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《黃芪多糖緩解棕櫚酸誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的作用及機(jī)制研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類(lèi)號(hào)：R2單位代碼：10343學(xué)號(hào)：151002509）碩士學(xué)位論文論文題目:黃芪多糖緩解棕櫚酸誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的作用及機(jī)制研究研究生姓名胡蘭蘭吳蓓蓓學(xué)科專(zhuān)業(yè)中西醫(yī)結(jié)合臨床類(lèi)型專(zhuān)業(yè)型指導(dǎo)教師胡臻教授單小鷗教授二O一八年六月論文題目:黃芪多糖緩解棕櫚酸誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的作用及機(jī)制研究答辯委員會(huì)主席：林勝璋教授浙江大學(xué)附屬第一醫(yī)院答辯委員會(huì)成員：劉長(zhǎng)寶教授溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院谷峰教授溫州醫(yī)科大學(xué)眼視光醫(yī)院論文答辯日期：2018年05月25日溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄縮詞簡(jiǎn)表………………………………………………………………1中文摘要……………………………………………………………
2、…2英文摘要………………………………………………………………4前言……………………………………………………………….6材料與方法…………………………………………………………..7實(shí)驗(yàn)結(jié)果……………………………………………………………..8討論與分析………………………………………………………….10結(jié)論..................................................................................................11正文參考文獻(xiàn)……………………………………………………….12附錄…………………………
3、……………………………………..15致謝………………………………………………………………..16綜述………………………………………………………………..17綜述參考文獻(xiàn)……………………………………………………….26獨(dú)創(chuàng)性聲明………………………………………………………….33溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文縮詞簡(jiǎn)表英文名稱(chēng)英文縮寫(xiě)中文名稱(chēng)AstragaluspolysaccharidesAPS黃芪多糖DimethylsulfoxideDMSO二甲基亞砜PalmiticacidPA棕櫚酸HumanumbilicalveinendothelialcellsHUVECs人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Nitr
4、icoxideNO一氧化氮ReactiveoxygenspeciesROS活性氧簇EndothelialnitricoxidesynthaseeNOS一氧化氮合酶NADPHoxidaseNOXNADPH氧化酶Adenosinemonophosphate-activated磷酸腺苷活化的蛋白proteinkinaseAMPK激酶AtherosclerosisAS動(dòng)脈粥樣硬化Intercellularadhesionmolecule1ICAM-1細(xì)胞間黏附分子-1Vascularendothelialadhesionmolecule-1VCAM-1血管內(nèi)皮黏附分子-11溫州醫(yī)科大學(xué)碩
5、士學(xué)位論文黃芪多糖緩解棕櫚酸誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的作用及機(jī)制研究中文摘要背景及目的黃芪多糖是從傳統(tǒng)中藥黃芪中提取的有效活性成分之一，已有研究表明黃芪多糖可以促進(jìn)一氧化氮（NO）的生成，改善NO與活性氧簇（ROS）之間的平衡，提高NO的生物活性，改善血管內(nèi)皮功能障礙，保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞，然而黃芪多糖對(duì)NO生成的調(diào)控機(jī)制并未完全闡明清楚。本研究以棕櫚酸誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷，建立內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型，主要從細(xì)胞層面上來(lái)探索黃芪多糖對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。方法：1.取黃芪多糖（APS）粉末按不同濃度要求溶于PBS溶液，分別配成濃度為400mg/L、800mg/L及1600mg/L的溶液
6、用于實(shí)驗(yàn)。2.人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）用含有10%胎牛血清及100U/mL盤(pán)尼西林的DMEM高糖培養(yǎng)液、在條件為37℃，5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。3.將細(xì)胞隨機(jī)分為正常對(duì)照組，模型組，APS（400mg/L）組，APS（800mg/L）組，APS組（1600mg/L），各加入250mmol/L的棕櫚酸建立HUVECs細(xì)胞損傷模型，并依次加入不同濃度等量的APS溶液共同孵育24小時(shí)。4.MTT試驗(yàn)檢測(cè)黃芪多糖細(xì)胞毒性：取HUVECs細(xì)胞懸液，以細(xì)胞數(shù)約5000個(gè)/孔接種于96孔培養(yǎng)板，每6孔一組，實(shí)驗(yàn)組分別加入不同濃度APS溶液，對(duì)照組加入等量的PBS溶液，培養(yǎng)24小時(shí)。每
7、孔按要求加入MTT試劑及二甲基亞砜（DMSO）溶液，于酶標(biāo)儀460nm波長(zhǎng)下檢測(cè)各組的吸光度,間接比較各組細(xì)胞的生存率（%）。5.Westernblotting檢測(cè)：提取不同實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組細(xì)胞蛋白，采用蛋白印交實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)AMPK、p-AMPK、p-Akt、eNOS、p-eNOS、NOX4、ICAM-1、VCAM-1、GAPDH蛋白的表達(dá)。6.RT-qPCR檢測(cè)：提取不同實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組細(xì)胞RNA,用RT-qPCR技術(shù)定量檢測(cè)不同組別內(nèi)eNOS、NOX4及β-actin的mRNA
