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《microrna-183在非小細胞肺癌中的表達及生物學(xué)功能研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、中圖分類號：R89;R36;R39SICHUANMEDICALUNIVERSITY碩士學(xué)位論文_MicroRNA_183在非小細胞肺癌中的表達及生物學(xué)功能研究院（系）、所臨床醫(yī)學(xué)院研究生姓名鄧_隱學(xué)科、專業(yè)腫瘤導(dǎo)師姓名吳敬波JL授二O—五年四月目錄1MicroRNA-183在非小細胞肺癌中的表達及生物學(xué)功能研究…………………………………………………………………………11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………41.3前言……………………………………………………………71.4材料與方法………………………………………
2、…………..141.5結(jié)果……………………………………………………………261.6討論……………………………………………………………331.7結(jié)論……………………………………………………………381.8參考文獻………………………………………………………391.9英漢縮略詞對照表……………………………………………472致謝……………………………………………………………483微RNAs與肝癌關(guān)系的研究進展（綜述）…………………………………………………………………49四川醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文MicroRNA-183在非小細胞肺癌中的表達及生物學(xué)功能研究摘要目的：在全世界范圍內(nèi)，肺癌是發(fā)病率
3、及死亡率均高的惡性腫瘤之一，是導(dǎo)致癌癥致死的主要原因，其中非小細胞肺癌(non-smal1celllungcancer，NSCLC)約占肺癌的80%。研究表明，MicroRNA（miRNA)對肺癌的發(fā)生、發(fā)展發(fā)揮著極其重要的作用。在實驗中首先對非小細胞肺癌組織標(biāo)本與配對的癌旁正常組織標(biāo)本利用實時熒光定量PCR(real-timePCR)技術(shù)檢測MicroRNA-183（miRNA-183)的表達水平；其次構(gòu)建miR-183穩(wěn)定過表達細胞株和抑制miR-183表達細胞株，觀察miR-183對非小細胞肺癌增殖、侵襲和遷移能力等生物學(xué)行為的影響,為肺癌的早期診斷，靶向治療和改善預(yù)后提供了新
4、的理論依據(jù)。方法：1、通過qRT-PCR技術(shù)測定miR-183在21例非小細胞肺癌組織與癌旁正常組織中的差異表達。2、構(gòu)建miR-183慢病毒及陰性對照載體,分別轉(zhuǎn)染A549細胞株,建立穩(wěn)定過表達miR-183的細胞株A549/miR-183mimics,抑制miR-183表達的穩(wěn)定細胞株A549/miR-183inhibitor以及陰性對照組A549/negativecontrol,轉(zhuǎn)染48h后在熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率并利用qRT-PCR技術(shù)檢測miR-183的表達水平，驗證轉(zhuǎn)染細胞株是否成功建立。3、A549/miR-183mimics，549/miR-183inhibitor
5、細胞株增值能力的觀察：對轉(zhuǎn)染后各組細胞株應(yīng)用細胞增殖實驗(CCK-8)來檢測增值能力的變化情況。4、A549/miR-183mimics，A549/miR-183inhibitor細胞株遷移能力的觀察：應(yīng)用劃痕實驗對轉(zhuǎn)染后各1組細胞株的遷移能力進行檢測。5、A549/miR-183mimics，A549/miR-183inhibitor細胞株侵襲能力的觀察：應(yīng)用Transwell侵襲實驗來檢測轉(zhuǎn)染后各組細胞株侵襲能力的變化情況。結(jié)果：1、相對于癌旁正常組織，miR-183在非小細胞肺癌組織中的表達水平呈顯著上調(diào)(P<0.05），證明miR-183在NSCLC組織中明顯升高；2、構(gòu)建m
6、iR-183慢病毒載體,轉(zhuǎn)染miR-183mimics48h后，qRT-PCR結(jié)果顯示miR-183表達水平較對照組相比呈顯著升高(18.23±0.68比1.0±0.29，P<0.01)，而轉(zhuǎn)染miR-183inhibitor表達水平較對照組相比呈顯著降低(0.06±0.01比1.0±0.29,P<0.01)，說明miR-183慢病毒過表達載體和抑制miR-183表達慢病毒載體構(gòu)建成功，實驗證明慢病毒轉(zhuǎn)染有效；3、CCK-8實驗表明,與空白對照組和陰性對照組相比，轉(zhuǎn)染miR-183mimics的肺癌A549細胞株增殖速度明顯增強，而轉(zhuǎn)染miR-183inhibitor的肺癌A549細
7、胞株的增殖速度明顯降低，證明過表達miR-183能增強A549細胞株增殖能力；4、劃痕實驗結(jié)果顯示，miR-183mimics轉(zhuǎn)染的A549細胞株遷移率明顯大于對照組，證明miR-183mimics可增強A549細胞株的遷移能力；而miR-183inhibitor轉(zhuǎn)染的A549細胞株遷移率明顯小于對照組,證明miR-183inhibitor降低A549細胞株的遷移能力，證明過表達miR-183能增強A549細胞株遷移能力；5、Transwell侵襲實驗中，
