泡桐體細(xì)胞胚胎發(fā)生及植株再生研究

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1、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文泡桐體細(xì)胞胚胎發(fā)生及植株再生研究姓名：馬新業(yè)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：森林培育指導(dǎo)教師：范國(guó)強(qiáng);黎明20030601致謝本論文是在導(dǎo)師范國(guó)強(qiáng)教授和黎明副教授的悉心指導(dǎo)下完成的。從論文選題、方案設(shè)計(jì)到論文結(jié)構(gòu)和語言的修繕，無不傾注著兩位導(dǎo)師的心血和汗水。兩位導(dǎo)師淵博的學(xué)識(shí)、精益求精的治學(xué)態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、高度的敬業(yè)精神和謙虛禮讓的高尚品格，給了我很多啟示和教誨。三年來，兩位導(dǎo)師無私地傳授給我學(xué)科知識(shí)和實(shí)驗(yàn)技能，極大地改進(jìn)了我的思想方法和豐富了我的社會(huì)經(jīng)驗(yàn)，生活和經(jīng)濟(jì)等各方面也給了我無微不至的關(guān)懷和支持。所有

2、這一切我將銘記終生，在此我謹(jǐn)致以我最衷心的感謝!我要感謝森林培育學(xué)科導(dǎo)師組老tJ幣,ff]，林學(xué)園藝學(xué)院老師們多年來對(duì)我的辛勤培養(yǎng)，感謝研究生處、校省級(jí)重點(diǎn)學(xué)科實(shí)驗(yàn)室老師們?nèi)陙韺?duì)我的幫助和指導(dǎo)。我要感謝學(xué)姐翟曉巧博士，由于她辛苦的前期工作才使該研究課題得以在短期內(nèi)順利進(jìn)行；感謝學(xué)姐賀窯青、馮志敏，學(xué)弟李鋒，學(xué)妹楊曉娟及實(shí)驗(yàn)室其他人員，是他們的大力協(xié)助才使我圓滿完成實(shí)驗(yàn)任務(wù)；感謝室友，是他們真摯的友誼伴我度過三年美好時(shí)光。我要感謝親人，他們的愛是我勇往直前的不竭動(dòng)力。在此論文完成之際，再一次衷心感謝所有關(guān)心、支持、幫助我的領(lǐng)導(dǎo)、老

3、師、同學(xué)、朋友和親人!!馬新業(yè)2003，06于鄭州摘要泡桐是一種深受廣大群眾喜愛的速生用材樹種，具有生長(zhǎng)快、材質(zhì)優(yōu)良等特點(diǎn)，但其叢枝病和大冠低干等問題長(zhǎng)期以來一直困擾著泡桐的進(jìn)一步發(fā)展。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的興起，基因工程和細(xì)胞工程為解決泡桐的這些問題提供了有效的方法和途徑。離體植株再生研究是植物現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)具體運(yùn)用的重要基礎(chǔ)。在植株再生的兩種方式中，體細(xì)胞胚胎發(fā)生方式具有更大的優(yōu)越性，它不僅可以作為細(xì)胞分化、形態(tài)發(fā)生等問題研究的理想體系，而且也是人工種子研制等的必要條件。泡桐體細(xì)胞胚胎發(fā)生及植株再生體系的建立將為開展泡桐基因工程和細(xì)

4、胞工程研究和培育泡桐新品種等工作奠定基礎(chǔ)。本文通過對(duì)蘭考泡桐、白花泡桐和毛泡桐無菌苗葉片和莖段體細(xì)胞胚胎發(fā)生及植株再生的研究，得出如下結(jié)果：I．三種泡桐不同外植體細(xì)胞胚胎性愈傷組織的最適培養(yǎng)基分別為：蘭考泡桐葉片為MS+O．3NAA+8BA，莖段為MS+O．3NAA+IIBA；白花泡桐葉片為MS+O．3NAA+8BA，莖段為MS+O．3NAA+14BA；毛泡桐葉片和莖段都是MS+O．3NAA+17BA。2．作為白花泡桐和毛泡桐雜交種的蘭考泡桐在葉片和莖段胚性愈傷組織誘導(dǎo)條件敏感性等方面分別與毛泡桐葉片、白花泡桐莖段具有相似性；在體

