wnt3a對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化影響的研究

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1、中圖分類號:學(xué)校代碼:10055密級:公開蠢鹽犬法博士學(xué)位論文Wnt3a對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化影響的研究TheresearchofinfluencesOilWnt3atothechondrogenesisof論文作者些峰學(xué)科專業(yè)皇b抖堂BMSCs培養(yǎng)單位醫(yī)堂瞳答辯委員會主席趁墓羞評閱人熬墓菱金苤閻奎國王毯丞圈4董墊墮南開大學(xué)研究生院二。一三年五月南開大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)書根據(jù)《南開大學(xué)關(guān)于研究生學(xué)位論文收藏和利用管理辦法》,我校的博士、碩士學(xué)位獲得者均須向南開大學(xué)提交本人的學(xué)位論文紙質(zhì)本及相應(yīng)電子版。本人完全了解南開大學(xué)有關(guān)研究生學(xué)位

2、論文收藏和利用的管理規(guī)定。南開大學(xué)擁有在《著作權(quán)法》規(guī)定范圍內(nèi)的學(xué)位論文使用權(quán),即:(1)學(xué)位獲得者必須按規(guī)定提交學(xué)位論文(包括紙質(zhì)印刷本及電子版),學(xué)??梢圆捎糜坝?、縮印或其他復(fù)制手段保存研究生學(xué)位論文,并編入《南開大學(xué)博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》;(2)為教學(xué)和科研目的,學(xué)校可以將公開的學(xué)位論文作為資料在圖書館等場所提供校內(nèi)師生閱讀,在校園網(wǎng)上提供論文目錄檢索、文摘以及論文全文瀏覽、下載等免費(fèi)信息服務(wù);(3)根據(jù)教育部有關(guān)規(guī)定,南開大學(xué)向教育部指定單位提交公開的學(xué)位論文;(4)學(xué)位論文作者授權(quán)學(xué)校向中國科技信息研究所及其萬方數(shù)據(jù)電子出版社

3、和中國學(xué)術(shù)期刊(光盤)電子出版社提交規(guī)定范圍的學(xué)位論文及其電子版并收入相應(yīng)學(xué)位論文數(shù)據(jù)庫,通過其相關(guān)網(wǎng)站對外進(jìn)行信息服務(wù)。同時本人保留在其他媒體發(fā)表論文的權(quán)利。非公開學(xué)位論文,保密期限內(nèi)不向外提交和提供服務(wù),解密后提交和服務(wù)同公開論文。論文電子舨提交至校圖書館網(wǎng)站:http://202。113。20.161:8001/index.htm。本人承諾:本人的學(xué)位論文是在南開人學(xué)學(xué)習(xí)期問創(chuàng)作完成的作品,并已通過論文答辯;提交的學(xué)位論文電子版與紙質(zhì)本論文的內(nèi)容一致,如因不同造成不良后果由本人自負(fù)。本人同意遵守上述規(guī)定。本授權(quán)書簽署一式兩份,由研究生

4、院和圖書館留存。作者暨授權(quán)人簽字:曲蝰2013年5月21日南開大學(xué)研究生學(xué)位論文作者信息論文題目Wnt3a對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化影響的研究姓名曲峰學(xué)號1120100389答辯日期2013年5月21日論文類別博士一學(xué)歷碩士口碩士專業(yè)學(xué)位口高校教師口同等學(xué)力碩十口院/系/所醫(yī)學(xué)院專業(yè)外科學(xué)聯(lián)系電話13466682369Emailqfortho@163.corn.‘通信地址(郵編):北京市海淀區(qū)復(fù)興路28號解放軍總醫(yī)院外科樓骨科六病區(qū)備注:是否批準(zhǔn)為非公開論文否注:本授權(quán)書適用我校授予的所有博士、碩士的學(xué)位論文。由作者填寫(一式兩份)簽字后

5、交校圖書館,非公開學(xué)位論文須附《南開大學(xué)研究生申請非公開學(xué)位論文審批表》。南開大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的研究成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本學(xué)位論文的研究成果不包含任何他人創(chuàng)作的、已公丌發(fā)表或者沒有公開發(fā)表的作品的內(nèi)容。對本論文所涉及的研究工作做出貢獻(xiàn)的其他個人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:酋蝰2013年5月21日非公開學(xué)位論文標(biāo)注說明(本頁表中填寫內(nèi)容須打印)根據(jù)南開大學(xué)有關(guān)規(guī)定,非公開學(xué)位論文須經(jīng)指導(dǎo)教師

6、同意、作者本人申請和相關(guān)部門批準(zhǔn)方能標(biāo)注。未經(jīng)批準(zhǔn)的均為公開學(xué)位論文,公開學(xué)位論文本說明為空白。論文題目申請密級口限$0(42年)口秘密(≤10年)口機(jī)密(420年)保密期限20年月日至20年月日審批表編號批準(zhǔn)日期20年,月日南開大學(xué)學(xué)位評定委員會辦公室蓋章(有效)注:限制★2年(可少于2年):秘密★10年(可少于10年);機(jī)密★20年(可少于20年)中文摘要目的:觀測Wnt3a過表達(dá)后骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)成軟骨能力的變化,以及Wnt3a影響B(tài)MSCs增殖、分化的相關(guān)機(jī)制。方法:通過慢病毒在大鼠BMSCs中分別導(dǎo)入Wnt3a基因和

7、Mock(陰性無功能基因片段)基因;使用熒光顯影及WesternBlot對導(dǎo)入效果進(jìn)行鑒定。MTT法分析Wnt3a對BMSCs增殖的作用,進(jìn)而甲苯胺藍(lán)染色檢測基質(zhì)蛋白聚糖的生成情況,并使用實(shí)時熒光定量PCR檢測軟骨分化標(biāo)志基因COL2A1、Aggrecan和SOX9的mRNA水平。通過觀測[3-catenin、cE+、磷酸化CaMKII等蛋白與離子的變化判斷Wnt3a影響B(tài)MSCs軟骨分化的途徑,并使用DKKl和KN93分別抑制經(jīng)典及非經(jīng)典途徑,以分析各途徑在Wnt3a影響B(tài)MSCs增殖、分化過程中的作用。結(jié)果:所有BMSCs經(jīng)慢病毒感染后

8、用熒光顯微鏡可觀察到綠色熒光蛋白表達(dá);WesternBlot發(fā)現(xiàn)Wnt3a轉(zhuǎn)染BMSCs后,其基因能夠表達(dá)。MTT分析顯示過表達(dá)Wnt3a的BMSCs增殖率顯著高于對照組(P

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