rna干擾txr1基因?qū)Ρ茄拾┘?xì)胞耐藥的影響

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1、中圖分類號UDCR76610學(xué)校代碼10533博士學(xué)位論文RNA干擾TXRl基因?qū)Ρ茄拾┘?xì)胞耐藥的影響RNAInterferenceofTaxolResistantGene1EnhancedtheSensitivityofPaclitaxelinTaxolResistantCellsofNasopharyngealCarcinoma一一一'一一作者姓名:學(xué)科專業(yè):卿翔臨床醫(yī)學(xué)研究方向:耳鼻咽喉科學(xué)學(xué)院(系、所):湘雅三醫(yī)院導(dǎo)師:譚國林教授論文答辯日期盤墮』:立答辯委員會主中南大學(xué)2013年5月原創(chuàng)性聲明lIIIlUlUlHI111111IIIlUIY2423841本人聲明,所呈交的學(xué)位論文是

2、本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者簽名:幺塑學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文,允許學(xué)位論文被查閱和借閱;學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》,

3、并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。RNA干擾TXRl基因?qū)Ρ茄拾┘?xì)胞耐藥的影響摘要:目的:探索TXRl基因在鼻咽癌紫杉醇耐藥中的作用,利用RNA干擾技術(shù)抑制鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞CNE.1/Taxol的TXRl基因表達(dá),同時(shí)研究TXRl基因的表達(dá)與鼻咽癌紫杉醇耐藥的相關(guān)性。方法:1.通過脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染siRNA至鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株CNE.1廠RⅨol。2.利用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR、Western.blot方法分別檢測RNA干擾前、后的鼻咽癌紫杉醇耐藥CNE.1/Taxol細(xì)胞株的TXRl基因表達(dá)差異。3.利用MTT實(shí)驗(yàn)檢測TXRl基因表達(dá)抑制后的鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞CNE一1/Taxo

4、l的耐藥性變化,觀察TXRl基因在紫杉醇耐藥過程中的作用。結(jié)果:1.針對TXRl基因的siRNA轉(zhuǎn)染耐藥細(xì)胞CNE.1/Taxol后,耐藥細(xì)胞TXRI的mRNA及蛋白表達(dá)均明顯下調(diào)。干擾組和陰性對照組的mRNA表達(dá)分別是脂質(zhì)體組mRNA表達(dá)量的0.12士0.02倍、0.97士0.07倍,干擾組分別和陰性對照組、脂質(zhì)體組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。干擾組、陰性對照組的蛋白表達(dá)量分別是脂質(zhì)體組的0.36+0.07、1.02士0.03倍,干擾組與脂質(zhì)體組、陰性對照組的蛋白表達(dá)相比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。2.TXRl基因表達(dá)抑制后,CNE.1/Taxol對紫杉醇的敏感性顯

5、著增高,其IC50值降低了2.12倍,從而部分逆轉(zhuǎn)CNE.1/Taxol耐藥。結(jié)論:.1.特異性siRNA分子能有效的抑制鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞的TX剛基因表達(dá)。2.運(yùn)用RNA干擾技術(shù)抑制TXRl基因可能部分逆轉(zhuǎn)人鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞CNE.1/Taxol的耐藥性。TXRl基因可能成為逆轉(zhuǎn)鼻咽癌細(xì)胞紫杉醇耐藥及腫瘤治療的靶分子。圖7幅,表2個(gè),參考文獻(xiàn)53篇關(guān)鍵詞:TXRl:RNA干擾;紫杉醇;耐藥細(xì)胞株;鼻咽癌分類號:R76RNAInterferenceofTaxolResistantGene1EnhancedtheSensitivityofPaclitaxelinTaxolResistan

6、tCellsofNasopharyngealCarcinomaABS’I’RACT:objectives:ToexploretheroleofTXRlplayedintaxolresistanceofnasopharyngealcarcinoma,theexpressionofTXRlgeneswaskockeddownbyinterferenceinpaclitaxelresisitantcellsofnasopharyngealcarcinoma,andthecorrelationwasanalyzedbetweentheexpressionofTXRlgenesandpaclitaxe

7、lresistance.Methods:1.TXRlsiRNAwastransfectedintotheNPCCNE-1/Taxolcellsbyusingliposomes2000.2.TheexpressionalchangeofbothTXRlmRNAandproteinwasdetectedbyrealtimeRT-PCRandwesternblot,respectively.3.Proliferat

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