副溶血弧菌分離株的耐藥特征和基因分型研究

《副溶血弧菌分離株的耐藥特征和基因分型研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、．．＇－－Ｖ＇，＇，：，■■－－？譜馬或濤典＞：＾嗦撫±專業(yè)學(xué)位論文逆Ｉ■－＇．３．＇歌－１＿■＇．■＇＇／＇－．：．＇副溶血狐菌分離株的耐藥特征和基因分型研究＇．，Ｖ／－：．？＞．．．＇．論乂作者：趙思宇．．．，巧．．皆指導(dǎo)教師：周敏副教授營智勇教授專業(yè)學(xué)位類別：扯推尸專業(yè)學(xué)位領(lǐng)域：食品加工與安全：品工程所在院系食科學(xué)與學(xué)％；？２０１５５月年與．方■■－＾－＾Ｖ：ｆ：；．：：；ＶＹ；：／＊．．■ｔｙ＾尸■ｉ．、‘．．．■＇ｈ－／

2、．，？／一：＞，‘．Ｉ．．一＇：．—＇＇，＇＇Ｖ，ｖ．分類號密歌ＵＤＣ１０４９６學(xué)校代碼碩±專業(yè)學(xué)位論文副溶血弧菌分離株耐藥特征和基因分型研究ＲｅｓｅａｒｃｈｔｈｅＰｈｅｎｏｔｉｃＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌＲｅｓｉｓｔａｎｃｅｙｐａｎｄＧｅ打ｏｔｙｐｉｎｇＴｒａｉｔｓｏｆ巧ｐ幻ｒａｈ幻ｅｍｏｆｙｔｉｃｕｓＩｓｏｈｄｅｓ論文作者趙思宇指導(dǎo)教師周敏副教授宮智勇教授學(xué)位類方］農(nóng)業(yè)推廣專業(yè)領(lǐng)域食品力口工與安全論文提交日期論文答辯日期答辯委會主評閱人貢席

3、２０１５５年月摘要副溶血性弧菌（Vibrioparahaemolyticus,VP），是一種革蘭氏陰性食源性致病菌，廣泛的存在于貝類、魚類、蝦蟹等海產(chǎn)品中，由它引發(fā)的食品安全事件每年呈不斷上升趨勢。此外，它還嚴(yán)重危害了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。隨著在臨床治療中和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)廣泛使用及濫用抗生素，副溶血性弧菌對抗生素的耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)重，同時由于耐藥基因的廣泛傳播從而使得新的耐藥菌株不斷出現(xiàn)。因此，有必要對不同來源的副溶血弧菌進(jìn)行耐藥性評估以及相關(guān)耐藥基因的分析。在此基礎(chǔ)上，采用基因分型手段分析不同來源副溶血弧菌分離株的相關(guān)性，有利于了解副溶血弧菌的流行、傳播規(guī)律，實(shí)現(xiàn)對副溶血弧菌的主動監(jiān)測、傳

4、染源追蹤。本課題主要對不同來源的副溶血弧菌分離株的耐藥表型、耐藥基因和毒力基因檢測以及基因分型進(jìn)行了研究，主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下：一、上海地區(qū)不同來源副溶血弧菌分離株抗生素耐藥譜調(diào)查針對60株來源于臨床和食品的副溶血弧菌分離株，根據(jù)2012年美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會（CLSI）標(biāo)準(zhǔn)M100-S22，采用紙片擴(kuò)散法測定其對18種抗生素的耐藥情況。結(jié)果顯示，60株不同來源副溶血弧菌分離株對氨芐西林的耐藥率最高，達(dá)到了85%；其次為頭孢唑啉，達(dá)到41.7%，頭孢噻吩為20%；此外，對哌拉西林、頭孢他啶、四環(huán)素、阿莫西林/克拉維酸、甲氧芐啶均有一定抗性；所有菌株對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢噻肟、亞安

5、培南、慶大霉素、萘啶酸、諾氟沙星、氯霉素都敏感。相比于食品分離株，臨床分離株耐藥譜更寬，耐藥率相對要高。二、不同來源副溶血弧菌分離株耐藥基因和整合性接合元件的篩查存在于細(xì)菌染色體或可移動元件上的耐藥基因是細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的主要原因。本研究根據(jù)60株副溶血弧菌分離株的藥敏試驗(yàn)結(jié)果，采用PCR技術(shù)檢測14種相關(guān)耐藥基因和整合性接合元件的分布情況。結(jié)果顯示：攜帶率最高的是位于副溶血弧菌第二號染色體的β-內(nèi)酰胺酶基因VP-bla，其攜帶率為100%；在本研究中分離株中，未檢測到質(zhì)粒介導(dǎo)的β-內(nèi)酰胺酶基因blaTEM，、blaCTX、,blaSHV、blaOXA；另外，也未檢測到常見的四環(huán)素抗性基因t

6、etA、tetB、tetG和磺胺類抗生素抗性基因sul1、sul2及4種整合性接合元件intl1、intl2、intl3、intlSXT。三、不同來源副溶血性弧菌分離株毒力基因tdh、trh的篩查從60株副溶血性弧菌中選取具有代表性的21株臨床和食品分離株，利用PCR方法進(jìn)行毒力因子tdh、trh檢測。結(jié)果表明：在所有菌株中，tdh的攜帶率高（76.2%），而trh攜帶率低（9.5%）；兩種不同來源的菌株對于這兩種毒力基因的攜帶率差異大，I臨床分離株tdh和trh的攜帶率較高，分別達(dá)到92.3%和15.4%，而食品分離株則較低，分別為50%和0。四、不同來源副溶血性弧菌分離株的MLST分型

7、分析為了揭示副溶血弧菌的流行毒力菌株及其傳播規(guī)律，有必要分析不同來源的副溶血弧菌分離株的遺傳相關(guān)性。本研究使用MLST對21株臨床、食品分離株進(jìn)行分子分型，結(jié)果顯示，21株分離株分為13個STs（序列型），ST-3是最多的一個序列型，也是全球流行株，同屬于這一個型的有6株臨床分離株和2株食品分離株，接下來是ST-305，同屬于這一型的有1株臨床分離株和1株食品分離株，表明食品分離株和致病菌株在遺傳背景上比較接近，具有潛在