抗免疫、抗腫瘤的作用。羊膜是一種半透膜，其獨(dú)有的結(jié)構(gòu)可以阻止很多物質(zhì)通過，能將異種細(xì)胞、組織等包裹于囊內(nèi)，起到機(jī)械屏障的作用，可避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)并且羊膜包裹神
3、經(jīng)吻合口后，建立了一個(gè)相對(duì)密閉的空間，減輕吻合口周圍粘連，防止瘢痕組織形成和減少神經(jīng)生長因子流失，并為神經(jīng)修復(fù)提供更佳的微環(huán)境，提高神經(jīng)的修復(fù)效果。本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建大鼠坐骨神經(jīng)缺損模型，行同種異體神經(jīng)移植，移植段給予人新鮮羊膜包裹并給予雷公藤甲素，通過大體觀察、光鏡觀察、電鏡掃描、流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)、神經(jīng)電生理檢測(cè)、坐骨神經(jīng)功能指數(shù)、小腿三頭肌濕重恢復(fù)率等指標(biāo)分析、探討雷公藤甲素、人羊膜包裹同種異體神經(jīng)修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的可行性。方法：選取體重200"---,2509健康SD大鼠80只，雌雄不分，隨機(jī)分成A(雷公藤甲素和人羊膜包裹同種異體神
4、經(jīng)組)、B(同種異體神經(jīng)組)兩組，每組40只。兩組動(dòng)物均在右側(cè)股部暴露并切除一段坐骨神經(jīng)(10mm)，將兩段切取的神經(jīng)交換吻合(均以10．0尼龍無損傷縫合線作單純中文摘要間斷縫合)，制備同種異體神經(jīng)模型，A組異體神經(jīng)用羊膜包裹并輔以雷公藤甲素，B組為對(duì)照組。術(shù)后2、4和8周行大體觀察，并分別于損傷遠(yuǎn)、近端2mm處及損傷中段取長2mm的神經(jīng)段，HE染色，光鏡下觀察；分別于術(shù)后2、4和8周取標(biāo)本，透射電鏡觀察；分別術(shù)后3d、7d、14d和21d斷尾取外周血，做流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)cd4、cd8及cd4／cd8；術(shù)后8周行神經(jīng)電生理檢測(cè)及三
5、頭肌濕重測(cè)量；術(shù)后4、8周進(jìn)行大鼠足印分析，計(jì)算坐骨神經(jīng)功能指數(shù)及其恢復(fù)率。所有數(shù)據(jù)均進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果：1、大體觀察：1．1兩組大鼠術(shù)后手術(shù)切口均未出現(xiàn)感染，12天后切口拆線，一期愈2k口o1．2術(shù)后2周大部出現(xiàn)下肢稍腫脹，活動(dòng)明顯減少且跛行，精神差，進(jìn)食少，2周后精神狀態(tài)及飲食逐漸恢復(fù)。1．3術(shù)后2周羊膜局部稍有吸收，4周大部吸收，8周完全吸收。1．4A組移植段神經(jīng)和周圍組織稍有粘連且粘連較疏松，B組移植段神經(jīng)和周圍組織廣泛緊密粘連，鈍性不易分離。2、光鏡觀察：術(shù)后2、4、8周A組神經(jīng)恢復(fù)情況明顯優(yōu)于B組。3、電鏡觀察：術(shù)
6、后2周A組髓鞘增生，部分板結(jié)構(gòu)有分層、剝離現(xiàn)象。B組髓鞘明顯增生，板層樣結(jié)構(gòu)融合，模糊不清，微絲、微管明顯減少，部分髓鞘有分層現(xiàn)象；術(shù)后4周A組軸索稍水腫，線粒體、微絲、微管等細(xì)胞器數(shù)量逐漸增多。B組髓鞘仍腫脹明顯，板層結(jié)構(gòu)不清楚、有分離現(xiàn)象，線粒體、微絲、微管等細(xì)胞器較A組少。術(shù)后8周A組髓鞘較薄，光滑，板層結(jié)構(gòu)清晰，軸索中線粒體、微絲、微管明顯增多且形態(tài)規(guī)則。B組髓鞘可見輕度增生、水腫，軸索中線粒體、微絲、微管數(shù)量稍減少。4、流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)：A、B兩組大鼠術(shù)后第3d、第7d、第14d、第28dCD4、CD8陽性細(xì)胞百分率及C
7、D4／CD8比較，結(jié)果見附表。由表1可以看出，術(shù)后第3d，A組和B組小鼠外周血CD4、CD8陽性細(xì)胞百分率和CD4／CD8比值均增高，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析沒有顯著性差異；術(shù)后第7d，A組和B組小鼠外周血CD4、CD8陽性細(xì)胞百分率和CD4／CD8比值均增高，但B組增高明顯，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有顯著性差異；第14d，A組和B組小鼠外周血CD4、CD8陽性細(xì)胞百分率和CD4／CD8比值均繼續(xù)增高，但B組增高明顯，統(tǒng)計(jì)學(xué)分中文摘要析有顯著性差異；第28d，A、B兩組小鼠外周血CD4、CD8陽性細(xì)胞百分率和CD4／CD8比值相對(duì)下降，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有顯著性差
8、異。5、神經(jīng)電生理檢測(cè)：術(shù)后8周神經(jīng)電生理檢測(cè)結(jié)果顯示，B組比A組潛伏期長，神經(jīng)傳導(dǎo)速度慢、波幅低，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有顯著性差異(P
