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《ems誘變花蕾結(jié)合小孢子培養(yǎng)獲得大白菜突變體的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、分類號：密級：$634坌玨EMS誘變花單位代碼：學號：10086201033l結(jié)合小孢子培養(yǎng)獲得大白菜突變體的研究ResearchonmutantsofChinesecabbagebyEMSmutagenicbudscombiningwithmicrosporeculture學位申請人：代雙艷指導教師：申書興教授王彥華副教授學科專業(yè)：蔬菜學學位類別：農(nóng)學碩士授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學答辯日期：二0一三年六月二日蒂田獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)
2、發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得塑韭盔些盤塋或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名：代奴輜簽字日期：加}抨6月2日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解塑蘭墾盔些盤堂有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權塑蘭墾壘些苤堂可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)學位論文作者簽名
3、：平弋奴耗導師簽名：％端誰孕I。f簽字同期：州3年占月2日簽字F了期：加J弓年‘月2同學位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：通訊地址：電話：郵編：摘要大白菜(Brassicacampestrisssp．pekinensis)是原產(chǎn)我國的重要蔬菜，在我國冬季的蔬菜供應中居重要地位。大白菜育種材料單一已成為育種取得突破性進展的瓶頸，創(chuàng)造具有豐富遺傳基礎的育種材料是大白菜育種工作者研究的重點之一。人工誘變可使自然突變率提高千倍以上，但人工誘變多為隱性突變，將人工誘變與小孢子培養(yǎng)相結(jié)合，可以迅速獲得基因型純合的突變體。本研究以10份不同基因型大白菜‘A01’、‘A06’、
4、‘23P02’、‘85一l’、‘12—2’、‘12-7’、‘A03’、‘A12’、‘A16’和‘A19’為試驗材料，采用EMS為誘變劑，分別進行了種子誘變、花蕾誘變結(jié)合游離小孢子培養(yǎng)方法的研究，確定了不同處理方法適宜的EMS濃度和處理時間，并對種子誘變后代和花蕾誘變后小孢子植株進行了形態(tài)學鑒定及分子輔助鑒定，獲得了不同類型的變異材料。主要研究結(jié)果如下：1．以7份不同基因型大白菜種子為材料，研究了不同EMS濃度和時間浸泡種子后種子的發(fā)芽率和成苗率。結(jié)果表明，在0-0．896濃度范圍內(nèi)，隨著EMS濃度的增大，種子的發(fā)芽率和成苗率逐漸降低，初步確定大白菜種子誘變處理
5、的適宜EMS濃度為0．4％~O．6％，處理時間為4。6h。2．通過對‘A01’、‘A03’、‘A06’和‘23P02’種子誘變M：代植株進行全部形態(tài)學鑒定和部分分子學鑒定，共獲得49株突變株。從170株‘A01’的M。代中篩選到6株葉片變異株，1株晚抽薹變異株；83株‘A06’的M：代植株中，葉片變異2株；76株‘23P02’的M。代植株中，7株包球方式變異株，l株大花冠變異株；285株‘A03’誘變?nèi)后w中，1株花蕾變異株，9株子葉變異株，7株苗期葉片變異株，15株花器變異株。3．以‘85—1’、‘12—2’、‘12—7’、‘A03’和‘A19’為試驗材料，進
6、行花蕾誘變后結(jié)合小孢子培養(yǎng)，設置誘變濃度和時間梯度，篩選出在葉形、葉色、花冠大小、花色、抽薹性、抗霜霉病上的基因型純合突變體74株，突變頻率15．6％。綜合考慮小孢子出胚率、成苗率及有效突變體數(shù)，初步確定EMS誘變花蕾并結(jié)合小孢子培養(yǎng)這一技術適宜的濃度范圍為0．03．0．1％、處理時間5～lOmin。4．通過對EMG花蕾誘變后小孢子培養(yǎng)的再生植株倍性調(diào)查，發(fā)現(xiàn)在獲得的再生植株中二倍體植株所占的比例，隨EMS濃度增大而降低，單倍體所占比例隨EMS濃度增大而升高，初步證明EMS在誘變過程中對染色體的加倍起到抑制作用。5．通過對大白菜EMS種子誘變和花蕾誘變結(jié)合小孢
7、子培養(yǎng)兩種誘變方法的比較研究，證明EMS花蕾誘變結(jié)合小孢子培養(yǎng)這一新方法可行，比種子誘變和小孢子誘變方法均有優(yōu)勢，并且獲得的變異類型比較豐富，為EMS誘變技術在大白菜種質(zhì)資源創(chuàng)新中的應用開辟了新的途徑。6．通過對EMS花蕾誘變后小孢子培養(yǎng)的再生植株的HRM檢測，篩選出花色突變體4株。并且通過與片段直接測序法相比較，證明HRM篩選EMS突變體方法可行，操作簡單、成本低、高通量。關鍵詞：大白菜；EMS；誘變；小孢子培養(yǎng)；Indd；HRMResearchonmutantsofChinesecabbagebyEMSmutagenicbudscombiningwithm
8、icrosporecultureAut
