自組裝海藻酸鈉納米粒的制備及作為魚藤酮載體的研究

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1、萬方數(shù)據(jù)趙士睿等:自組裝海藻酸鈉納米粒的制備及作為魚藤酮載體的研究1543自組裝海藻酸鈉納米粒的制備及作為魚藤酮載體的研究。趙士睿1,劉晨光1,方玉春2,李琴琴1,石冠超3(1.中國海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室。山東青島266003I2.中國海洋大學(xué)海洋藥物研究所,山東青島266003;3.廣西施樂農(nóng)化科技開發(fā)有限責(zé)任公司,廣西南寧2310689)摘要:以卜乙基一3一(3一二甲基氨丙基)碳二亞胺(EDC)為偶聯(lián)荊,將由N’N一二甲基甲酰胺(DMF)活化的脫氧膽酸接枝到海藻酸鈉主鏈的羧基上,得到疏水改性的雙親性

2、海藻酸鈉(DSA),DSA在水相自組裝形成納米顆粒,利用紫外熒光分光光度計(jì)、動(dòng)態(tài)激光光散射儀和原子力顯微鏡對其結(jié)構(gòu)性質(zhì)進(jìn)行表征,平均粒徑為208.7nm,粒徑尺寸比較均一且分布較窄,具有較低的臨界聚集濃度(criticalaggregationconcentra-tion,CAC),而且隨著取代度的不斷提高,臨界聚集濃度不斷降低,并將其作為魚藤酮載體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)載藥效果良好。關(guān)鍵詞:海藻酸鈉;納米粒;魚藤酮;臨界聚集濃度中圖分類號(hào):TQ050.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1001-9731(2010)09—1543—04

3、1引言海藻酸鈉(sodiumalginate,SA)是一種從海洋藻類植物中提取、分離精制而成的多糖類化合物,具有良好的生物相容性、生物可降解性、低毒性和成膜性或成球性,是常用的囊材與載體材料,近年來在生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域引起人們越來越濃厚的興趣。雙親聚合物可以通過分子間和分子內(nèi)的疏水部分之間的交聯(lián)形成具有核一殼結(jié)構(gòu)的自組裝納米粒,這種納米級(jí)自組織體有一些獨(dú)特的性質(zhì),如:納米級(jí)尺寸和窄的粒徑分布u’21以及低的臨界聚集濃度(criticalag-gregationconcentration,CAC)[3]。20年來,疏水

4、修飾多糖納米粒作為疏水藥物、蛋白質(zhì)和DNA載體的研究已經(jīng)取得了極大的進(jìn)展,如殼聚糖、肝素等,材料制備與體外試驗(yàn)已經(jīng)比較成功,但海藻酸鈉的這方面研究尚屬空白。魚藤酮(rotenone)是3大傳統(tǒng)植物性殺蟲劑之一,近年在防治抗性害蟲(如小菜蛾)上發(fā)揮了重要作用,在害蟲綜合治理中效果十分理想[51]?,F(xiàn)有的魚藤酮乳油劑型存在光穩(wěn)定性較差、持效期短的缺陷,而將魚藤酮包埋于納米粒內(nèi)部可能解決這些缺陷。本文作者以脫氧膽酸(DoCA)為疏水基,通過酰胺鍵將DoCA共價(jià)鏈接到SA上,合成了不同取代度的DOCA-SA(DSA)耦合物

5、。以DSA-15為原料制備的納米粒,考察其對疏水農(nóng)藥魚藤酮的包載效果,意在為魚藤酮田間應(yīng)用中光穩(wěn)定性差和持效期短的缺陷問題提供新的解決思路。2試劑與儀器海藻酸鈉,分子量i.3×105Da,青島晶巖生物科技開發(fā)有限公司;二環(huán)已基碳二亞胺(DCC)、N一羥基琥珀酰亞胺(NHS)、1一乙基一(3一二甲基氨丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC·HCI)、芘(Pyrene),吉爾生化(上海)有限公司;脫氧膽酸(DOCA),上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限責(zé)任公司;魚藤酮,河北天順生物工程有限公司;其它均為分析純。79—1型磁力攪拌器,970

6、CRT熒光分光光度計(jì),JY92一IIDN超聲波細(xì)胞粉碎機(jī),DAWNHELEoSⅡ動(dòng)態(tài)激光光散射儀,Mercury-plus400核磁共振儀,AutoprobeCPResearch原子力顯微鏡,TU-1810型紫外分光光度計(jì),透析袋(Mr=8000~12000Da,購自美國Sigma公司)。3實(shí)驗(yàn)方法3.1DoCA的活化首先活化DOCA的羧基,反應(yīng)方法參照Park等‘71。在30mL的四氫呋喃中加入DoCA3.549,DCC2.229,NHS1.359,密閉攪拌反應(yīng)12h。抽濾后向?yàn)V液中加入正己烷產(chǎn)生白色沉淀,室溫下

7、真空干燥。將干燥物溶于DMF,向其滴加無水乙二胺,密閉反應(yīng)6h。再加入過量的蒸餾水,產(chǎn)生白色沉淀,靜置過夜,抽濾并水洗沉淀,真空干燥得到白色的DOCA—NHz。3.2SA的琉水修飾稱取SA0.19,溶于5mI。甲酰胺,50"C水浴加熱30min[81成懸浮液,調(diào)節(jié)pH值至3~4,再按照1I1的摩爾比例加入EDC·HCI。將與SA摩爾比例為5:1,10:1,15:1(DSA一5,DSA一10,DSA一15)的DOCA—NH。溶于DMF,然后把兩項(xiàng)液體混合,密閉條件下攪拌反應(yīng)24h。再用無水乙醇沉淀,離心,將沉淀真空干

8、燥,得到白色的耦合物DSA。參照Liu等[9]的方法對·基金項(xiàng)目:國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)資助項(xiàng)目(2007AAloZ349)收到初稿日期:2009—12—21收到修改稿日期:2010—04—05通訊作者:劉晨光作者簡介:趙士●(1983一),男。黑龍江哈爾濱人,在讀碩士,師承劉晨光教授,從事生物材料研究。萬方數(shù)據(jù)1544助能SA和DSA耦合物樣

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