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《茉莉酸甲酯對肝癌的抑制作用及其機理研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)中圖分類號UDCR602610博士學位論文學校代碼!Q53呈密級公玨榮莉酸甲酯對肝癌的抑制作用及其機理研究EnlpiricalstudyofMethyljasmonateanti_hepatocellularcarcinomaefrectanditsmechanism作者學科研究學院(指導名：汪長發(fā)業(yè)：臨床醫(yī)學向：外科學所)：湘雅三醫(yī)院師：蔣先鎮(zhèn)教授論文答辯日期竺!二!!二}少答辯委員會主中南大學2013年10月姓專方氛教學位論文原創(chuàng)性聲明惻萬方數(shù)據(jù)本人鄭重聲明，所呈交的學位論文是本人在導
2、師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關責任。作者簽名：邀學位論文版權使用授權書本學位論文作者和指導教師完全了解中南大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定：即學校有權保留并向國家有關部門或機構送交學位論文的復印件和電子版；本人允許本學位論
3、文被查閱和借閱；學?？梢詫⒈緦W位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用復印、縮印或其它手段保存和匯編本學位論文。保密論文待解密后適應本聲明。作者簽名：』越日期：生年旦月三日導師簽萬方數(shù)據(jù)茉莉酸甲酯對肝癌的抑制作用及其機理研究摘要—1L—j一剛舌肝細胞性肝癌在我國的發(fā)病率明顯高于西方國家，其惡性程度和死亡率都非常高，是嚴重威脅我國人民生命健康的疾病。全世界每年新增的肝癌病例，我國占到一半左右。目前肝癌治療仍然以外科切除為主，但是治療率低、復發(fā)性高、預后差，且由于肝癌被確診時大多已處于晚
4、期失去了手術的最佳時期。因此，研究和應用有效的、可耐受的治療肝癌的新藥仍然是我國肝癌防治工作的重中之重。由于信號調控機制異常而導致肝癌細胞能“逃避"細胞凋亡，肝癌細胞強大的遷移和侵襲能力，以及對抗癌藥物極易產(chǎn)生耐藥性，是肝癌難以治愈的原因。從天然動植物中尋找低毒、高效的抗癌活性成分是近年來研究的熱點之一。茉莉酸類是從茉莉中分離出來的一種類似于植物應激激素的水楊酸。有研究表明茉莉酸甲酯能治療皮膚真菌感染、具有抗腫瘤作用及抗血管生成作用。研究證明茉莉酸甲酯可以抑制胃癌、肺癌、結腸癌、宮頸癌及黑色素瘤等
5、多種腫瘤細胞的增殖并誘導細胞凋亡，其作用機制可能與清除自由基，影響細胞周期蛋白(Cyclin)及細胞周期蛋白依賴性激酶(Cycl協(xié)．dependenil(inase，CDK)，影響P53、Bcl．2家族、caspase活性，影響與腫瘤發(fā)生密切相關的細胞信號傳導通路等。本研究通過三個方面對茉莉酸甲酯的抗癌活性及其可能機制進行了探討。第一，研究了茉莉酸甲酯對HepG2、PLC／PI訌／5和Hep3B等六種肝癌細胞株生長增殖的影響，選擇抑制作用最強的HepG2作為其茉莉酸甲酯抗癌作用機制研究的對象；第二
6、，探討了茉莉酸甲酯對肝癌細胞遷移和血管生成能力的影響；第三，探討了茉莉酸甲酯對肝癌順鉑化療敏感性的影響及機制。1茉莉酸甲酯通過砧洄K和InTOR信號通路對肝癌細胞抑制作用的研究目的：觀察茉莉酸甲酯對肝癌細胞的抑制作用，以及對細胞內Ⅱ萬方數(shù)據(jù)—6山口K和mTOR信號通路的影響，探索茉莉酸甲酯抑制肝癌細胞生長增殖的機制。方法：SRB實驗檢測不同濃度茉莉酸甲酯對HepG2、PLC／PRF／5、Hep3B、HepG2．2．15、MahlaⅦ、SK-H印1等肝癌細胞株生長增殖的影響。流式細胞術檢測細胞周期和
7、線粒體膜電位變化，RT-PCR和W．estemblot分別檢測細胞內燦汩K和mTOR信號通路相關基因的mRNA和蛋白水平的表達。電鏡下觀察茉莉酸甲酯干預對細胞形態(tài)變化的影響。免疫沉淀法檢測茉莉酸甲酯對HepG2細胞TSC2／TSCl復合物組裝情況。結果：茉莉酸甲酯的抗癌效能次序是HepG2>HepG2．2．15>MahlaⅦ>PLC／PRF／5>SK-Hepl>Hep3B。H印G2細胞采用雙胸腺嘧啶阻斷同步后，茉莉酸甲酯徹底阻止了細胞周期進程，并隨后誘導細胞凋亡。包括細胞周期蛋白D1、細胞周期蛋白
8、E、Cdk2和Cdk2在內的G1調節(jié)蛋白核移位減少和下調支持了這一結論。茉莉酸甲酯沒有改變G1調節(jié)蛋白的mRNA表達水平，表明蛋白翻譯受到抑制，但轉錄水平?jīng)]收到影響。茉莉酸甲酯誘導組裝TSCl／TSC2，并通過抑制包括mTOR(Ser2448)，p70S6K(耵1r421／Ser424和1h389)和4E．BPl(nlr37／Tl一6和Tllr70)等蛋白質磷酸化導致細胞蛋白質合成受阻。此外，茉莉酸甲酯干預引起肝癌細胞舢K活性升高?！?山但K抑制劑復合物C顯著逆轉茉莉酸甲酯干預效果
