輔助降血脂益生乳酸菌的篩選及其對高血脂大鼠腸道菌群的影響

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1、０１０３分類號學號Ｄ１１ＵＤＣ密級—巧ＶＭ義聲ＹＡＮＧＺＨＯＵＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ博去學位文輔助降血脂益生乳酸菌的篩選及其對高血脂大鼠腸道菌群的影響ｉＷｆｌｉｉ蛛大衛(wèi)１，２２５００９指導教師姓名，揚州大學，江蘇揚州：顧瑞霞教授申請學位級別：博擊學科專業(yè)名稱；動物源性食品營養(yǎng)與加王工程Ｈｅ論文提交ｔｌ期２０１４年１０月論義答辯Ｕ期：２０１４年１１月；學位授予單位ｆＨ期：２０１５年１月；揚州大學學位授答辯委員會屯席；王金玉２０１４年１２月輔助降Ｉｆ．ｌ；ｌｌ脂

2、益生韓酸菌的篩選及ｊ對高血脂火鼠腸道菌群的影響［—摘要、血管疾病的主要原因。研究表明血清中的血脂水平過高是引起眾多屯，降低血清中的血脂水平能夠顯著降低也血管疾病的死亡率。藥物治療是當前治療必血管疾病的主要方，。乳酸菌作為人體腸道中重要的益生式，但是藥物治療成本較高并且具有較大的副作用，，菌，已被證實能夠改善血清中的血脂水平并使腸道微生態(tài)系統(tǒng)發(fā)生長期而有益的變化而來源于人體自身的益生菌通常具有較高的安全性，因此本文從廣西己馬長壽地區(qū)的人群腸道中分離篩選出體外輔助降血脂能力較強的乳酸菌，并研究其在高血脂大鼠體

3、內(nèi)的降血＾，脂效果１＾及對高血脂大贏腸道菌群的影響從而探索乳酸菌在體內(nèi)降血脂的可能機制，并為Ｗ腸道菌群為靴點進行的益生菌干預治療提供理論依據(jù)。１．利用選擇性培養(yǎng)基從廣西巴馬長壽地區(qū)人群采集的糞便樣品中分離季Ｌ酸菌，通過體外試驗篩選出降膽固醇及甘油Ｈ醋能力較強的孔酸菌，然后進行模擬人工胃液、膽鹽耐受性、抑菌及耐藥性試驗；并研究其生長菌體、熱致死菌體及休眠菌體的膽固醇降解率及其在體外的降膽固醇方式。結(jié)果表明，從１５份糞便樣品中分離獲得１５６株乳酸菌，其中Ｌ２、ｐＳ１０、Ｌｆ７及化ｒｙｆｍ１３０１等１６株乳酸菌的膽

4、固醇及甘油蘭醋的降解率均分別大于３０．３５％和Ｌｆ７及Ｈ１Ｈ３．０的１５、Ｓ１０、ｓｒｆｍ１３０６３．００％，０．％、．３３％，Ｌｐ２ｙ在ｐ人工胃液中存活率均大于在含化３％及０．５％膽鹽的培養(yǎng)基中存活率均大于１５．００％Ｈｓｒｍ１３０１的抑菌能力較強于Ｌ２、Ｓ１日；ｙｆｐ及Ｌｆ７，對大腸桿菌、沙口氏菌及金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑分別為１４．６７ｍｍ、１１．３５ｍｍ０．６７ｍｍＨｓｒｆｍｌ３０１的耐藥性低于Ｌ２、ＳＩＯｆ７，、頭抱拉定、四環(huán)素、及１；ｙｐ及Ｌ對頭抱啤晰＇氯霉素、利福平素均敏感，對鏈霉素中度敏感，對

5、青霉素Ｇ、諾氣紗星及環(huán)丙沙星均耐藥；Ｈｓｒｆｍ１３０１在含０．１％、０Ｌ２、Ｓ１０ｆ７，ｙ．３％及化５％膽鹽的培養(yǎng)基中的降膽固醇能力較強于ｐ及Ｌ５６２５２８１％１３．２２１７１降解率分別為．％、．９及０％Ｌ、Ｓ０、Ｌｆｌｆｍ１３０的生長菌體、熱致；ｐ及化ｙ死菌體及休眠菌體均能降低培養(yǎng)基中的膽固醇，Ｈｓｒｆｍｙ１３０１生長菌體的膽固醇降解率為６１．９０％，高于Ｌｐ２、Ｓ１０及Ｌｆ７；化ｒｙｆｍ１３０１體外降膽固醇的主要方式為菌體吸收及共沉淀，２５０ｆｍ１３０１分別占其總降解率的６．％及３６．５０％。經(jīng)ＡＰＩ及

6、１６Ｓ瓜ＮＡ測序?qū)㈥懬设b定為鼠李糖■化孚Ｌ桿菌（王幻Ｃ化６幻礎(chǔ)沁５ｒ片幻ｗｎａｓｓＯ。２．通過飼喂４周高脂飼料來建立高血脂大鼠模型，Ｗ降血脂藥物血脂康作為陽性對照，研究Ｌｒ／ｊａｆＷＫＷｗｈｓｒｙｆｍ１３０１的菌體懸浮液、熱致死菌體懸浮液、菌體破碎漱及其發(fā)酵乳在高血脂大鼠體內(nèi)的降血脂效果。結(jié)果表明，飼喂４周高脂飼料，模型組大鼠血清中的膽固醇（Ｓｅｒｕｍｔｏｔａｌｃｈｏｌｅ巧ｅｒｏｌ，ＴＣ）、甘油；酷（Ｔｒｉｇｌｃｅｒｉｄｅｓ，ＴＧ）及低密度脂蛋白（Ｌｏｗｙｄｅｎｓｉｔｌｉｏｒｏｔｅｎｏｅｓｔｅｒｏｌ

7、，Ｌ）＜０．０５），分別為２．０５ｍｍｏｌ化、ｙｐｐｉ沈ｌＤＬＣ含量顯著高于對照組（尸ｎ揚州乂學博止＇學位論文１ｍｍｏＩ／Ｌ、０２８ｍｍｏｌ／Ｌ血脂大鼠模型建模成化灌胃４Ｌ．從函ｎｏｍｙｈｓｒｆｍ１３０１．９８．，表明高周ｙ發(fā)酵乳后，大鼠對飼料的利用率顯著高于模型組（尸＜０．０５），為２９．４６％；飼喂８周高脂飼料后，模型組大鼠的肝指數(shù)及體脂指數(shù)均顯著高于對照組及從面ｎｏｓｗｈｓ巧ｆｍ１３０１各處理組（於０５）．。．０，分別為３９８和３．５５灌胃４周巧ｆｍ１３０１的各處理方式后，菌體Ｓ浮液組及發(fā)酵

8、乳組大鼠血清中ＴＣ、ＴＧ的含量顯著低于模型組（尸＜０．０５），分別為１．５０ｍｍｏｌ／Ｌ、１．３０ｍｍｏｌ／Ｌ及１．５３ｍｍ〇ｙＬ、１ｔ．２８ｍｍｏｌ／Ｌ血清中ＴＣ、高密度脂蛋白（Ｈｉ