丙泊酚對大鼠神經(jīng)干細胞增殖和遷移的調(diào)控

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1、萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目：丙泊酚對大鼠神經(jīng)干細胞增殖和遷移的調(diào)控答辯委員會主席：薛張綱教授復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院答辯委員會成員：高防教授英國伯明翰大學(xué)上官王寧副教授溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院論文答辯日期：2014年5月26日萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文四、立、六、七、／、．，九、T、目錄縮略詞表???????????????????1中文摘要???????????????????7英文摘要???????????????????4—}L—-剛吾?????????????????????6材料和方法??????????????????71、第一部分?????????????????

2、72、第二部分?????????????????1】3、第三部分?????????????????154、第四部分?????????????????26分析與討論??????????????????29參考文獻???????????????????32致謝????????????????????3s發(fā)表的論文??????????????????36綜述?????????????????????37學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明??????????????46坼，I^，寶良1／。護．P∥洲，二彳f版墳．立扣昂k卻蓼影L7秒嬋移．娩玉哆萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文縮略詞表(按字母順序)縮寫詞英文全稱中文全

3、稱DEPCDiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯DⅣ匝MDulbecco’SModifiedEagleMedium達爾伯克氏改良伊格培養(yǎng)基E15TheEmbryoof15days15天的胚胎Edu5-ethynyl一2'-deoxyuridine5．乙炔基．2’．脫氧尿苷PBSPhosphateBufferedSaline磷酸鹽緩沖液q-PCRRaeltimetranscriptasePolymerase實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法ChainReactionStat3Signaltransducerandactivatorof信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3transcription3So

4、x2SRY(sexdeterminingregionY1-box2性別決定基因相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子一211—6Interleukin一6白細胞介素一6EGFEpidermalgrowthfactor表皮生長因子bFGFBasicfibroblastgrowthfactor堿性成纖維生長因子萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文丙泊酚對大鼠神經(jīng)干細胞增殖和遷移的調(diào)控中文摘要目的觀察丙泊酚對懷孕15天(E15)大鼠大腦皮層神經(jīng)干細胞(NSCs)增殖和遷移的影響并探討問題其可能機制。方法l、分離E15天sD大鼠大腦皮層進行神經(jīng)干細胞原代培養(yǎng)。以(卜2)*106／ml細胞密度接種，在含有2％B27，20ng／mlb

5、FGF，20ng／mlEGF的DMEM／F12的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并穩(wěn)定傳至第三代。用Nestin細胞免疫化學(xué)染色法鑒定神經(jīng)干細胞，Nestin陽性率大于95％，表示傳至第三代的細胞仍為神經(jīng)干細胞。2、將原代培養(yǎng)至第三代的神經(jīng)干細胞隨機分為4組：空白組，終濃度為0．1％的DMS0組，丙泊酚終濃度為20與50uM組，放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)12h。3、取分組的神經(jīng)干細胞，經(jīng)藥物處理培養(yǎng)2小時后，加入終濃度為10pM的Edu，繼續(xù)培養(yǎng)4小時后進行Edu免疫熒光染色，用Edu的陽性率檢測神經(jīng)干細胞的增殖能力。4、取分組的神經(jīng)干細胞，經(jīng)藥物處理培養(yǎng)6小時后，收集神經(jīng)干細胞按照Tirzal試劑的說明書提取各組細

6、胞的總RNA，再將其逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后，采用熒光實時定量聚合酶鏈反應(yīng)法(Real—TimePeR)檢測各組樣本中Stat3、Sox2和NotchlmRNA的含量。5、取分組的神經(jīng)干細胞，經(jīng)藥物處理培養(yǎng)6小時后，收集各組神經(jīng)干細胞并提取總蛋白，采用Westernblotting法檢測Stat3及p-Stat3蛋白含量的表達；6、取分組的神經(jīng)干細胞，經(jīng)藥物處理培養(yǎng)6小時后，將神經(jīng)干細胞接種到Transwell板中，用遷移至小板下室的細胞數(shù)量表示神經(jīng)干細胞的遷移能力。結(jié)果l、與空白組相比，Edu免疫熒光染色檢測結(jié)果表明，丙泊酚組促進了神經(jīng)干細胞增殖能力(P

7、結(jié)果發(fā)現(xiàn)，丙泊酚組Stat3與Sox2mRNA的含量上升顯著(P<0．05)；3、與空白組相比，Westernblotting檢測結(jié)果表明，丙泊酚組p．Stat3蛋白的表達量增加(尸<0．05)，但總Stat3蛋白表達量無變化；4、與空白組相比，Transwell板檢測的結(jié)果顯示了丙泊酚具有促進神經(jīng)干細胞遷移的能力(氏0．05)。萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)論丙泊酚可導(dǎo)致神經(jīng)干細胞的增殖和遷