eos蛋白在紅系和巨核系分化中的功能研究

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1、單位代碼:10472學術學位回專業(yè)學位口121民34學號;2003中圖分類號;密級:婆怒碩±學位論文Eos蛋白在紅系和巨核系分化中的功能研究StudonthefunctionoftheEosroteininerthrodandypymeakarocticdifferentiationgyy作者姓名:隋娟導師姓名:李平法于海川學科口類;臨床醫(yī)學專業(yè)名稱:臨床檢驗診斷學培養(yǎng)院系;醫(yī)學檢驗學院—完成時間;二0五年H月Studyonthefimctio凸oftheEosrote

2、ininerthrodandpymegakaryocyticdifferentiationAThesisSubmittedfortheDereeofMastergCandidate;SuiJuanSupervisor:LiPingfaYuHaichuanSchooloflaboratorymedicineXinxianMedicalUniversitgy新鄉(xiāng)醫(yī)學院學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的論文是本人在導師的指導下獨立進行研究所取得的研究成果。除了文中特別加W標注引用的內(nèi)容

3、外,本論文不包舍任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。對本文的研究做出重耍貢獻的個人和集體,均已在文中W明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔。作者簽名;禱述日期:2。/玉年與月>日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留,、使用學位論文的規(guī)定同意學校保留并向國家有關部口或機構送交論文的復印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權新鄉(xiāng)醫(yī)學院可W將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索,可W采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。""本學位論文屬于V):(請在W下相應

4、方框內(nèi)打1.保密□,在年解密后適用本授權書。__2.不保密作者簽名如年■:爲銷日期:)^月日f導師簽名:店日期:年/月疋fa翁目錄摘要(1)Abstract(3)前胃(6)實驗材料與主要試劑(8)實驗方法(14)實驗結果(27)職(36)結論(39)參考文獻(40)綜述:調(diào)控因子在巨核細胞分化中的作用(44)附錄(63)攻讀學位期間發(fā)表文章情況(64)(65)個人簡歷(66)新鄉(xiāng)醫(yī)學院碩壬學位論文Eos蛋白在幻:系和巨核系分化中的功能研究摘要化里

5、目泉造血分化是生物體內(nèi)重要的生理過程,不僅涉及造血干細胞(HematopoieticstemcellsHSC,還,)的自我更新、各鏈系祖細胞的定向分化包括祖細胞向成熟血細胞分化一和發(fā)育的全過程。紅系分化和巨核系分化是造血分化的重要分支,也是貫穿人生的重要生理過程。轉(zhuǎn)錄因子Eos也叫IKZF4ikarosfamilzincfiner4,是鮮指蛋白轉(zhuǎn)(yg)a一錄因子ikros家族中的員。作為負性調(diào)節(jié)因子可W參與許多基因的表達調(diào)控。有研究表明,Eos也參與了造血過程中紀系的分化,但作用機制還不清楚。而關于Eos在巨核系分化中的作用及其

6、機制知之更少。目的分析轉(zhuǎn)錄因子Eo,并初步探討其調(diào)控機制。s在紅系和巨核系分化中的作用方法1.細胞培養(yǎng):將生長狀態(tài)良好的K562細胞分為紅系誘導組和巨核系誘導組進行傳代培養(yǎng)。前者傳至4個中號培養(yǎng)皿中,分別標記為化、12h、2他、4化4個時間段,50i6皿中加入^M氯化高鐵血紅素巧6111111)。后者傳至個中號培養(yǎng),分別標記為化、°150PMA化、24h、4化、7化、96h6,M佛波醋。37C、5%二,個時間段加入p()在氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),誘導K562細胞分別向紅系和巨核系分化。2-.1m離也5聯(lián)苯胺染色與瑞氏姬姆薩染色:收集各組細胞

7、,000rpmin,收集沉淀,用胎牛血清重懸,涂片染色,鏡下觀察細胞的形態(tài)變化。3.流式細胞檢測:收集各培養(yǎng)組細胞,檢測誘導前后細胞分化相關表面標志物CD41a、CD61、CD235a、CD71的表達情況。4al-timeR檢測AA的PC,檢Eo.Re:收集細胞,提取RN測誘導后smRN表達量。5.Westernblot蛋白檢視;,裂,Westernblot檢I收集各培養(yǎng)組細胞解后提取蛋白-測誘導前后轉(zhuǎn)錄因子Eos和紅系特異轉(zhuǎn)錄因子GATA1蛋白的表達情況。結果1新鄉(xiāng)醫(yī)學院碩

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