豬源腸球菌的分離鑒定及其部分特性研究

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1、．＇Ｖ’．‘．＇．．．？．說(shuō)，考《＾＾違碩±學(xué)位論文豬源腸球菌的分窩鑒定及真部分特性研究■．．研究生姓名王送林指導(dǎo)教師黎滿香教授學(xué)科專(zhuān)化預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向病原分子生物學(xué)與免瘡學(xué)；．古．＇．Ｖ；．Ｖ．式．，＇’一．．二０．．．Ｖ；五年六月叫．．，Ｖ片片巧邊藤賺該議感兮霞－＾＞－：：？Ｉｎ：ｖＶｖ．＼ｙ．Ｘ分類(lèi)號(hào)Ｓ８５密級(jí)公開(kāi)ＵＤＣ１０５３７單位代碼蝴南泰典乂＃碩ｉ學(xué)位論

2、文豬源腸球菌的分離鑒定及其部分特性硏究Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｅａｒｃｈｏｆａｒｔｉａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｎｐｏｒｃｉｎｅｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉｐ研究生姓名王送林指導(dǎo)教師黎滿香教授學(xué)科專(zhuān)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向病原分子生物學(xué)與免疫學(xué)論文答辯日期２０１５年５月３１日答＾員會(huì)由蒂余興龍教授論文評(píng)閱人雷紅宇王昌建范仲蠢二０—五年六月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在指導(dǎo)老師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得，論文

3、中不包含的研究成果。盡我所知，除了文中特別加Ｗ標(biāo)注和致謝的地方外其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育一機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名：吏時(shí)間：興咬年６月日７關(guān)于論文使用授權(quán)的說(shuō)明目本人完全了解湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，Ｐ：學(xué)校有權(quán)、，可縮?。崳姳Ａ羲徒徽撐牡膹?fù)印件和電子稿，允許論文被查閱和借閱Ｗ采用影印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論

4、文。同意湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)可Ｗ用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，并同意將由此產(chǎn)生的收益捐贈(zèng)給學(xué)校教育基金會(huì)用于發(fā)展研究生教育。（保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議）研究生簽名：ｉ達(dá)布木時(shí)間；＞ｉｊｒ年（月日ｊ導(dǎo)師簽名；時(shí)間：年＾月曰ク摘要為了解豬源腸球菌分離株的耐藥特點(diǎn)及其毒力基因分布特征，為腸球菌感染疾病的治療防控提供依據(jù)，此次研究從湖南省部分豬場(chǎng)的健康豬腸道內(nèi)及患有流。行性腹瀉的病豬腸道內(nèi)分離腸球菌，并對(duì)分離菌株進(jìn)行耐藥性及毒

5、力基因檢測(cè)一１．本實(shí)驗(yàn)共分離腸球菌１１５株，其中糞腸球菌１１株，巧腸球菌巧株，其他腸球菌４５株。有７２株腸球茜（包含３０株尿腸球菌，２株糞腸球茜，４０株其他腸球菌）分離自四個(gè)豬場(chǎng)的健康豬群腸道內(nèi)；另外４３株腸球菌分離自流行性腹瀉病豬腸道內(nèi)，包括２９株尿腸球茜，９株糞腸球菌，５株其他腸球菌。２－．使用ＫＢ法檢測(cè)１１５株腸球茜的耐藥表型并通過(guò)ＰＣＲ方法檢測(cè)其耐藥基，因。結(jié)果顯示：健康豬源腦球菌對(duì)寓濃度慶大霉素最敏感為９３．０６％其次為替考拉寧和氯霉素，敏感率分別為８１．９４％和６

6、５．２８％。流行性腹瀉病豬中分離腸球＝菌對(duì)四環(huán)素、紅霉素、頭抱嗟吩這種抗生素完全不敏感，除糖狀類(lèi)抗生素和氨節(jié)西林外，對(duì)其它幾種藥物的敏感率均低于健康豬源腸球菌的敏感率。分離的１１５株腸球菌多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，有９８．３％的腸球菌對(duì)１４種抗生素呈Ｈ重或Ｈ重Ｌ：Ｊｌ上的耐藥，比較分析湖南健康豬源與ＰＥＤＶ豬源腸球菌的多重耐藥情況，發(fā)現(xiàn)ＰＥＤＶ豬源腸球菌比健康豬源的腸球菌呈更多重耐藥的菌株數(shù)比健康豬源的腸球菌多，。所有的糞腸球菌為六重及六重＾上的耐藥多重耐藥最為嚴(yán)重。本次１對(duì)腸球

7、菌的耐藥性進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，豬源腸球菌已對(duì)多種抗生素耐藥，尤其是對(duì)四環(huán)素和紅霉素，。各耐藥基因的檢出率分別為ｔｅｔＭ（６９幾乎是全部耐藥．６％）、＂｜｜〇〇－ＡａｃＶａ（ａｈ－Ｉ（、ａｎｔ６（６０〇）、ｅｒｍＢ（％２於．／〇、６ｐｈ２．６％）、ｐ３ＩＩ７０．４％）Ｉ／）（）（）（）（）ｍｅｆＡ（０．９％）、ＶａｎＢ（０．９％），ＶａｎＡ和ＶａｎＣ基因未檢測(cè)到。通過(guò)耐藥基因型與一耐藥表型比較分析，發(fā)現(xiàn)腸球菌耐藥表型與耐藥基因并不完全致。３．５總共檢出９采用ＰＣ民方法對(duì)

8、分離的Ｈ株腸球菌的毒力基因進(jìn)行檢測(cè)，ｌＦ０１４種毒力基因，分別是巧１Ａ、ａｃｅ、ｅｓ、ｈｌ、ａｓａ、ｅｆａＡ、ｅ舊、Ｅ５９、ＥＦ３３１。ｐｙｇ研究結(jié)果表明健康豬腸道內(nèi)分離的７２株腸球菌也含有毒力因子，但其存在量較低，各基因的檢出率低于１６％。四個(gè)豬場(chǎng)毒力基因的檢出率有較大差異，豬場(chǎng)Ｃ，豬場(chǎng)Ｂ未檢測(cè)到帶有毒力基因的菌株的毒力基因檢測(cè)率最高，這可能與養(yǎng)殖場(chǎng)的飼養(yǎng)管理相關(guān)或腸球菌的毒為基因在地域與地域之間存在差異。通過(guò)健康豬源腸球菌與流行性腹瀉病豬分離