5、細(xì)胞胚胎發(fā)生規(guī)律等方面存在一定的差異。3．不同種泡桐體細(xì)胞胚胎發(fā)生經(jīng)歷早期原胚、球形胚、心形胚和魚雷胚等階段最終達(dá)到成熟子葉胚。在實(shí)驗(yàn)條件下，泡桐體細(xì)胞胚胎發(fā)生以間接方式為主，其胚性愈傷誘導(dǎo)、各階段體細(xì)胞胚胎發(fā)生以至體細(xì)胞胚胎成熟和正常轉(zhuǎn)換均在同一培養(yǎng)基同一培養(yǎng)條件下出現(xiàn)。關(guān)鍵詞：泡桐愈傷組織體細(xì)胞胚胎發(fā)生再生植株{文獻(xiàn)綜述1．1植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生概況與意義20世紀(jì)初，德國(guó)Haberlandt所作植物細(xì)胞全能性的科學(xué)預(yù)言為隨后興起的檬物組織培養(yǎng)技術(shù)奠定了理論基礎(chǔ)。關(guān)于離體細(xì)胞全能性的表達(dá)方式，在很長(zhǎng)一段辯闐濾人們郝談為器密發(fā)生是其

6、唯一靜途徑。1958年，Steward等和Reinert同時(shí)在胡蘿卜根組織單細(xì)胞=褥=浮培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)某然體細(xì)胞能轉(zhuǎn)變?yōu)樾螒B(tài)和發(fā)育過程都與合子胚相似的體細(xì)胞胚駘(即缽纓您胚胎)，并豳此彤殘了再生擅株。隨著壓來愈采愈多其他植物組織培養(yǎng)研究中類龜鬟現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)，人們開始逐漸談識(shí)劐俸細(xì)簏胚胎發(fā)生是植物離體培養(yǎng)再生植株的又一基本途徑。體細(xì)胞胚胎發(fā)生是在離體條件下植物體細(xì)胞通過與合子胚類似的發(fā)育途徑形姨耨個(gè)體鮑過程，與器官發(fā)生捆魄，體纓跑涯駘發(fā)生具有數(shù)量多、速度快、結(jié)構(gòu)完整、薦生率高等優(yōu)點(diǎn)。體細(xì)胞胚胎超源予菲合子細(xì)胞，燒組織器官和細(xì)胞培養(yǎng)的產(chǎn)物，

7、媳有胚根、胚軸、胚芽的完整兩極燃結(jié)構(gòu)，與外植體的維管無組織聯(lián)系，既不同于自然界中的鼓合窩纛融合疆，也不嗣予綴織培養(yǎng)孛的不怒芽秘不定攝。作為20毽紀(jì)后期植物組織培養(yǎng)中的一個(gè)重大發(fā)現(xiàn)和突破，體細(xì)胞胚胎在綴多領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用。(1)為植物細(xì)胞分化、全能性表達(dá)過襁及其機(jī)理等理論問題磺究提供了理想的實(shí)驗(yàn)體系(郭仲琛等，1990)；(2)為人工釋子磷裁及其應(yīng)建提供了必要條鋅(李鰹慶，t990)；(3)為辯覆資源保存和生物多樣性保護(hù)問題提供了新的諗徑；(4)為基因工程和細(xì)胞工程操作及新品種培育奠定了基礎(chǔ)；(5)為原生質(zhì)游離及其植株再生奠等怒

8、了基礎(chǔ)(王吉之鐮，1998)。此外，體細(xì)胞胚胎發(fā)生技術(shù)還在病毒脫除、體纓麓融合秘不闞倍往植撩誘警培募等諸多方囂均有廣闊的應(yīng)用前景。研究植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生不僅具有重大的理論意義，而且具有重大的實(shí)踐價(jià)值。迄今為止，對(duì)體細(xì)胞胚胎的研究也全部是圍繞這兩個(gè)方