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1、分類號：密級：UDC：學(xué)號：416522612034南昌大學(xué)專業(yè)學(xué)位研究生學(xué)位論文肝星狀細(xì)胞自噬水平與細(xì)胞增殖、凋亡水平的相關(guān)性研究TheRoleofautophagyinHumanstellatecell-T6Growthandapoptosis鐘佳培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：杜芳騰教授主任醫(yī)師專業(yè)學(xué)位種類：臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)領(lǐng)域名稱：內(nèi)科學(xué)（消化系疾?。┱撐拇疝q日期：2015年5月答辯委員會主席：何明評閱人：陳建勇劉丹2015年5月一、學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)
2、注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南昌大學(xué)或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名（手寫）：鐘佳簽字日期：2015年06月09日二、學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解南昌大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。同時授權(quán)北京萬方數(shù)據(jù)股份
3、有限公司和中國學(xué)術(shù)期刊（光盤版）電子雜志社將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)，同意按“章程”規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。學(xué)位論文作者簽名（手寫）：鐘佳導(dǎo)師簽名（手寫）：杜芳騰簽字日期：2015年06月09日簽字日期：2015年06月09日論文題目肝星狀細(xì)胞自噬水平與細(xì)胞增殖、凋亡水平的相關(guān)性研究姓名鐘佳學(xué)號416522612034論文級別博士□碩士√院/系/所南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)部專業(yè)內(nèi)科學(xué)（消化）E_mail備注：□公開□保密（向校學(xué)位辦申請獲批準(zhǔn)為“保密”，年月后公開）I摘要摘要目的：探討3-甲基腺嘌呤（3
4、-methyladenine,3-MA）抑制大鼠肝星狀細(xì)胞（HSC-T6）自噬后對HSC-T6細(xì)胞活化、增殖、凋亡、周期的影響及可能的作用機制。方法：體外培養(yǎng)大鼠肝星狀細(xì)胞HSC-T6，用不同濃度的3-MA處理，分為四個實驗組，即空白對照組（0.0mmol/l），低濃度組（2.5mmol/l），中濃度組（5.0mmol/l），高濃度組（10.0mmol/l）。用MTT法觀察細(xì)胞增殖活力；用流式細(xì)胞技術(shù)檢測4組細(xì)胞的周期和凋亡情況；用蛋白印跡法（Westernblot）分析不同濃度3-MA作用下各組HSC-T6細(xì)胞活化標(biāo)志α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、自噬標(biāo)志蛋白LC3Ⅱ、細(xì)胞周期
5、蛋白CyclinA、CyclinB1以及凋亡關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白Bcl-2、BAX的表達(dá)變化。結(jié)果：不同濃度的3-MA作用于HSC-T6細(xì)胞24h后，3-MA實驗組的HSC-T6細(xì)胞增殖明顯受到抑制，細(xì)胞凋亡率逐漸增高（均P<0.05）；S期及G2/M期細(xì)胞比例均明顯增加（均P<0.05）；Westernblot顯示加入3-MA處理后HCS-T6細(xì)胞LC3Ⅱ、α-SMA、CyclinA、CyclinB1、Bcl-2表達(dá)量均逐漸下降（均P<0.05），BAX表達(dá)量逐漸上調(diào)（P<0.05）。結(jié)論：（1）自噬抑制劑3-MA下調(diào)HSC-T6細(xì)胞的自噬水平，抑制LC3Ⅰ向LC3Ⅱ轉(zhuǎn)化，同時抑制HSCs
6、的增殖和活化效應(yīng)；（2）3-MA抑制HSC-T6細(xì)胞自噬后可分別通過下調(diào)CyclinA、CyclinB1蛋白水平誘導(dǎo)HSCs細(xì)胞周期阻滯在S期、G2/M期；(3)3-MA抑制HSC-T6細(xì)胞自噬后可通過上調(diào)促凋亡蛋白BAX表達(dá)和下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，升高BAX/Bcl-2的比率而誘導(dǎo)HSC-T6細(xì)胞凋亡。關(guān)鍵詞：3-甲基腺嘌呤；肝星狀細(xì)胞；CyclinA、CyclinB1、BAX、Bcl-2基因IIAbstractABSTRACTObjective:Toinvestigatetheinfluenceintheactivation,proliferation,cycleand
7、apoptosisofhepaticstellatecellsandtheunderlyingmolecularmechanismafterdifferentconcentrationsof3-methyladenine(3-MA)treathepaticstellatecellsinvitro.Methods:Preparatedifferentconcentrationsof3-MAandtreathepaticstellatecells.Therea
