轉(zhuǎn)錄組測(cè)序揭示山羊和綿羊疼痛應(yīng)答遺傳機(jī)制研究

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1、分類號(hào)Ｓ８１３．３學(xué)校代碼１０１２９＾ＰｉＷＨ？—＇一＊ＵＤＣ６３１學(xué)號(hào)２０１１３１１００１＾書(shū)本蓉＂東攀博ｄｒ?qū)W位論文轉(zhuǎn)錄組測(cè)巧揭示山羊和綿羊疼痛應(yīng)答遺傳機(jī)制硏究ｓｔｕｄｙｏｎＧｏａｔａｎｄＳｈｅｅｐＰａｉｎＲｅｓｐｏｎｓｅＧｅｎｅｔｉｃＭｅｃｈａｎｉｓｍｂＴｒａｎｓｃｒｉ化ｍｅＳｅｕｅｎｃｉｎｙｐｑｇ申請(qǐng)人：鄧秀玲學(xué)科ｎ類；農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)：動(dòng)物發(fā)育生物學(xué)與生物技術(shù)研究方向：動(dòng)物細(xì)胞發(fā)育與調(diào)控指導(dǎo)教師：周歡敏教授＾５９

2、＇二〇－論文提交日期：五年六ＡＩＨｍ＇ｉ內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研巧成果。據(jù)我所知，除了文中特別加Ｗ標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包巧為獲得我校或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在，與我論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處一切相關(guān)責(zé)，本人承擔(dān)任。論文作者簽名’／／

3、：５＾旅日期：萬(wàn)）化戶巧蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研巧生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本人完全了解內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，目Ｐ；研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱。學(xué)校可Ｗ公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容（保密內(nèi)容除外），采用影印、縮印或其他手段保存論文。

4、論文作者簽名；珠＊於指導(dǎo)獅簽名：、‘Ｉ日期；城《！摘要慢性疼痛是常見(jiàn)的復(fù)雜的神經(jīng)病理與主觀感受癥狀，在不同物種之間對(duì)疼痛的感受存在著明顯的差別。脊髓背根神經(jīng)節(jié)（ｄｏｒｓａｌｒｏｏｔａｎｌｉｏｎ，ＤＲＧ）是痛覺(jué)ｇｇ產(chǎn)生、維持和傳導(dǎo)的初級(jí)中樞。因此研究ＤＲＧ的轉(zhuǎn)錄組有助于系統(tǒng)認(rèn)識(shí)慢性疼痛發(fā)生的調(diào)控機(jī)制和疼痛致病基因的篩選。本研究選擇ＣＦＡ疼痛處理（實(shí)驗(yàn)組）－，每組３只和未處理（對(duì)照姐）的綿羊和山羊各２組，取其ＤＲＧ組織，通過(guò)ＲＮＡｓｅｑ高通量測(cè)序與生物信息學(xué)分析，揭示不

5、同物種間疼痛響應(yīng)的基因調(diào)拉模式，取得如下主要結(jié)果：１．疼痛的調(diào)控發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平、轉(zhuǎn)錄后水平和可變剪接水平。２．差異基因聚類結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組山羊和綿羊的基因表達(dá)模式發(fā)生了顯著變化。３．ＤＥＧ分析，實(shí)驗(yàn)組山羊獲得差異表運(yùn)基因１７４８?jìng)€(gè)，綿羊２，４４１個(gè)；種間，差異基因２，９３５個(gè)，其中，僅在綿羊ＤＲＧ表達(dá)的基因４２６個(gè)，僅在山羊表達(dá)３５３個(gè)。４．ＧＯ分析顯示Ｊｌ及，山羊參與炎癥應(yīng)答、免疫應(yīng)答、損傷應(yīng)答和防御應(yīng)答ｔｎ控離子通道、神經(jīng)遞質(zhì)及其受體等相關(guān)基因表達(dá)變化顯著，如：ＣＣＬ２

6、７、ＰＲＫＡＣＡ、ＧＡＢＲＡ４、Ｇ民ＩＡ２、ＧＲＩＫ３、ＣＡＣＮＡ１Ｅ、ＳＣＮ３Ａ、ＫＣＮＫ１等基因通過(guò)上調(diào)或下調(diào)參與疼痛應(yīng)答，發(fā)揮了關(guān)鍵調(diào)控作用，該結(jié)果提示炎性疼痛發(fā)生時(shí)山羊的免疫系統(tǒng)發(fā)生了顯著變化。這些差異基因參與了Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓｉｇｎａｌｉｎｇａｔｈｗａ、Ｒｅｔｒｏｒａｄｅｅｎｄｏｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄｓｉｎａｌｉｎｇ、Ｃａｌｃｉｕｍｓｉｎａｌｉｎａｔｈｗａ、ｐｙｇｇｇｇｐｙＧｌｕｔａｍａｔｅｒｇｉｃｓｙｎａｐｓｅ、ＭＡＰＫｓｉｇｎａｌｉｎｇａｔｈｗａ等途徑，

7、它們的激活在山羊疼痛ｐｙ應(yīng)答中起了關(guān)鍵作用。５．ＧＯ分析顯示，綿羊抑制性神經(jīng)遞質(zhì)及其受體基因如ＧＡＢ民Ｇ３、ＧＡＢＲＢ２、ＧＡＢＲＢ１、ＧＬＲＡ３、ＣＬＣＮ７表達(dá)活躍；疼痛應(yīng)答過(guò)程中ＳＣＮ９Ａ、ＳＣＮ４Ｂ、ＳＣＮ－１１Ａ、ＳＣＮ８Ａ、ＳＣＮ７Ａ、ＳＣＮ１０Ａ、ＴＲＰＶ１等編碼電壓ｎ；空鋼離子通道及參與納寓子運(yùn)輸、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子信號(hào)途徑相關(guān)基因表達(dá)下調(diào)，其中ＳＣＮ９Ａ、ＴＲＰＶ１表達(dá)下調(diào)與疼痛耐雙相關(guān)。差異基因參與ＧＡＢＡｅｒｇｉｃｓｙｎａｐｓｅ、Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎｓｉｇｎａ

8、ｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ．Ｒｅｔｒｏｇｒａｄｅｅｎｄｏｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄｓｉｇｎａｌｉｎｇ、Ｍｏｒｐｈｉｎｅ－－－ａｄｄｉｃｔｉｏｎ、Ｎｉｃｏｔｉｎｅａｄｄｉｃｔｉｏｎ、Ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｇａ化ｄｉｏｎｃｈａｎｎｅｌｌｉｇａｎｄｂｉｎｄｉｎ呂等迎路，衷明這些迪路可能參與了綿卞疼滿應(yīng)答過(guò)程。６，．種間差異基因ＧＯ分析顯示電壓口挖離子通道、損傷化答