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1、KLF15對豬前體脂肪細(xì)胞分化及通過其含量預(yù)測脂肪沉積能力的研究ResearchonEffectsofKLF15InPorcinePreadipocytesDifferentiationandPredictionofFatDepositionCapability作者姓名：李青瑩領(lǐng)域（方向）：養(yǎng)殖指導(dǎo)教師：張嘉保教授類別：農(nóng)業(yè)推廣答辯日期：2015年6月3日中文摘要KLF15對豬前體脂肪細(xì)胞分化及通過其含量預(yù)測脂肪沉積能力的研究隨著生活水平的不斷提高，人們越來越注重提高豬肉品質(zhì)，肉質(zhì)性狀成為養(yǎng)殖評估中的一項(xiàng)重要指標(biāo)。
2、肌間脂肪對改善豬肉制品口感風(fēng)味和營養(yǎng)價(jià)值具有重要的影響及意義。本研究則通過明確KLF15對豬前體脂肪細(xì)胞分化及脂質(zhì)沉積的影響，探求KLF15調(diào)節(jié)血液中血糖的水平進(jìn)而影響脂質(zhì)沉積、為從分子水平調(diào)控脂肪沉積、改善豬肉品質(zhì)及豬的選種選育提供理論依據(jù)。本研究首先選用6日齡內(nèi)軍牧1號健康仔豬，分離原代豬前體脂肪細(xì)胞并培養(yǎng)，對其誘導(dǎo)分化，并在分化不同時(shí)期進(jìn)行油紅O染色，通過熒光定量PCR檢測脂肪分化標(biāo)志基因PPARγ、C/EBPα、AP2以及KLF15的mRNA表達(dá)水平。結(jié)果表明：（1）脂肪分化標(biāo)志基因PPARγ、C/EBPα
3、的表達(dá)量顯著上升（P<0.01），AP2表達(dá)量相對上升（P<0.05）；（2）誘導(dǎo)豬前體脂肪細(xì)胞24h后，KLF15表達(dá)量迅速上升且達(dá)到最大值（P<0.01），隨后呈下降趨勢，但表達(dá)量仍高于誘導(dǎo)前。隨后，利用siRNA抑制KLF15在前體脂肪細(xì)胞中的mRNA表達(dá)水平，利用熒光定量PCR檢測前體脂肪細(xì)胞分化的標(biāo)志基因PPARγ、C/EBPα、AP2及KLF15關(guān)聯(lián)基因p300、FSTL1、FASN、SCD和FATP1的表達(dá)變化。結(jié)果表明：（1）PPARγ、C/EBPα、AP2、p300和FATP1的表達(dá)量顯著降低（P
4、<0.01），F(xiàn)STL1、FASN和SCD的表達(dá)量未產(chǎn)生明顯變化；（2）抑制KLF15的mRNA表達(dá)水平后，轉(zhuǎn)染KLF15-siRNA組與陰性對照組相比，甘油三酯含量顯著降低（P<0.05），脂滴明顯減少、變小?；谝陨辖Y(jié)果，本研究利用ELISA及氧化酶法檢測不同月齡的瘦肉型（軍牧一號）、脂肪型（松遼黑豬）去勢公豬血清中KLF15及血糖、膽固醇、甘油三酯的含量，并探索預(yù)測豬脂肪沉積能力的方法。結(jié)果表明，松遼黑豬與軍牧一I號3、6月齡血糖含量分別為5.03±0.44mmol/L、5.25±0.55mmol/L，4.7
5、3±1.25mmol/L、3.45±0.15mmol/L；松遼黑豬與軍牧一號3、6月齡膽固醇含量分別為1.57±0.41mmol/L、1.15±0.25mmol/L，2.10±0.18mmol/L、1.63±0.39mmol/L；松遼黑豬與軍牧一號3、6月齡甘油三酯含量分別為0.16±0.02mmol/L、0.33±0.19mmol/L，0.44±0.19mmol/L、0.26±0.07mmol/L。KLF15與血糖、膽固醇、甘油三酯相關(guān)系數(shù)分別為0.8010、0.0263、0.6299。豬血清中KLF15的含量與
6、血糖水平呈極強(qiáng)的正相關(guān)性；與甘油三酯也呈較強(qiáng)的正相關(guān)性。以上結(jié)果說明，KLF15可調(diào)控血糖水平并參與調(diào)控前體脂肪細(xì)胞分化過程，可影響脂肪細(xì)胞中甘油三酯的合成及脂質(zhì)的沉積，在實(shí)際生產(chǎn)中可通過檢測血清中的血糖水平而間接估測KLF15的含量并預(yù)測豬脂肪沉積的能力，為解析KLF15在豬脂肪沉積過程中的作用并作為分子標(biāo)記用于豬的肉質(zhì)改善及早期選種選育提供理論依據(jù)。關(guān)鍵詞：豬前體脂肪細(xì)胞，KLF15，脂質(zhì)沉積，血糖水平IIAbstractResearchonEffectsofKLF15InPorcinePreadipocyte
7、sDifferentiationandPredictionofFatDepositionCapabilityWiththecontinuousimprovementoflivingstandards,moreandmorepeoplepayattentiontoimprovethequalityofpork,meatqualitytraitsbecomeanimportantindicatorofbreedingevaluation.Fatbetweenmuscleshasasignificantimpacttoi
8、mprovethetasteofporkproducts,flavorandnutritionalvalue.ThisstudyistodeterminetheeffectofKLF15onprocinepre-adipocytesdifferentiationandlipidosisandexploreKLF15regulateglucoselevelth
