資源描述：
《重組腺病毒載體負(fù)載樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)乙肝病毒特異性細(xì)胞毒性t淋巴細(xì)胞》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、中華細(xì)胞與干細(xì)胞雜志(電子版)?2012年11月第2卷第4期ChinJCellStemCell(ElectronicEdition),Nov2012,Vol.2,No.4261?實(shí)驗(yàn)研究?重組腺病毒載體負(fù)載樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)乙肝病毒特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞陶然李進(jìn)張克馬世武姜維李溢柔周向軍【摘要】目的本研究利用重組腺病毒載體將乙肝病毒基因?qū)霕渫粻罴?xì)胞（DC）內(nèi)表達(dá)成內(nèi)源性蛋白，探索DC體外抗原負(fù)載并誘導(dǎo)乙肝病毒（HBV）特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）的有效方法。方法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）并誘導(dǎo)成DC。用HF
2、P3肽輔助腺病毒載體進(jìn)行抗原負(fù)載，檢測DC細(xì)胞內(nèi)乙肝核心抗原基因的表達(dá)，比較成熟前后DC的表面分子，研究DC誘導(dǎo)的乙肝病毒核心抗原（HBcAg）特異性CTL的增殖。應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以P?<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果重組腺病毒CHB3感染的DC能有效表達(dá)HBcAg蛋白。HFP3輔助感染能顯著提高感染效率達(dá)3~10倍。腺病毒載體負(fù)載的DC表面CD80、CD86、CCR7的表達(dá)有所上調(diào)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（平均熒光強(qiáng)度CHB3/iDC：CD80，46.2±14.6?/?29.9±7.9，P?=
3、0.209；CD86，142.0±12.9?/?113.3±6.5，P?=0.430；CCR7，49.3±3.0?/?36.4±4.6，P?=0.054）。Cocktail促成熟后，CD80、CD83、CD86、CCR7顯著上調(diào)（平均熒光強(qiáng)度Cocktail-CHB3/iDC：CD80，97.1±8.1/29.9±7.9，P?=0.0019；CD83，75.4±8.4/26.8±1.5，P?=0.017；CD86，176.2±14.8/113.3±6.5,P=0.021；CCR7，75.3±3.4/36.4±4.6，P
4、?=0.0016），HLA-DR分子維持高表達(dá)。CHB3負(fù)載的DC與自體T細(xì)胞共培養(yǎng)，可檢測到HBcAg特異性CTL比例明顯增高（1例由0.25﹪增至1.98﹪，另1例由0.19﹪增至1.37﹪）。結(jié)論在優(yōu)化的條件下，重組腺病毒載體CHB3能夠有效地介導(dǎo)抗原蛋白HBcAg在DC內(nèi)高水平表達(dá)，加入HFP3輔助感染能在較低的感染劑量下獲得較高的感染效率，有利于維持DC的活性。重組腺病毒載體CHB3結(jié)合HFP3的抗原負(fù)載方案能有效地誘導(dǎo)HBcAg特異性CTL。【關(guān)鍵詞】樹突細(xì)胞；腺病毒；肝炎核心抗原,乙型；T淋巴細(xì)胞,細(xì)胞毒
5、性EfficientinductionofhepatitisBvirusspecificCTLthroughadenovirusinfectedhuman*dendriticcellsTAORan,LIJin,ZHANGKe,MAShi-wu,JIANGWei,LIYi-rou,ZHOUXiang-*jun.TsinghuaYuanxingBio-PharmScience&TechnologyCo.Ltd,Shenzhen518057,ChinaCorrespondingauthor:ZHOUXiang-jun,Ema
6、il:joe@beike.cc【Abstract】ObjectiveThisstudyinvestigatedtransductionandexpressionofHBVgeneindendriticcellsbyrecombinantadenovirusvectorstoestablishareliablemethodologyfortheDC-antigenloadinvitroandinductionofHBV-specificCTL.MethodsToaddressthisissue,weoptimizedco
7、nditionsforadenovirusinfectionusingrecombinantadenoviralvectorrAd-GFPorCHB3(rAdexpressedHBcAg)andasmallpeptide(HFP3).WealsoassessedtheefficiencyofinfectionofDCsaswellastheeffectoncellsurfacemarkerexpressionandDCfunctions.Thedatainthestudywasanalysedbystatistical
8、softwareSPSS17.0.ThestatisticalsignificancewasdeterminedbyStudent’st-test;P<0.05wasconsideredstatisticallysignificant.ResultsOurresultsdemonstratedthatHFP3significant
