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《基于微流控芯片的循環(huán)肝癌細(xì)胞檢測(cè)和微量腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文基于微流控芯片的循環(huán)肝癌細(xì)胞檢測(cè)和微量腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)IsolationofCirculatingTumorCellsinPatientswithHepatocellularCarcinomaandTraceTumorCellCultureUsingMicrofluidicChip博士生導(dǎo)師學(xué)科、專業(yè)培養(yǎng)單位答辯日期2013年05月lO日張妤殷正豐教授腫瘤學(xué)東方肝膽外科醫(yī)院2013年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表
2、或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。學(xué)位論文作者簽名:餅日期:矽I多年,月I夕日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)聲明本人完全了解第二軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,第二軍醫(yī)大學(xué)有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)第二軍醫(yī)大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū))學(xué)位論文作者簽名:研日期:和l弓年y月I
3、口日聊躲移日期:7/ol;年r目錄摘要????????????????????????????????????.1一ABSTRACT???????????????????????????????????..4.縮略詞表???????????????????????????.7.前言????????????????????????????????????.99.且lJ舌????????????????????????????????????_-第一部分基于化學(xué)反應(yīng)原理的循環(huán)肝癌細(xì)胞分選微流控芯片??.12.材料與方法???????????
4、??????????????...13.一、實(shí)驗(yàn)材料????????????????????????..13.(一)主要化學(xué)藥品和生物試劑???????????????...13.(二)肝癌患者和健康志愿者血液樣本采集??????????..13.(三)主要實(shí)驗(yàn)耗材和儀器?????????????????..14一(四)主要溶液配制?????????????????????.14一二、實(shí)驗(yàn)方法???????????????????????...14.(一)芯片設(shè)計(jì)???????????????????????.14.(二)芯片制作???
5、????????????????????.15.(--)芯片表面功能性化學(xué)修飾????????????????.17.(四)細(xì)胞培養(yǎng)???????????????????????..18.(五)細(xì)胞免疫熒光染色鑒定?????????????????..18.(六)肝癌CTCS鑒定和計(jì)數(shù)?????????????????..19.(七)優(yōu)化最佳進(jìn)樣速度和最佳尺寸微米柱??????????..19.(八)細(xì)胞摻入試驗(yàn)評(píng)價(jià)循環(huán)肝癌細(xì)胞分離/檢測(cè)系統(tǒng)的回收率和特異性?????????????????????????????????????...
6、20.(九)HCC患者血樣CTCs檢測(cè)?????????????????.20.(十)統(tǒng)計(jì)分析方法??????????????????????..21.三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果????????????????????????.21.(--)CTCs微流控分選芯片??????????????????..21.(二)優(yōu)化最佳進(jìn)樣速度和芯片微米柱最佳尺寸?????????.22.(三)細(xì)胞摻入試驗(yàn)評(píng)價(jià)循環(huán)肝癌細(xì)胞分離/檢測(cè)系統(tǒng)的回收率和特異性.?????????.???.??.??.??.?????.??.??.??..????..?..一:13-(四)
7、肝癌患者和健康志愿者血液樣本檢測(cè)結(jié)果????????..26.討論???????????????????????????????????..29.第二部分基于化學(xué)和物理特性的循環(huán)肝癌細(xì)胞????????...30.分選微流控芯片???????????????????????...30.材料與方法?????????????????????????..30.一、實(shí)驗(yàn)材料????????????????????????.30.(一)主要化學(xué)藥品和生物試劑????????????????.30.(二)主要實(shí)驗(yàn)耗材和儀器?????????????
8、?????.30.二、實(shí)驗(yàn)方法????????????????????????.31.(一)芯片設(shè)計(jì)??????????????????????...31-(二)芯片制作??????????????????