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《具有毒死蜱降解特性的植物內(nèi)生菌的分離篩選》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類。一UDCm密級.禱碩±學(xué)位論文具有毒死婢降解特性的植物內(nèi)生菌的分離節(jié)選作者姓名:馮發(fā)運指導(dǎo)教師:余向陽妍究員陳安良教授學(xué)科專業(yè)名稱:森林保護(hù)學(xué)妍究方向:微生物學(xué)所在學(xué)院:林業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院論文提交日期:2015年6月浙江農(nóng)林大學(xué)〇—^五年六月?二I9ZhejiangA&FUniversityDissertationfortheDegreeofMasterIsolationandidentificationofPlantendophytescapa
2、bleofdegradingchlorpyrifosCandiadate:FengFayunAdviser:YuXiang-yang,ResearcherChenAn-liang,ProfessorSpeciality:MicrobiologyDateofSubmission:June6,2015ZhejiangA&FuniversityLin’an,zhejiangprovince,P.R.ChinaJune,2015獨創(chuàng)性聲明本人聲明,所呈交的學(xué)位論文,是在指導(dǎo)教師指導(dǎo)下,通過我的努力取得的成果,并且是自己撰寫的。盡我所知,除了文中
3、作了標(biāo)注和致謝中已經(jīng)作了答謝的地方外,論文中不包含其他人發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含在浙江林學(xué)院或其他教育機(jī)構(gòu)獲得學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同對本研究做出貢獻(xiàn)的同志,都在論文中作了明確的說明并表示了謝意。如被查有嚴(yán)重侵犯他人知識產(chǎn)權(quán)的行為,由本人承擔(dān)應(yīng)有的責(zé)任。學(xué)位論文作者親筆簽名:日期:論文使用授權(quán)的說明本人完全了解浙江林學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即學(xué)校有權(quán)送交論文的復(fù)印件,允許論文被查閱和借閱;學(xué)??梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。保密,在年后解密可適用本授權(quán)書?!醪槐C?本學(xué)
4、位論文屬于不保密?!酰ㄕ堅诜娇騼?nèi)打“√”)學(xué)位論文作者親筆簽名:日期:指導(dǎo)教師親筆簽名:日期:摘要毒死蜱作為替代高毒有機(jī)磷農(nóng)藥的主要品種,在我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用量大且范圍廣,對農(nóng)產(chǎn)品安全帶來極大的隱患。植物內(nèi)生菌是指一生或至少一生中的某個階段能進(jìn)入活體植物組織內(nèi),且不引起植物明顯病理變化的微生物。與從土壤中分離微生物相比,植物內(nèi)生菌能有效地在植物體內(nèi)定殖,且不易受外界環(huán)境的影響?;诖耍镁哂修r(nóng)藥降解特性的植物內(nèi)生菌加速農(nóng)作物體內(nèi)殘留農(nóng)藥的代謝與降解,有望成為控制農(nóng)藥大量使用帶來殘留污染風(fēng)險的新途徑。本研究分別以從農(nóng)藥廠廢液池旁采集的菊
5、科植物小飛蓬,以及韭菜和水稻為供試植物,采用表面消毒研磨法,以毒死蜱為單一碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基連續(xù)多代培養(yǎng)篩選毒死蜱降解內(nèi)生菌,并對其在植物體外與體內(nèi)的毒死蜱降解特性進(jìn)行分析,采用生理生化測定結(jié)合16SrDNA序列分析對分離的內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行菌種鑒定。為進(jìn)一步探索利用內(nèi)生菌調(diào)節(jié)植物體內(nèi)殘留毒死蜱等環(huán)境污染物的降解機(jī)理研究建立基礎(chǔ),研究結(jié)果可為利用植物內(nèi)生菌調(diào)控農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留提供理論指導(dǎo),為農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留污染控制與治理提供新的思路。主要研究結(jié)果如下:1、從植物小飛蓬體內(nèi)分離出一株阪崎克羅諾桿菌屬(Cronobactersp.)植物內(nèi)生細(xì)菌XFP
6、-gy,其對初始濃度為20mg/L的毒死蜱的9天降解率為77.28%。外加碳氮源可以促進(jìn)XFP-gy的生長,并將其對毒死蜱5天降解率由69.59%提高到98.0%。菌株XFP-gy降解毒死蜱的最佳培養(yǎng)條件為30℃和pH為7.0。此培養(yǎng)條件下,增加培養(yǎng)液中原始接菌量,降低底物毒死蜱的初始質(zhì)量濃度,可明顯提高XFP-gy對毒死蜱的降解效率。2、從韭菜體內(nèi)分離篩選出一株鞘氨醇單胞菌屬(Sphingomonassp.)植物內(nèi)生菌HJY,它在15天內(nèi)可以代謝95.88%初始濃度為20mg/L的毒死蜱;1%的外加葡萄糖可以將其對毒死蜱的降解率提高到
7、6天98.48%;其最適毒死蜱降解條件為:毒死蜱初始濃度10mg/L,接菌量2%,pH6,培養(yǎng)溫度30-35℃。3、從粳稻內(nèi)分離出5株具有毒死蜱降解特性的植物內(nèi)生菌:銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)DG,巨大芽孢桿菌(Bacillusmegaterium)IDGB,鞘氨醇桿菌(SphingobacteriumCanadense)DJ,彎曲假單胞菌(Pseudomonas)DJA和短小桿菌屬(Curtobacteriumplantarum)DJB。這些水稻內(nèi)生菌除了在體外對毒死蜱具有一定的降解能力外,還可以轉(zhuǎn)接入
8、粳稻內(nèi),通過產(chǎn)生吲哚乙酸(IAA)、溶解磷、產(chǎn)生氨基環(huán)丙烷羧酸(ACC)脫氨酶和載鐵蛋白促進(jìn)水稻植株的快速生長,并且加速水稻植株內(nèi),根部土壤中和稻谷內(nèi)的毒死蜱降解。關(guān)鍵詞:植物內(nèi)生菌;毒死蜱;生物降解;分離