巨噬細(xì)胞極化在鈣化性主動(dòng)脈瓣中的表達(dá)及作用研究

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1、上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目：巨噬細(xì)胞極化在鈣化性主動(dòng)脈瓣中的表達(dá)及作用研究研究生姓名：李燦波指導(dǎo)教師：趙強(qiáng)教授學(xué)科專業(yè)：外科學(xué)（心臟外科）答辯日期：2015年5月上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目：巨噬細(xì)胞極化在鈣化性主動(dòng)脈瓣中的表達(dá)及作用研究研究生姓名：李燦波指導(dǎo)教師：趙強(qiáng)教授導(dǎo)師組成員：王哲副主任醫(yī)師蔡俊峰主治醫(yī)師葉曉峰主治醫(yī)師學(xué)科（專業(yè)）：外科學(xué)（心臟外科）學(xué)號(hào)：1127209172研究方向：鈣化性主動(dòng)脈瓣疾病的基礎(chǔ)與臨床研究申請(qǐng)學(xué)位：醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)型碩士培養(yǎng)單位：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院答辯日期：2015年5月SHANGHAIJIAOTONG

2、UNIVERSITYMASTER’SDISSERTATIONTheexpressionandeffectofmacrophagepolarizationincalcificaorticvalvediseaseName：LiCanBoAdvisor：ProfZhaoQiangDiscipline：Surgery(CardiacSurgery)StudentID：1127209172ResearchField：CalcificaorticvalvediseaseDegreeExpected：Master’SDegreeInstitute：RuijinHosp

3、italThesisDefenceDate：May2015上海巧通大學(xué)２０口級(jí)碩±學(xué)位論文———＿上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研巧工作所取得的成果。除文中己經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的作品成果。對(duì)本文的研究。做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中Ｗ明確方式標(biāo)明本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名；曰期：年１月＾曰２０碩±學(xué)位論文上海交通大學(xué)１２級(jí)——

4、上海交通大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學(xué)可將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。□，在年解密后適用本授權(quán)書。保密＿＿本學(xué)位論文屬于不保密因；＂＂（請(qǐng)?jiān)谏戏娇騼?nèi)打Ｖ）學(xué)位論文作者簽名：；指導(dǎo)教師簽名日期：年日期：如礦年廣月牛日上海交通大學(xué)2012級(jí)碩士學(xué)位論文巨噬細(xì)胞極化在鈣化性主動(dòng)脈瓣

5、中的表達(dá)及作用研究中文摘要背景和目的：鈣化性主動(dòng)脈瓣疾病是全世界范圍內(nèi)發(fā)病率最高的心臟瓣膜疾病之一。而隨著老齡化社會(huì)的來(lái)臨，這一數(shù)字仍將不斷增加，造成極大的社會(huì)醫(yī)療負(fù)擔(dān)。目前對(duì)于該病，除了手術(shù)治療，尚無(wú)有效的藥物可用于延緩疾病的進(jìn)展。事實(shí)上大量的研究提示主動(dòng)脈瓣鈣化的病變過(guò)程類似于動(dòng)脈粥樣硬化，包括脂質(zhì)沉積、炎癥浸潤(rùn)、瓣膜血管新生和纖維化重塑，最終導(dǎo)致鈣化。而在這些過(guò)程中，炎癥浸潤(rùn)是其中關(guān)鍵因素之一，伴隨主動(dòng)脈瓣瓣膜鈣化的整個(gè)過(guò)程。巨噬細(xì)胞作為瓣膜炎癥浸潤(rùn)的主要炎癥細(xì)胞無(wú)疑起著至關(guān)重要的作用。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞并非單一性狀的炎癥細(xì)胞，而是可以通過(guò)極化分化

6、為不同亞型。大量研究認(rèn)為巨噬細(xì)胞極化在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起著重要作用，而關(guān)于巨噬細(xì)胞極化在主動(dòng)脈瓣鈣化中的作用目前尚未明確。因此本研究旨在通過(guò)對(duì)巨噬細(xì)胞極化在鈣化主動(dòng)脈瓣中的表達(dá)以及其對(duì)瓣膜間質(zhì)細(xì)胞的影響等相關(guān)研究，來(lái)探討巨噬細(xì)胞極化在主動(dòng)脈瓣鈣化中的作用機(jī)制。方法：按一定納入排除標(biāo)準(zhǔn)收集臨床上行主動(dòng)脈瓣置換手術(shù)的主動(dòng)脈瓣瓣膜標(biāo)本。首先通過(guò)比較硝酸、甲酸以及EDTA三種實(shí)驗(yàn)室常用脫鈣液對(duì)鈣化性主動(dòng)脈瓣脫鈣后H&E和免疫組化染色效果，篩選出合適的鈣化性主動(dòng)脈瓣瓣膜脫鈣液。對(duì)收集的鈣化性主動(dòng)脈瓣瓣膜進(jìn)行脫鈣處理后，采用免疫組化的方法來(lái)探測(cè)巨噬細(xì)胞

7、極化后的不同亞型在鈣化性主動(dòng)脈瓣中的分布，得出其中主要的巨噬細(xì)胞分化后亞型。然后通過(guò)體外培養(yǎng)人主動(dòng)脈瓣VICs，用不同亞型巨噬細(xì)胞來(lái)進(jìn)行相應(yīng)刺激，分別在蛋白水平、基因表達(dá)水平、形態(tài)學(xué)等方面來(lái)檢測(cè)刺激后VICs的成骨鈣化情況，以比較不同上海交通大學(xué)2012級(jí)碩士學(xué)位論文亞型巨噬細(xì)胞對(duì)VICs的成骨鈣化作用。結(jié)果：在脫鈣效果的比較上面，EDTA組盡管脫鈣速度較慢，但其脫鈣效果最好。通過(guò)EDTA對(duì)鈣化主動(dòng)脈瓣瓣膜脫鈣后進(jìn)行免疫組化發(fā)現(xiàn)：相比較正常主動(dòng)脈瓣，鈣化主動(dòng)脈瓣中巨噬細(xì)胞呈大量表達(dá)，其中尤其以M1型巨噬細(xì)胞表達(dá)增加明顯。而通過(guò)不同亞型巨噬細(xì)胞體外刺激VI

8、Cs發(fā)現(xiàn)M1型巨噬細(xì)胞刺激后的VICs無(wú)論是在堿性磷酸酶活性水平，還是在成骨鈣化