骨質(zhì)疏松狀態(tài)下bmscs成骨能力及與nf-κb信號通路相關(guān)基因的研究

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1、分類號：：單位代碼密級：學(xué)號：沖、達(dá)碩士學(xué)位論文中文論文題目：骨質(zhì)疏松狀態(tài)下成骨能力及與信號通路相關(guān)基因的研究英文論文題目：申請人姓名李琦指導(dǎo)教師謝志堅專業(yè)名稱口腔臨床醫(yī)學(xué)研究方向口腔頜面外科所在學(xué)院醫(yī)學(xué)院論文提交曰期年月骨質(zhì)疏松狀態(tài)下成骨能力及與信號通路相關(guān)基因的研究論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：論文評閱人張雄主任醫(yī)師杭州市第一人民醫(yī)院評閱人朱慧勇主任醫(yī)師浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院劉雁鳴主任醫(yī)師浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二屎院評閱人評閱人答辯委員會主席：王慧明教授浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院委員何福明主任醫(yī)師浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院委員谷志遠(yuǎn)教授淅

2、江中醫(yī)藥大學(xué)委員委員委員委員答辯日期：年月曰浙江大學(xué)研宄生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研宄成果，也不包含為獲得浙江大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研宄所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：乃年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解浙江大學(xué)有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)

3、浙江大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索和傳播，可以釆用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書）簽字日期：年月日簽字日期：年月日浙江大學(xué)碩學(xué)位論文致謝致謝在浙大攻讀碩士的這三年是我人生中最充實、最有價值的時光，而這美好的時光馬上就要結(jié)束，慢慢回想，我有太多的人要感謝。本論文在導(dǎo)師謝志堅的悉心指導(dǎo)下完成的。謝老師專業(yè)知識淵博、工作認(rèn)真負(fù)責(zé)，師德高尚樸實、為人平易和藹。在學(xué)術(shù)上，讓我掌握了基本的研究方法，樹立了遠(yuǎn)大的目標(biāo)，使我一個學(xué)術(shù)菜鳥慢慢對科研產(chǎn)生了興趣。在生活上，我一個北方人獨自

4、來到美麗的杭州，非但沒有感受到毫無歸宿感的孤獨，還讓我異常自信的去做每一件事，因為我知道謝老師永遠(yuǎn)在背后默默的支持我，這種感覺真的超級棒。從課題的開題，試驗方法設(shè)計，實驗的技術(shù)路線，到實驗完成，論文的撰寫，每一步都是在導(dǎo)師的悉心指導(dǎo)下完成的，傾注了導(dǎo)師大量的心血。在此，謹(jǐn)向?qū)煴硎境绺叩木匆夂椭孕牡母兄x！同時要特別感謝博士后學(xué)姐王宇、博士學(xué)姐石玨、方文，她們教會了很多實驗技術(shù)，在實驗遇到問題時也總能給我提出寶貴的實驗意見，陪我渡過實驗低潮期。同時感謝陪伴我一路走來的陳贊、張晶、柯可、賴愷晨、沈建偉等實驗室小伙伴，感謝他們實驗室里陪伴、曰常生活

5、中的幫助。此外，還要感謝我的家人和朋友，一直給予我莫大的幫助、理解，在這里請接受我誠摯的謝意，同時，在此我向浙江大學(xué)附屬口腔醫(yī)院的所有老師及實驗室技術(shù)老師表示衷心的感謝，感謝你們的辛勤栽培！最后感謝每一位給予過我?guī)椭屠蠋煛⑼瑢W(xué)，謝謝你們！浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要骨質(zhì)疏松狀態(tài)下成骨能力及與信號通路相關(guān)基因的研究浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院口腔臨床醫(yī)學(xué)碩士研究生李琦導(dǎo)師謝志堅中文摘要目的：研究骨質(zhì)疏松狀態(tài)下成骨分化的能力及其調(diào)控基因。材料與方法：骨質(zhì)疏松大鼠模型的建立及鑒定：取只同批次，體重接近，健康狀態(tài)良好的月齡雌性大鼠，隨機(jī)分為兩組，一組行去勢手術(shù)（

6、組），另一組行假手術(shù)（組，手術(shù)個月后，通過子官體重比、血清學(xué)和影像學(xué)檢測對動物模型進(jìn)行鑒定。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（，的分離培養(yǎng)及鑒定：采用全細(xì)胞貼壁法分離、培養(yǎng)和純化，觀察其細(xì)胞形態(tài)，并用流式細(xì)胞術(shù)對其進(jìn)行鑒定。成骨能力差異：成骨誘導(dǎo)后，測定兩組細(xì)胞堿性磷酸酶（，、骨每素（在和時的表達(dá)差異，茜素紅染色檢測天鈣結(jié)節(jié)形成差異。差異基因的篩選和鑒定：兩組成骨誘導(dǎo)天后，提取，通過基因芯片技術(shù)篩選出與核轉(zhuǎn)錄因子，信號通浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要路相關(guān)的表達(dá)差異基因，并用進(jìn)行鑒定。結(jié)果：組與組相比，血清雌二醇表達(dá)量下降，體重變化量上升子宮體重比測量顯示：與

7、組相比，組下降檢測顯示：與組相比，組的骨小梁間隔減少，骨質(zhì)量降低；骨密度（、骨體積分?jǐn)?shù)（、骨小梁數(shù)目（分別減少、、骨小梁分離度（增加°。流式細(xì)胞術(shù)鑒定結(jié)果顯示，表面標(biāo)記物和呈陽性表達(dá)，表達(dá)率分別為和，和呈陰性表達(dá)，表達(dá)率分別為和相比于組，組的的和表達(dá)量分別降低、；的和表達(dá)量分別降低、鈣結(jié)節(jié)形成數(shù)量，組均明顯小于組（諦選出個表達(dá)量差異倍以上的基因，其中有個與信號通路相關(guān)的重要差異基因，驗證結(jié)果顯示、、、、、的表達(dá)量，組較組，分別高出、、、、、而的表達(dá)量，組較組降低結(jié)論：大鼠去勢后，骨結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯改變，骨小梁明顯減少，松質(zhì)骨數(shù)量降低，動物模型建立

8、成功；全骨髓貼壁法能成功分離、培養(yǎng)出大量純度較高的浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要與組相比，組成骨能力明顯減弱；組與組在誘導(dǎo)成骨過程中存在著明顯的基因表達(dá)差異，其中差異