石油降解菌的篩選及混合菌群對(duì)石油污染土壤的生物修復(fù)研究

石油降解菌的篩選及混合菌群對(duì)石油污染土壤的生物修復(fù)研究

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1、分類號(hào)XMI學(xué)號(hào)1203841364翁要達(dá)統(tǒng)新妓大#學(xué)像論文石油降解菌的篩選及混合菌群對(duì)石油污染土壤的生物修復(fù)研究作者王婷婷指導(dǎo)教師姓名吳蔓莉副教授申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)名稱環(huán)境工程論文提交日期2015.06論文答辯日期2015.05學(xué)位授予單位;要達(dá)統(tǒng)新技大#答辯委員會(huì)主席孫先鋒評(píng)閱人孫先鋒張崇淼聲明本人鄭重聲明我所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外,本論文不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含本人或其他人在其它單位己申請(qǐng)學(xué)位或?yàn)槠渌猛臼褂眠^的成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的所有貢獻(xiàn)均已

2、在論文中作了明確的說明并表示了致謝。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處,本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名:土為藥日期:2〇i^關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本人完全了解西安建筑科技大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱;學(xué)??梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,可以采用影印、縮印或者其它復(fù)制手段保存學(xué)位論文。(保密的論文在論文解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名曰期辟勿鉑本人授權(quán)中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)雜志社、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所等單位將本學(xué)位論文收錄到有關(guān)“學(xué)位論文數(shù)據(jù)庫”之中,并通過網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公

3、眾提供信息服務(wù)。因某種特殊原因需要延遲發(fā)布學(xué)位論文電子版,同意在□—年/ig(兩年/□三年以后,在網(wǎng)絡(luò)上全文發(fā)布。(此聲明處不勾選的,默認(rèn)為即時(shí)公開)論文作者簽名:ji#指導(dǎo)教師簽名:西安建筑科技大學(xué)碩士學(xué)位論文石油降解菌的篩選及混合菌群對(duì)石油污染土壤的生物修復(fù)研究專業(yè):環(huán)境工程碩士生:王婷婷指導(dǎo)老師:吳蔓莉副教授摘要石油作為一種重要的能源物質(zhì)在世界上被廣泛使用,在石油勘探、開發(fā)、運(yùn)輸及煉制過程中,石油會(huì)對(duì)油田附近的土壤及農(nóng)用耕地等造成嚴(yán)重的污染。在石油污染土壤治理技術(shù)中,微生物技術(shù)作為一種可靠的土壤污染修復(fù)技術(shù)。以其效果好、操作簡(jiǎn)單、費(fèi)用低、石油烴降解過程迅速、無二次污染等特點(diǎn),

4、逐漸成為石油污染土壤治理研究的一個(gè)重要領(lǐng)域。本論文以陜北地區(qū)石油污染土壤為石油烴降解菌菌源,分別以無機(jī)鹽、布氏哈斯培養(yǎng)基為初篩培養(yǎng)基,利用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基為復(fù)篩培養(yǎng)基,采用平板劃線法分離石油烴降解菌。利用16SrRNA序列分析法對(duì)篩選出的菌株進(jìn)行鑒定,并研究了菌株對(duì)不同烴類化合物的去除效果及菌株的生理生化性質(zhì);根據(jù)菌株對(duì)烴類的降解能力構(gòu)建混合菌體系,將構(gòu)建的混合菌投加到油污土壤中進(jìn)行修復(fù)實(shí)驗(yàn)研究。通過測(cè)定不同修復(fù)時(shí)期油污土壤中石油烴殘留量及石油烴降解率,土壤微生物數(shù)量,土壤過氧化氫酶、脫氫酶,土壤碳氮磷比變化以及石油烴不同組分變化,對(duì)影響修復(fù)效果的關(guān)鍵影響因素進(jìn)行了分析。通過研究

5、得出以下結(jié)論:從2種不同油污土壤中共篩選出17株石油降解菌,篩選出的細(xì)菌中,除1株為革蘭氏陽性菌外,其余均為革蘭氏陰性菌。16SrRNA序列分析結(jié)果表明,篩選出的細(xì)菌分屬于人蒼白桿菌、綠膿桿菌、梭形芽胞桿菌、假單胞菌、紡錘芽孢桿菌、不動(dòng)桿菌、無色產(chǎn)堿桿菌。17株菌中,綠膿桿菌SQ-2對(duì)石油烴降解效果最好,在水相中經(jīng)過14d的降解,對(duì)石油烴的降解率為73.82%。當(dāng)以綠膿桿菌SQ-2菌作為主要降解菌,與假單胞桿菌SQ-4和真菌SQ-Z2共同構(gòu)建混合菌群;以及以無色產(chǎn)堿桿菌T2作為主要降解菌,與2株假單胞桿菌T3、SQ-4共同構(gòu)建混合菌群時(shí),對(duì)石油烴降解效果較好,對(duì)水相石油烴7d的降解

6、率可以分別達(dá)到53.46%和45.67%。利用不同的處理方案對(duì)石油污染土壤進(jìn)行修復(fù)研究。結(jié)果表明,與自然狀態(tài)下的油污土壤相比,連續(xù)補(bǔ)充碳氮磷營養(yǎng)進(jìn)行生物刺激和投加混合菌群進(jìn)行生物西安建筑科技大學(xué)碩士學(xué)位論文強(qiáng)化均可對(duì)土壤中的石油烴起到降解作用。而連續(xù)補(bǔ)充氮磷營養(yǎng)液進(jìn)行生物刺激的修復(fù)效果最好。因此土壤C/N/P比是影響陜北地區(qū)石油污染土壤生物修復(fù)的主要因素。對(duì)土壤中石油烴降解菌的測(cè)定結(jié)果表明,生物刺激和生物強(qiáng)化作用可以使土壤中的石油烴降解菌和烷烴降解菌的數(shù)量增多,而且降解菌數(shù)量與石油烴降解率呈顯著相關(guān)。修復(fù)過程中碳數(shù)為C13-C30的飽和烴含量降低,其中含碳數(shù)C13的飽和烴可全部去除

7、,含碳數(shù)C14-C16的飽和烴的去除率較高,對(duì)于碳數(shù)高于17的飽和烴去除率相對(duì)較低。向修復(fù)延滯期土壤中添加C6H12O6和3%H2O2,均可促進(jìn)延滯期土壤石油烴殘留的進(jìn)一步降解。其中添加C6H12O6共代謝基質(zhì)對(duì)石油烴殘留的去除率達(dá)74.91%,優(yōu)于添加3%H2O2對(duì)石油烴化合物的氧化去除作用。關(guān)鍵詞:石油污染土壤;微生物修復(fù);混合菌群構(gòu)建;總石油烴;最大可能計(jì)數(shù)法西安建筑科技大學(xué)碩士學(xué)位論文Screeningofoilpetroleum-degradingstrai

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