亞硒酸化β乳球蛋白誘導(dǎo)k562細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究

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1、－－．．天津科技大學(xué)研究生學(xué)位論文（申請(qǐng)碩ｉ學(xué)位）■＂＇亞碩酸化目乳球蛋白誘導(dǎo)Ｋ５６２細(xì)胞調(diào)亡及其機(jī)制研究－－ＬＡＣＴＯＧＬＯＢＵＬＩＮＭＥＣＨＡＮＩＳＭＳＴＵＤＹＯＦＳＥＬＥＮＥＯＮＰＡＰＯＰＴＯＴＩＣＥＦＦＥＣＴＩＮＫ５６２ＣＥＬＬＳ－．．專業(yè)名碌：食品科學(xué)指導(dǎo)教師：劉安軍教授研究生姓名；雜麗峭學(xué)位級(jí)別；工學(xué)碩±論文提交日期；２０１４年１２月；Ｒ７３０．１學(xué)校分類號(hào)代碼：１００５７密級(jí)：不保密研巧生學(xué)號(hào)；１２８０８０２１亞砸酸化目魏球蛋白誘導(dǎo)Ｋ５６２細(xì)胞調(diào)

2、亡及其機(jī)制研究－Ｓｔｕｏｆ－ＭｅｃｈａｎｉｓｍｄｙＳｅｌｅｎｅＬａｃｔｏｌｏｂｕｌｉｎｏｎＡｏｔｏｓｉｓＥｆｆｅｃｔ虹ｐｇｐｐＫ５６２ＣｅＤｓ專業(yè)名稱：食品科學(xué)指導(dǎo)教師姓名：劉安軍教授研巧生姓名：索佳麗申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別；工學(xué)碩±論文提交日期：２０１４年１２月論文課題來(lái)源；國(guó)家自然基金學(xué)位授予單位：天津科技大學(xué)天津科技大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中特別加Ｗ標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包括任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)

3、表或撰寫的成果內(nèi)容，也不包括為獲得天津科技大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而。。使用過(guò)的材料對(duì)本文研巧做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均己在文中Ｗ明確方式標(biāo)明本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。作者簽名：氣像＾曰親年３月巧曰知識(shí)產(chǎn)權(quán)和專利權(quán)保護(hù)聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師具體指導(dǎo)下并得到相關(guān)研巧經(jīng)費(fèi)支持下完成的，其數(shù)據(jù)和研究成果歸屬于導(dǎo)師和作者本人，知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬天津科技大學(xué)；所涉及的創(chuàng)造性發(fā)明的專利權(quán)及使用權(quán)完全歸天津科技大學(xué)所有。本人保證畢業(yè)后，Ｗ本論文數(shù)據(jù)和資料發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名

4、第一單位仍然為天津科技大學(xué)。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。作者簽名：日期；＞狂年女月乃日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書、本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，同意公布論文的全部或部分內(nèi)。容，允許論文被查閱和借閱本人授權(quán)天津科技大學(xué)可Ｗ將本學(xué)位論文的全部或部分ｉｌ內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本＾＾學(xué)位論文。＂＂保密Ｄ（請(qǐng)?jiān)诜娇騼?nèi)打Ｖ），在年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于＾‘

5、＂不保密０（請(qǐng)?jiān)诜娇騼?nèi)巧Ｖ）。：作者簽名：日期年＾月日導(dǎo)師簽名：月５日：日期知／立年令＾摘要－亞砸酸化，在與本文！ｐ乳球蛋白為研究對(duì)象對(duì)其體外抗腫瘤活性進(jìn)行測(cè)定Ｋ５拍細(xì)胞共培養(yǎng)后，研巧其對(duì)Ｋ５６２細(xì)胞增殖的抑制作用和誘導(dǎo)調(diào)亡作用。通過(guò)ＭＴＴ法、、、ＨＥ染色、流式細(xì)胞術(shù)免疫焚光法和巧光定量ＰＣＲ等方法從細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化細(xì)胞周期的變化和相關(guān)周期蛋白及其ｍＲＮＡ的表達(dá)等方面考察了亞砸酸化Ｐ－乳球蛋白對(duì)Ｋ５６２細(xì)胞的影響。亞砸酸化－５６２細(xì)首先，對(duì)Ｐ乳球蛋白誘導(dǎo)Ｋ胞調(diào)亡的現(xiàn)象進(jìn)行研巧。ＭＴＴ實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明－乳球蛋白

6、對(duì)Ｋ５６２，隨著濃度和培養(yǎng)時(shí)間的升高，亞捆酸化Ｐ細(xì)胞的抑制作用逐漸變強(qiáng)ＺｍＬ藥物作用Ｋ５６２細(xì)胞４８ｈ后，抑制率達(dá)到９０％，而正常小鼠成，１００帖巧維細(xì)胞Ｃ２Ｃ１２在經(jīng)過(guò)相同處理后仍然正常生長(zhǎng)；ＨＥ染色和ＰＩ／Ｈｏｅｃｈ巧雙染均觀察－乳球蛋白使Ｋ５拍細(xì)胞出現(xiàn)體積縮小到亞砸酸化Ｐ、核質(zhì)分離、出現(xiàn)調(diào)亡小體等典型－ｍｅｘｎＶ－／的調(diào)ｔ現(xiàn)象；ＡｉｉｎＴＣＰＩ雙染結(jié)果表明，經(jīng)過(guò)４８ｈ與亞砸酸化Ｐ亂球蛋白巧培養(yǎng)的Ｋ５仿細(xì)胞的稠ｔ率為１８．７５％，而共培養(yǎng)７２ｈ后調(diào)亡率上升為４０．７６％；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明亞砸酸化－孔球蛋白能夠使

7、細(xì)胞ＧＰｉ期和〇２期發(fā)生顯著變化，細(xì)胞分別被阻滯于Ｓ一Ｇ２期和Ｇ２＾Ｍ期。－５６２其次，研究了亞砸酸化Ｐ乳球蛋白誘導(dǎo)Ｋ細(xì)胞調(diào)亡的信號(hào)途徑。免疫巧光實(shí)－５６２驗(yàn)和ＥＬＩＳＡ法共同確定了經(jīng)過(guò)亞砸酸化Ｐ乳球蛋白處理的Ｋ細(xì)胞，其巧ｃｌｉｎＢｌ亞灑酸化－蛋白含量濕著降低，２１蛋白含量顯著上升現(xiàn)球蛋白還使Ｋ５６２細(xì)胞的ｐ；ＰｃｙｃｌｉｎＢｌｍＲＮＡ７ｊＣ平下調(diào)，極顯著上調(diào)ｐ２１ｍＲＮＡ７ｊＣ平，是對(duì)照組的２１倍，并且還顯著下調(diào)蛋白激酶ＣＤＫ４ｍＲＮＡ的表達(dá)水平。綜上所述－乳球蛋白能夠在體外有效的抑制白血病細(xì)胞Ｋ５拉的增殖，亞

8、砸酸化Ｐ一：并且誘導(dǎo)其調(diào)ｔ，是種很有潛力的抗癌活性物質(zhì)。－她出２１２１蛋白關(guān)鍵詞：亞砸酸化Ｐ乳球蛋白；Ｋ５６細(xì)胞；細(xì)胞調(diào)亡：巧；