light在子癇前期中的作用及機(jī)制研究

《light在子癇前期中的作用及機(jī)制研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。

1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)中國(guó)分類號(hào)＆2壘叢VDC61O博士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q§多呈密級(jí)公玨LIGHT在子癇前期中的作用及機(jī)制研究BiologicalfunctionsandmolecularmechanismsofLIGHTinthepathogenesisofpreeclampsia作者姓名：王維學(xué)科專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)研究方向：腎臟病學(xué)學(xué)院(系、所)：湘雅醫(yī)院指導(dǎo)教師：陶立堅(jiān)教授中南大學(xué)二零一三年斗‘一月一夸一二，平1-．一月萬(wàn)方數(shù)據(jù)原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或

2、撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明。作者簽名：日期：也立年』月挈日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國(guó)家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。作者簽名：導(dǎo)師簽名i蔓墊蘭日期：土竺三年旦月』抽萬(wàn)方數(shù)據(jù)摘要

3、第一章LIGHT在子癇前期中的致病作用研究研究背景：子癇前期是一種常見(jiàn)的妊娠期疾病，是導(dǎo)致母嬰死亡的主要原因，其主要臨床表現(xiàn)為高血壓和蛋白尿。子癇前期的發(fā)病機(jī)制尚不明確，使其治療手段十分局限。目前認(rèn)為免疫系統(tǒng)紊亂，過(guò)度的炎癥活躍參與了該病的發(fā)生發(fā)展。在前期研究中，我們運(yùn)用ELISAarray的方法檢測(cè)了一系列的炎癥因子在子癇前期患者血漿中的表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)新型的腫瘤壞死因子超家族成員14(TumorNecrosisFactorSuper-familymember14，TNFSF14／LIGHT)在子癇前期患者母體循環(huán)中增高最為明顯。LIGHT是近年來(lái)研究較熱的一種新型炎癥因子

4、，參與了多種免疫相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展，它有兩種跨膜型受體．單純皰疹病毒進(jìn)入介導(dǎo)子(HerpesVirusEntryMediator，HVEM／TNFRSFl4)和淋巴毒素p受體(LymphotoxinpReceptor，LTl3R／TNFRSF3)。這兩種受體分別在不同的病理生理過(guò)程中介導(dǎo)LIGHT不同的生物學(xué)功能。本實(shí)驗(yàn)在前期研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討LIGHT在子癇前期中的生物學(xué)效應(yīng)以及分子機(jī)制。目的：觀察LIGHT在子癇前期患者循環(huán)及胎盤中的表達(dá)情況；研究LIGHT對(duì)妊娠小鼠和非妊娠小鼠血壓和尿蛋白的影響；并進(jìn)一步探討LIGHT對(duì)妊娠小鼠胎盤和腎臟組織形態(tài)學(xué)以及LIGHT對(duì)非妊

5、娠小鼠腎臟組織形態(tài)學(xué)的影響。方法：1．收集子癇前期患者以及正常孕婦的血清和分娩后的胎萬(wàn)方數(shù)據(jù)盤組織，用ELISA檢測(cè)循環(huán)中LIGHT表達(dá)水平，免疫組化及westernblot檢測(cè)胎盤組織LIGHT及其受體HVEM和LTIBR的表達(dá)。2．將重組小鼠LIGHT注射到C57／BL6妊娠小鼠以及同等周齡的非妊娠小鼠體內(nèi)；分別使用HVEM和LTIBR的中和性抗體阻斷兩者與LIGHT的相互作用。每天監(jiān)N,h鼠尾動(dòng)脈血壓；ELISA方法檢測(cè)尿微量白蛋白水平。干預(yù)5天后處死動(dòng)物，收集胎盤及腎組織行H&E、PAS染色以及電鏡檢查。結(jié)果：1．子癇前期患者血清中LIGHT的表達(dá)水平較正常孕婦明顯增高

6、；LIGHT及其受體HVEM和LTI]R在人類胎盤組織均有表達(dá)，并且三者的表達(dá)水平在子癇前期患者中均有顯著上調(diào)。2．妊娠小鼠和非妊娠小鼠在LIGHT干預(yù)后均產(chǎn)生高血壓；但LIGHT只誘導(dǎo)妊娠小鼠產(chǎn)生蛋白尿，而對(duì)非妊娠小鼠的尿微量白蛋白沒(méi)有顯著影響。3．LIGHT可誘導(dǎo)妊娠小鼠胎盤及腎臟組織損傷。4．分別阻斷HVEM或LTIBR均可顯著下調(diào)LIGHT誘導(dǎo)的妊娠小鼠中高血壓和蛋白尿；減輕胎盤及腎臟病理?yè)p傷。5．阻斷HVEM或LT限均可顯著下調(diào)LIGHT誘導(dǎo)的非妊娠小鼠血壓水平。結(jié)論：1．LIGHT在子癇前期患者循環(huán)及胎盤組織中的表達(dá)均明顯增高；2．跨膜受體HVEM和LTflR在子癇

7、前期患者胎盤組織中的表達(dá)顯著增高；3．LIGHT通過(guò)HVEM和LTIBR信號(hào)通路，誘導(dǎo)妊娠小鼠產(chǎn)生子癇前期臨床表現(xiàn)．高血壓和蛋白尿；4．LIGHT誘導(dǎo)的小鼠蛋白尿及腎臟損傷具有妊娠特異性。III萬(wàn)方數(shù)據(jù)第二章LIGHT誘導(dǎo)子癇前期的分子機(jī)制研究研究背景：子癇前期是一種威脅母嬰生命安全的妊娠期疾病，發(fā)病率在初產(chǎn)婦中高達(dá)8％。盡管子癇前期的發(fā)病機(jī)制尚不十分明確，但目前許多研究均證實(shí)子癇前期是一種自身免疫性疾病，眾多炎癥因子在該病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要作用。LIGHT是一種新型的腫瘤壞死因子超家族