共脅迫下玉米幼苗microrna文庫的分析與驗(yàn)證

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1、犬ｉｔ技－大學(xué)ＤＡＬＩＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ碩士芽位記文ＭＡＳＴＥＲＡＬＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ共脅迫下玉米幼苗ｍｉｃｒｏＲＮＡ文庫的分析與驗(yàn)證到■去／生物化學(xué)與分子生物學(xué)、學(xué)１１作者姓名指導(dǎo)教師蘇喬副教授２０１５年６月答辯日期＿＿＿碩士學(xué)位論文ｍｉｃｒｏＲＮ共脅迫下玉米幼苗Ａ文庫的分析與驗(yàn)證ＴｈｅｍｉｃｒｏＲＮＡＬｉｂｒａｒｉｅｓＡｎａｌｙｓｉｓａｎｄＶｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＭａｉｚｅ－ＳｅｅｄｌｉｎｇｓＵｎｄｅｒＣｏｓｔｒｅｓｓ作者姓名：

2、學(xué)科、專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)號：２１２１８０８３指導(dǎo)教師：蘇喬副教授完成日期：２０１５年５月大ｓｉ理工大摩ＤａｌｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ大連理工大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明作者鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。盡我所知，除文中巳經(jīng)注明引用內(nèi)容和致謝的地方外，本論文不包含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，也不包含其他已申請學(xué)位或其他用途使用過的成果一。與我同工作的同志對本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說明并表示了謝意。若有不實(shí)之處，本人愿意承

3、擔(dān)相關(guān)法律責(zé)任。學(xué)位論文題目：哀ｍｉ脅細(xì)飛五集械滿作者簽名日期：年」Ｌ月＿±＿日大連理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要干旱、鹽和堿等非生物脅迫對植物的生長、發(fā)育和產(chǎn)量影響很大。玉米一一是，種重要的作物，目前對于玉米非生物脅迫的研究集中在單脅迫多個脅迫共處理ｃｏＲＮＡ一的情況很少。ｍｉｒｉｎｉＲＮＡ是種廣泛存在于植物中的非編碼?。遥危粒诜巧铮崳姡ǎ┟{迫中扮演著重要的角色。對于干旱、鹽和堿共脅迫下玉米幼苗ｍｉＲＮＡ的研宄目前還沒有報道。因此，本研宄構(gòu)建２個ｍｉＲＮＡ文庫，蹄選得到對干旱、鹽和堿共脅迫有顯一ｍ著響應(yīng)的ｍｉＲＮＡ，通過進(jìn)步分析和驗(yàn)證

4、，了解這些ｉＲＮＡ的功能。對ｍｉＲＮＡ文庫的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，共得到３１個ｍｉＲＮＡ家族的１１２個已知ｍｉＲＮＡ和１０個新ｍｉＲＮＡ，其中５８個ｍｉＲＮＡ表達(dá)差異顯著，１７個ｍｉＲＮＡ上調(diào)表達(dá)，４１個ｍｉＲＮＡ下調(diào)表達(dá)。對所有ｍｉＲＮＡ進(jìn)行勒基因預(yù)測，共得到２２２４條勒基因。使用ｇｅＮｏｒｍ、ＮｏｍｉＦｉｎｄｅｒ和ＢｅｓｔＫｅｅｐｅｒ軟件對１１個玉米候選內(nèi)參基因進(jìn)行穩(wěn)定性分析，發(fā)現(xiàn)ｍｉｃｒｏＲＮＡ總體比其他候選內(nèi)參基因穩(wěn)定，選擇相對穩(wěn)定的－ｚｍａ－和ｍｉＲ】７Ｉａ為內(nèi)參基因進(jìn)行后續(xù)研宄。隨機(jī)挑選１１個ｍｉＲＮＡ進(jìn)行ｑＲＴＰＣＲ的驗(yàn)證一，發(fā)現(xiàn)除與建庫結(jié)果不相符

5、外ｍｉＲＮＡ與文庫中的表達(dá)趨勢均，其余致。對Ａ９個己知ｍ－ｉＲＮＡ進(jìn)行靴基因ＲＴＰＣＲ的上述１１個ｍｉＲＮ中的ｑ分析，發(fā)現(xiàn)在不同組織中，地下組織中的多數(shù)ｍｉＲＮＡ的響應(yīng)程度大于地上組織；在不同處理程度中ｍｉＲＮＡ有隨處理強(qiáng)度加大響應(yīng)加大的趨勢，且整；勒基因?qū)χ卸群椭囟让{迫有較強(qiáng)的響應(yīng)體上與其相應(yīng)的ｍｉＲＮＡ呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，符合ｍｉＲＮＡ對勒基因的調(diào)控規(guī)律。最后，對１１個ｍｉＲＮＡ和１０個勒基因進(jìn)行上游順式作用元件分析，發(fā)現(xiàn)含有大量與脅迫應(yīng)答和激素應(yīng)答有關(guān)的順式作用元件。關(guān)鍵詞：ｅａｗａＡｓＬｍｉｃＮＡ非生物脅迫．ｒｏＲ因定量ＰＣＲ；玉米（Ｚｊ）；；內(nèi)

6、參基；實(shí)時－－Ｉ共脅迫下玉米幼苗ｍｉｃｒｏＲＮＡ文庫的分析與驗(yàn)證ＴｈｅｍｉｃｒｏＲＮＡＬｉｂｒａｒｉｅｓＡｎａｌｙｓｉｓａｎｄＶｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＭａｉｚｅＳｅｅｄｌｉｎｇｓＵｎｄｅｒ－ＣｏｓｔｒｅｓｓＡｂｓｔｒａｃｔＤｒｏｕｇｈｔｓａｌｔａｎｄａｌｋａｌｉａｒｅｔｈｒｅｅｏｆｔｈｅｍａｏｒａｂｉｏｔｉｃｓｔｒｅｓｓｅｓａｄｖｅｒｓｅｌａｆｆｅｃｔｉｎｌａｎｔ，ｊｙｇｐ＇ｒｏｗｔｈｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔａｎｄｒｏｄｕｃｔｉｖｉｔ．Ｍａｉｚｅｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｗｏｒｌｄｓｍｏｓｔｉｍｏｒｔ

7、ａｎｔｃｒｏ．Ｔｈｅｇ，ｐｐｙｐｐｃｕｒｒｅｎｔｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｄｒｏｕｇｈｔ，ｓａｌｔａｎｄａｌｋａｌｉｓｔｒｅｓｓｅｓｉｎｍａｉｚｅｈａｖｅｂｅｅｎｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙｆｏｃｕｓｅｄｏｎ－ｔｈｅｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｔｒｅｓｓｗｈｌｅｃｏｔｒｅｓｓｈａｓｒａｒｅｌｂｅｅｎｓｔｕｄｉｅｄ．ＭｉｃｒｏＲＮＡｓｍｉＲＮＡｓａｒｅｉｓｙ（）ｃ－ｌａｓｓｅｓｏｆｎｏｎｃｏｄｉｎｓｍａｌｌＲｓｔｈ