烏飯樹葉中黃酮等有效成分分析及抗腫瘤作用研究

烏飯樹葉中黃酮等有效成分分析及抗腫瘤作用研究

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1、福建農(nóng)林大學博士學位論文烏飯樹葉中黃酮等有效成分分析及抗腫瘤作用研究姓名:余清申請學位級別:博士專業(yè):農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程指導教師:陳紹軍20080401福建農(nóng)林大學博士學位論文鳥飯樹葉中黃酮等有效成分分析及抗腫瘤作用研究提取物中還含有8.82%的單寧。所采用的提取溫度(61℃)對乙醇提取物中黃酮類成分——槲皮素沒有影響,較高提取溫度(70℃)對槲皮素有破壞作用。3.采用單因素及正交試驗尋找超臨界C02萃取烏飯樹葉黃酮的最佳條件,首次探討了夾帶劑、夾帶劑濃度及用量對烏飯樹葉黃酮提取量的影響,并對比超

2、臨界萃取法與有機溶劑浸漬法的黃酮提取率及提取物的成分。試驗結(jié)果表明,最佳的超臨界C02提取條件為:萃取壓力16MPa,萃取時間1.5h,萃取溫度50℃,夾帶劑乙醇濃度75%,C02流量20kg/h,夾帶劑添加量5mL/g。將夾帶劑添加到烏飯樹葉的超臨界C02萃取中,在一定程度上提高了黃酮的提取量,但并沒有將大部分的黃酮都提取出來。HPLC分析表明超臨界萃取法較有機溶劑浸提法可以提取更多的化學成分,但黃酮提取率與有機溶劑浸提法相比還差1l%左右。4.以烏飯樹葉乙醇提取物(主要含黃酮類化合物)進行小鼠急

3、性毒性試驗。研究結(jié)果表明,采用DASverl.0Bliss法計算出的烏飯樹葉乙醇提取物的LD50為39.19/1cg,其95%n-7信限為36.8---41.69/kg,未見急性毒副作用,該提取物臨床應用安全。5.以環(huán)磷酰胺(CTX)為陽性對照組,以生理鹽水為陰性對照組,觀察各劑量乙醇提取物對實體瘤(U14)和腹水癌(S180)的抑制作用。結(jié)果表明,高劑量的乙醇提取物能顯著抑制小鼠宮頸癌細胞株(U14)的生長(p<0.05),抑制率達28.76%,而中、低劑量的乙醇提取物對小鼠宮頸癌細胞株(U14)

4、7沒有抑制作用。高、中和低劑量的乙醇提取物均不能抑制小鼠腹水癌(S180)的生長。6.采用近年來備受關注的高速逆流色譜分離技術(shù)實現(xiàn)烏飯樹葉乙醇提取物有效成分的分離純化,并結(jié)合高效液相色譜技術(shù)鑒定分離物——槲皮素及其純度。結(jié)果表明,經(jīng)過薄層色譜初篩后得到氯仿.甲醇.水(4:3:2)和氯仿.甲醇.正丁醇一水(5:l:3:1)兩個溶劑系統(tǒng)。氯仿.甲醇.水(4:3:2)溶劑系統(tǒng)對乙醇提取物分離效果較好,得到的餾分A的紫外.可見吸收光譜圖與槲皮素標準品的相似,通過面積歸一法計算其純度達98.3%,而采用氯仿.

5、甲醇.正丁醇一水(5:1:3:1)溶劑系統(tǒng),收集得到餾分A屬于混合物質(zhì),經(jīng)高效液相色譜分離,得到兩個主要成分l、2,其中含量較大的成分1與標準譜圖對照,也證明是黃酮類物質(zhì)——蝌皮素。關鍵詞:烏飯樹葉;黃酮;超臨界C02萃??;抗腫瘤;高速逆流色譜AbstractVacciniumbracteatumThunb.ismedicinalplant,whichisofVaccinium(Erioaoeae).Effectivecomponentsofitsleaveshavebeenappliedinfoo

6、dadditionandeye—diseasemedicineabroad,TCMholdsthat,blackrice,whichismadeofthejuiceofVacciniumbracteatumThunb.1eavesandglutinousrice,hasseveralfunctions,includinglight-body,bright-eyes,black—hair,good-face,andlong’life.Thisresearchfocusedonanalysisoffla

7、vonoidsandothereffectivecomponentsinVacciniumbracteatumThunb.1eavesanditsfunctionofanti-tumor.Theeffectsofdifferentdryingmethodsonappearancequality,effectiveandnutritionalcomponentswerecontrasted,theconditionsbasedonRSMforextractingflavonoidsfromVaccin

8、izlmbracteatumThunb.1eaveswereoptimized,extractionconditionsofflavonoidsfromleaveswithSC.C02weresought,acutetoxicitytestandfunctioriofanti.tumorofethanolextractwerestudied,andtheanti—tumoractivecomponent——-quercetinbycombiningHSCCCandHP

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