je疫苗突變株生物學特性及鴨坦布蘇病毒流行株基因特征研究

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1、分類號＾麵＿學￣Ｗ＂為奇、農養(yǎng)乂聲博±學位論文化疫苗突變株生物學特性及鴨坦布蘇病毒流行株基因特征研究王經滿指導教師陳縛言教授專業(yè)名稱預防獸醫(yī)學研究方向畜禽傳染病答辯日期二〇－－五年九月ＴＨＥＳＴＵＤ把ＳＯＦＴＨＥＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳＯＦＪＡＰＡＮＥＳＥＥＮＣＥＰＨＡＬＩＴＩＳＶＡＣＣＩＮＥＭＵＴＡＮＴＡＮＤＴＨＥＧＥＮＯＭＥＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＺＡＴＩＯＮｏｒＡＰＲＥＶＡＬＥＮＴＳＴＲＡＩＮＯＦＤＵＣＫ

2、ＴＥＭＢＵＳＵＶＩＲＵＳＢｙＪｉｎｇｍａｎＷａｎｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＰｕａｎＣｈｅｎｐｙＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｅｄｔ：ｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅＲｅｕｉｒｅｍｅｎｔｆｏｒｑ化ｅＰｈｉｌｏｓｏｐｈｙＤｅｇｒｅｅｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙ原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經注明引用的內

3、容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者（需親筆）簽名／年月日＾＾［＾學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關部口或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權南京農業(yè)大學可Ｗ將本學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據庫進行檢索，可采用影印、縮印或掃描等復制手段保存

4、和匯編學位論文。保密□，在年解密后適用本授權書。本學位論文屬于不保密口。＂＂（請在Ｗ上方框內打Ｖ）學位論文作者（需親筆）簽名：ｙ足堿品〇／又年月之掃＾導師（需親筆）簽名：７（５＾年月＾日＾目錄目錄摘耍ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＶ縮略語ＸＩ一第篇文獻綜述１一第章日本腦炎病毒及其與宿主相互作用概述１１日本脯炎的流行持征１２曰本腦炎的病原特征３２．１病毒粒子的性質３２．２ＪＥＶ的基因結構４２．３ＪＥＶ結構蛋白特征７２．４ＪＥＶ非結構蛋

5、白特征９２．５ＪＥＶ毒力基礎１３３ＪＥＶ的傳播特征１４４ＪＥＶ的致病機制１５５ＪＥＶ疫苗的研究進展１６５．１鼠腦組織的滅活疫苗１７５．２細胞培養(yǎng)的弱毒疫苗１７５．３細胞培養(yǎng)的滅活疫苗１８５．４基因工程嵌合弱毒活疫苗１８５．５其他疫苗１８６宿主針對ＪＥＶ免疫防御１９６．１先天性免疫防御１９６．２適應性免疫防御１９７日本腦炎病毒對宿主的免疫逃逸２０７．１ＪＥＶ抑制干擾素通路２０７．２ＪＥＶ抑制ＮＫ細胞的免疫監(jiān)測和細胞毒

6、性作用２１７．３ＪＥＶ活化自隨進行免疫逃逸２１參考文獻２３第二部分實驗研究３９第二章日本腦炎病毒Ｅ２７９對其蝕斑形態(tài)和致病力的作用研究３９１Ｎｓｒ蛋白在曰本腦炎病毒感染及致病中的作用機制研究１材料和方法４１１．１材料４１１２實驗方法４２．２實驗Ｓ果４９２．１商品化疫苗中ＪＥＶ的基因含量測定４９２．２商品化疫苗中ＪＥＶ的病毒滴度測定５０２．３四株疫苗病毒的全基因擴增與測序５１２．４四株疫苗病毒的基因序列比較５２２．５四株疫苗突變位點

7、的峰圖分析５４２．７四株疫苗株的氨基酸序列分析５５’二２．８四株疫苗株５非編碼區(qū)ＲＮＡ級結構預測結果％５８２．９疫苗株蝕斑純化后ＪＥＶ特性分析２．１０疫苗株蝕斑純化后全基因分析５８２．１１ＪＥＶＥ２７９位顯著增加子代病毒的產量。６１２．口ＪＥＶＥ２７９位顯著增加病毒的神經毒力紀３６２參考文獻６５第Ｈ章ＪＥＶＮＳｒ蛋白在疫苗弱毒株的產生機制及其在病毒感染中的作用研究７１１欄抓法７４１．１材料７４１．２實驗方法７５２實驗結果８６２

8、．１全基因的擴増和全長ｃＤＮＡ克隆的構建始２．２姪救病毒在體外的生物學特性８８２．３捶救病毒的全基因分析９１－２２．４搔救病毒在ＢＨＫ１細胞上的生長曲線特征％２．５病毒感染細胞后分泌ＮＳｒ蛋白的特征分析９４，ＥＶ２．６ＮＳ１蛋白對Ｊ神經毒力的影響９５２．７逐救病毒感染對現(xiàn)鼠免疫