靈芝多糖對糖尿病大鼠腎組織TGFβ1和COⅣ表達的影響

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1、靈芝多糖對糖尿病大鼠腎組織TGF-β1和CO-Ⅳ表達的影響作者:毛春譜,李小毅,張紅梅,林桂芬,李偉【摘要】目的觀察轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)及Ⅳ型膠原(CO-Ⅳ)在糖尿病大鼠腎組織中的表達及靈芝多糖干預(yù)后的影響。方法腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)大鼠造成糖尿病模型,分組予不同劑量靈芝多糖(GLP)進行治療性灌胃。8周后,用免疫組化方法和RT-PCR方法檢測各組大鼠腎皮質(zhì)TGF-β1、CO-Ⅳ的蛋白和mRNA表達。結(jié)果糖尿病組大鼠腎小球TGF-β1、CO-Ⅳ蛋白和mRNA表達較正常對照組明顯升高(P<0.01);靈芝多糖各

2、組較糖尿病組表達降低(P<0.01)。結(jié)論靈芝多糖可能通過下調(diào)糖尿病大鼠腎臟中TGF-β1和CO-Ⅳ的表達,減少細胞外基質(zhì)積聚,起到對糖尿病大鼠腎臟保護作用?!娟P(guān)鍵詞】靈芝多糖;糖尿病腎?。晦D(zhuǎn)化生長因子β1;Ⅳ型膠原  Abstract:ObjectiveToinvestigatetheexpressionsoftransforminggrowthfactor-Beta1(TGF-β1)andtypeⅣcollagen(CO-Ⅳ)inthekidneyofdiabeticratsandtheeffectsofGanodermalu

3、cidumpolysaccharides(GLP)onsuchchanges.MethodsDiabeticratmodelwasinducedby10streptozocin(60mg/kg)andtheratsweredividedinto5groupsrandomlyandtreatedwithdifferentdoseGLP.8weekslater,theexpressionofTGF-β1andCO-ⅣinkidneytissuewasdeterminedbyimmunohistochemistryandRT-PCRme

4、thods.ResultsComparedwithgroupC,theexpressionsofproteinandmRNATGF-β1、CO-Ⅳsignificantlyincreasedinglomeruli(P<0.01).Theabnormalexpressionsoftheseproteins、mRNAweredramaticallyimprovedindiabeticratsbyGLPtreatment(P<0.01).ConclusionGLPhassomerenalprotectiveeffectondiabeti

5、crats,throughinhibitionofexcessivedepositionofglomeruliextracellularmatrixbyinhibitingtheexpressionofTGF-β1anddecreasingthesynthesisofCO-Ⅳ.  Keywords:Ganodermalucidumpolysaccharides;Diabeticnephropathy;Transforminggrowthfactor-β1;TypeⅣcollagen  隨著人們生活水平的提高和人口的老齡化,糖尿病的

6、發(fā)病率逐年升高。糖尿病腎?。╠iabeticnephropathy,DN)是糖尿病最重要的慢性微血管并發(fā)癥之一,也是糖尿病主要的死亡原因之一。目前,單純西藥尚不能有效阻止糖尿病腎損害的自然進程,靈芝是擔(dān)子菌綱多孔菌科靈芝屬真菌,為滋補強壯,扶正固本的珍品,它的有效成分非常豐富,主要有靈芝多糖(Ganodermalucidumpolys10accharides,GLP)、三萜類化合物、靈芝酸、腺苷等,其中GLP是最有效的活性成分之一。靈芝的藥理活性大多和GLP有關(guān),其具有廣泛的藥理活性[1],能提高機體免疫力,提高機體耐缺氧能力,消

7、除自由基,抗氧化[2],抗輻射和降低血脂[3]等作用,但對DN的作用報道很少。本研究采用免疫組化和RT-PCR方法觀察靈芝多糖不同劑量組對糖尿病大鼠腎組織的轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)和Ⅳ型膠原(typeⅣcollagen,CO-Ⅳ)的表達變化,旨在探討GLP對DN的保護機制[4~10]?! ?材料與儀器    清潔級雄性SD大鼠50只,體質(zhì)量180~220g(徐州醫(yī)學(xué)院實驗動物中心)。STZ(美國Sigma公司),靈芝多糖(河北保定施達科生物工程技術(shù)有限公司,批號:RM

8、051215)。一抗分別為兔抗大鼠TGF-β1、CO-Ⅳ抗體、SP-6001試劑盒及DAB試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司),TotalRNA提取試劑、RT-PCR試劑盒(大連寶生物有限公司)。LEICAQwin圖像處理與分析系統(tǒng)(德國),羅氏

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