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1、學(xué)校代碼：10264研究生學(xué)號(hào)：M150107154上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文碳酸鹽堿脅迫下尼羅羅非魚氨代謝題目：途徑與Rh蛋白氨轉(zhuǎn)運(yùn)作用AmmoniametabolismpathwayandammoniatransportofRhproteinsof英文題目：Oreochromisniloticusunderthestressofcarbonatealkalinity專業(yè)：動(dòng)物遺傳育種與繁殖研究方向：水產(chǎn)動(dòng)物遺傳育種姓名：涂翰卿指導(dǎo)教師：趙金良教授二O一八年三月十五日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：我恪守學(xué)術(shù)道
2、德，崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫，我對(duì)所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé)，并完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：日期：年月日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)
3、數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在年解密后適用本版權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密□學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會(huì)成員名單姓名工作單位職稱備注中國水產(chǎn)科學(xué)院東海水產(chǎn)研究馬凌波研究員主席所崔映宇同濟(jì)大學(xué)副教授委員顏標(biāo)復(fù)旦大學(xué)研究員委員張瑞祺上海海洋大學(xué)博士秘書答辯地點(diǎn)生命學(xué)院C樓217答辯日期2018.5.22上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文碳酸鹽堿脅迫下尼羅羅非魚氨代謝途徑與Rh蛋白氨轉(zhuǎn)運(yùn)作用摘要尼羅羅非魚(Oreochromis
4、niloticus)是自上世紀(jì)80年代被引入中國，因?yàn)槠渖L(zhǎng)速度快，迅速成為我國重要的淡水經(jīng)濟(jì)魚類，同時(shí)又因?yàn)槠浔憩F(xiàn)出對(duì)鹽堿水體較強(qiáng)的耐受性，可以作為耐鹽堿養(yǎng)殖品種改良的候選材料。本論文首先評(píng)價(jià)了尼羅羅非魚耐鹽堿選育三代魚苗鹽堿耐受性及魚種鹽堿生長(zhǎng)指標(biāo)；進(jìn)一步研究在碳酸鹽堿脅迫下，尼羅羅非魚氨代謝途徑（谷氨酰胺代謝途徑和尿素代謝途徑）時(shí)序以及鰓組織Rh蛋白的氨轉(zhuǎn)運(yùn)作用，主要研究結(jié)果如下：（1）為評(píng)估尼羅羅非魚鹽堿選育三代的鹽堿耐受性能和生長(zhǎng)性能，在淡水水箱（0.6m×0.4m×0.5m）中，進(jìn)行了鹽堿選育三代魚苗與對(duì)照組（
5、非選育群體）鹽、堿慢性致死比較試驗(yàn)；同時(shí)在戶外水泥池（6.0m×5.0m×1.6m）中，設(shè)置淡水組、鹽度組（10g/L）、鹽堿混合組（10，2）g/L、（10，4）g/L和（10，6）g/L（分別用S0A0、S10A0、S10A2、S10A4和S10A6表示），比較了選育三代魚種在不同鹽堿環(huán)境中的生長(zhǎng)特性。慢性致死試驗(yàn)結(jié)果表明，選育三代與對(duì)照組的半致死鹽度分別為39.63±2.12g/L、31.42±2.42g/L，半致死堿度分別為13.94±0.25g/L、11.26±0.15g/L。60d的生長(zhǎng)試驗(yàn)表明，在S10A0、
6、S10A2、S10A4、S10A6組中，隨著堿濃度的逐步增加，選育三代與對(duì)I上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文照組日均質(zhì)量增加率均呈下降趨勢(shì)，在相同條件下，選育三代的日均質(zhì)量增加率均顯著大于對(duì)照組（P<0.05）。（2）為了解羅非魚在堿水環(huán)境適應(yīng)過程中的氨代謝機(jī)制，將在2、4、6g/LNaHCO3碳酸鹽堿水環(huán)境中進(jìn)行急性脅迫。檢測(cè)脅迫72h內(nèi)的血氨濃度，肝、腎、鰓組織及水體、尿液、血液尿素濃度，肝、腦、鰓谷氨酰胺(Gln)濃度，肝、腦谷氨酰胺合成酶(GS)活性，肝氨甲酰磷酸合成酶(CPS)活性的變化，以及不同組織中GS、CPS、谷氨
7、酰胺酶(GLS)基因mRNA的表達(dá)變化。結(jié)果表明，急性脅迫下血氨濃度上升，于12h到達(dá)峰值。隨著血氨升高，各組織中的尿素濃度0-6h快速升高，CPS活性0-2h快速升高，基因相對(duì)表達(dá)量0-24h升高，表明尿素代謝途徑0-6h內(nèi)啟動(dòng)。肝谷氨酰胺濃度0-6h快速升高到達(dá)峰值，肝GS活性0-6h和12-24h快速升高，組織中GS、GLS基因相對(duì)表達(dá)量在0-24h升高，表明谷氨酰胺代謝途徑0-6h內(nèi)啟動(dòng)。結(jié)果表明，在碳酸鹽堿脅迫后，尼羅羅非魚0-6h內(nèi)同時(shí)啟動(dòng)了尿素代謝途徑與谷氨酰胺代謝途徑，共同參與血氨調(diào)節(jié)過程。（3）為了解碳酸
8、鹽堿環(huán)境下羅非魚氨轉(zhuǎn)運(yùn)途徑，將尼羅羅非魚同時(shí)進(jìn)行急性堿度脅迫（2、4、6g/L）和慢性堿度脅迫，檢測(cè)脅迫后120h內(nèi)的血氨濃度，鰓組織中Rhag、Rhbg、Rhcg1和Rhcg2基因mRNA表達(dá)變化，并觀察鰓組織中Rh糖蛋白的免疫組化陽性反應(yīng)。結(jié)果表明，急性堿度脅迫下，血氨在12h內(nèi)快速升高到達(dá)峰值，四
