電刺激骶神經(jīng)對脊髓損傷雄性大鼠生殖系統(tǒng)影響的研究

電刺激骶神經(jīng)對脊髓損傷雄性大鼠生殖系統(tǒng)影響的研究

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1、中圖分類號墅UDC6lO博士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q§曼三密級公玨電刺激骶神經(jīng)對脊髓損傷雄性大鼠生殖系統(tǒng)影響的研究EffectsOfSacralNerveElectrostimulation0nReproductiveSystemofMaleRatsV陌thSpinalCordInjurygl-一作者姓名:吳家文學(xué)科專業(yè):臨床醫(yī)學(xué)研究方向:外科學(xué)(脊柱外科)學(xué)院(系、所):湘雅醫(yī)院指導(dǎo)教師:胡建中教授呂紅斌教授口蔓LM似j_又論文答辯日期護(hù)l;·r-。卜答辯委員會主席邀。中南大學(xué)20l3年5月原創(chuàng)性聲明本人聲明,所呈交

2、的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者簽名:是曩整日期:皇業(yè)年』月二婦學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文,允許學(xué)位論文被查閱和借閱;學(xué)??梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,可以采

3、用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》,并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。日期:筮丑年j珀墻電刺激骶神經(jīng)對脊髓損傷雄性大鼠生殖系統(tǒng)影響的研究摘要:研究背景急性脊髓損傷(SCI)是脊柱外科的常見病多發(fā)病,發(fā)病率呈逐年上升趨勢。損傷后不僅可以引起損傷平面下感覺運(yùn)動功能障礙和大小便障礙,還可以導(dǎo)致生殖功能障礙,SCI導(dǎo)致的感覺運(yùn)動功能障礙和大小便障礙在過去是學(xué)者們研究熱點(diǎn),在治療方法上也取得一些進(jìn)展。但是對于SCI導(dǎo)致的生殖功能障礙研究似乎不那么熱門

4、,很多報(bào)道存在一定矛盾,且沒有發(fā)現(xiàn)良好的治療方法。國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)電刺激骶神經(jīng)能改善SCI后大小便功能障礙,本課題以急性SCI大鼠為模型,電刺激雙側(cè)骶3神經(jīng)作為干預(yù)手段,初步觀察SCI和SCI后電刺激骶神經(jīng)對大鼠睪丸、附睪、前列腺、精子、下丘一垂體一性腺軸激素的影響,進(jìn)一步了解神經(jīng)因素在生殖系統(tǒng)中的作用,以期為臨床上治療脊髓損傷患者生殖功能障礙提供新的依據(jù)。目的初步觀察SCI和SCI后電刺激骶3神經(jīng)對大鼠睪丸、附睪、前列腺重量和形態(tài)學(xué)的影響,對精子數(shù)量和質(zhì)量的影響,對下丘一垂體一陛腺軸激素的影響,為臨床上治療脊髓損傷

5、患者生殖功能障礙尋找新的思路。方法54只SD大鼠隨機(jī)分為三組,假手術(shù)對照組(SO組n=18)僅行椎旁肌剝離,脊髓損傷組(SCI組n=18)采用改良Allen’S打擊法對胸10處脊髓進(jìn)行打擊,脊髓損傷電刺激組(SCIE組n=18)在改良Allen’S打擊法打擊胸10脊髓基礎(chǔ)上,每天對雙側(cè)骶3神經(jīng)進(jìn)行連續(xù)2小時電刺激,刺激參數(shù)電壓3V,頻率20Hz,電流10mA,波寬200us,刺激時間為15s,問隔15s,刺激15m、休息15m。于術(shù)后第2周、4飼和6周分別處死每組大鼠各6只。(1)測得各大鼠睪丸、附睪及前列腺重量,

6、并取睪丸、附睪及前列腺標(biāo)本進(jìn)行切片和HE染色,行光鏡觀察,其中睪丸標(biāo)本加做電鏡切片及觀察。(2)取附睪內(nèi)精子計(jì)數(shù),按照WHO精子活動能力分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級,計(jì)算出精子的活動率、不動率、快速向前運(yùn)動率,并對精子進(jìn)行鐵蘇木素染色,觀察精子形態(tài)。(3)取眼眶后靜脈血,采用ELISA法檢測大鼠血清中促性腺激素釋放激素、卵泡刺激素、黃體生成素、睪酮及雄激素結(jié)合蛋白含且里。應(yīng)用SPSSl9.0統(tǒng)計(jì)軟件處理分析。對各組內(nèi)不同時間點(diǎn)、同一時間點(diǎn)不同組間指標(biāo)比較采用ANOVA單因素方差分析。對于時間和處理兩種因素對各組問指標(biāo)的影響采用

7、析因設(shè)計(jì)方差分析。以P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。睦里毒異習(xí)寫(1)對器官重量的影響(1.1)睪丸重量:SCI組睪丸重量在第2周和第4周無顯著改變,第6周時較對照組和SCIE組顯著降低(P<0.05),而SCIE組各時間點(diǎn)睪丸重量無顯著改變。(1.2)附睪重量:SCI組附睪重量在第4周呈現(xiàn)降低趨勢,第6周較對照組顯著降低(P<0.05)。SCIE組附睪重量在第6周雖有降低趨勢,但較對照組無顯著差異。(1.3)前列腺重量:SCI組前列腺重量在第2、4周無顯著改變,第6周較對照組和SCIE組顯著增高(P<0.05),SCI

8、E組各時間點(diǎn)III前列腺重量較對照組無顯著差異。(2)對器官形態(tài)學(xué)影響(2.1)對睪丸形態(tài)學(xué)影響:SCI組大鼠睪丸第2周開始光鏡下顯示生精細(xì)胞排列紊亂,管腔成熟精子減少,間質(zhì)水腫,Leydig細(xì)胞減少,隨時間推移,上述改變更加明顯,到第6周出現(xiàn)睪丸各類細(xì)胞大量壞死,管腔內(nèi)成熟精子明顯減少,間質(zhì)水腫消退。電鏡顯示SCI組生精細(xì)胞和精子細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡,第6周出現(xiàn)

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