影響mp1和gmpr2基因在遼寧絨山羊皮膚中表達的研究

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3、文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所取得的研究成果！標(biāo)注和致謝的地方外，不包含他人和其他機構(gòu)已經(jīng)撰寫或發(fā)表過的研究成果，其他同志的研究成果對本人的肩示和所提供的幫助，均已在論文中做了明確的聲明并表示謝意。３學(xué)位論文作者簽名：ｆ施學(xué)位論文版權(quán)的使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解江寧師范大學(xué)有關(guān)保留＇及學(xué)校有權(quán)保留并向國、使用學(xué)位論文的規(guī)定，家有關(guān)部口或機構(gòu)送交復(fù)印件或磁盤，允許論文被查閱和借閱。本文授權(quán)化寧師范大學(xué)，可Ｗ將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫并進行檢索，可Ｗ采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯’一致編學(xué)位論文，并且本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相。

4、保密的學(xué)位論文在解密后使用本授權(quán)書。學(xué)位論文作者簽名；指導(dǎo)教師簽名：冰＾少年《／簽名日期：月日遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要本實驗旨在研究調(diào)控MP1與GMPR2基因在皮膚中表達的影響因素與機制，希望以此了解毛囊細胞的形成與周期發(fā)育，對進一步選育遼寧絨山羊提供建設(shè)性意見及幫助。首先制備Noggin基因的RNA干擾載體并且感染羊皮膚傳代細胞，然后利用成纖維細胞生長因子和類胰島素細胞生長因子與褪黑激素既單獨又聯(lián)合處理羊皮膚細胞，最后通過ThermalCyclerDiceTMSystemSoftware計算分析出MP1和GMPR2基因的相對表達量。實驗結(jié)果如下：（1）慢病毒的最佳MOI值為

5、30，并且需要添加polybrene助染劑增強感染效率。（2）成功構(gòu)建Lenti-Noggin-EGFP-miR慢病毒后，經(jīng)過計算滴度為1.35×106Tu/ml。（3）GMPR2基因在Noggin干擾組的相對表達量最低，而在陰性對照組中最高。（4）褪黑激素處理羊成纖維細胞結(jié)果顯示，MP1基因的表達被抑制，但隨著藥物處理時間的延長，抑制效果被削弱。（5）FGF5處理羊成纖維細胞時，MP1與GMPR2基因在分時段表達差異非常顯著，其中24小時10-6g/L和48小時10-5g/L分別出現(xiàn)最大值。（6）IGF-1處理羊成纖維細胞，目的基因MP1隨著藥物處理時間延長，濃度降低，基因表達的抑制程度逐漸

6、降低，而GMPR2基因在10-4g/L72小時出現(xiàn)最大值。（7）協(xié)同實驗證明褪黑激素與任何一種外源蛋白聯(lián)合使用均可以促進兩種基因的表達，其中與FGF5協(xié)同作用效果更顯著。結(jié)論：（1）BMP信號通路負調(diào)控GMPR2基因的表達。（2）褪黑激素對FGF5具有正相關(guān)調(diào)控作用，協(xié)同使用可以促進兩個目的基因的表達。這為進一步研究細胞因子與褪黑激素對目的基因表達的作用機制提供數(shù)據(jù)支持，以及對絨毛性狀的影響提供理論基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：MP1；GMPR2；FGF5；Noggin；IGF-1；慢病毒I影響MP1和GMPR2基因在遼寧絨山羊皮膚中表達的部分研究Someresearchoftheinfluenceonexp

7、ressionofMP1andGMPR2GenesinskinofLiaoning’sCashmeregoatAbstractThisexperimentaimedtoinvestigatetheinfluencefactorsandmechanismofregulatingexpressionofMP1andGMPR2genes,andtheformationanddevelopmentofha