自體軟骨細胞和骨髓基質(zhì)細胞修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的對比研究

自體軟骨細胞和骨髓基質(zhì)細胞修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的對比研究

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自體軟骨細胞和骨髓基質(zhì)細胞修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的對比研究_第1頁
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1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文自體軟骨細胞和骨髓基質(zhì)細胞修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的對比研究姓名:秦驥申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):骨科指導(dǎo)教師:蔡道章2003.5.28自體軟骨細胞和骨髓基質(zhì)細胞修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的對比研究中文奠要自體軟骨細胞和骨髓基質(zhì)細胞對關(guān)節(jié)軟骨缺損修復(fù)的對比研究中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院骨科研究生:秦驥導(dǎo)師:蔡道章教授摘要I瑚;縛日的l關(guān)節(jié)軟骨損傷是常見病,由于關(guān)節(jié)軟骨自身修復(fù)能力有限,大面\y’積缺損僅有局部內(nèi)向性生長等修復(fù)表現(xiàn),創(chuàng)面不能愈合,而關(guān)節(jié)軟骨損傷得不到及時有效得修復(fù),關(guān)節(jié)將不可避免地發(fā)生骨關(guān)節(jié)炎,影響患者的生活質(zhì)量,嚴(yán)重者使關(guān)節(jié)喪失功能,因此

2、,促進關(guān)節(jié)軟骨損傷修復(fù)已成為國內(nèi)外研究地?zé)狳c。有些方法己應(yīng)用于臨床,但是臨床效果不佳。組織工程的發(fā)展為關(guān)節(jié)軟骨的修復(fù)帶來了額的希望。許多學(xué)者對構(gòu)建組織工程化軟骨的種子細胞、生物支架材料和生物物理環(huán)境進行了大量的研究,取得了一定的成果,但至今尚未找到構(gòu)建關(guān)節(jié)軟骨的理想方法,就種子細胞而言,目前常用的有骨髓基質(zhì)細胞和軟骨細胞,據(jù)文獻報道兩種細胞各有優(yōu)缺點,但哪種細胞更具優(yōu)勢尚待研究,為此,我們對兩種細胞進行對比研究,為種子細胞的合理選擇提供依據(jù)。f》粼蠢《I《瓣用24只月齡為4.6個月的新西蘭大白兔作為實驗對象,隨機分兩組,一組作為骨髓基質(zhì)細胞實驗組

3、12只,另一組作為軟骨細胞實驗組12只。先取軟骨細胞和骨髓基質(zhì)細胞進行體外培養(yǎng)擴增,獲取足夠數(shù)量的細胞,種植到I型膠原海綿上立體培養(yǎng)2周后,經(jīng)病理切片證實細胞生長良好,分布均勻后,再把細胞和I型膠原海綿復(fù)合體移植到自體新西蘭大白兔一側(cè)膝關(guān)節(jié)股骨下段的軟骨滑車上,另一側(cè)關(guān)節(jié)作空白和純I型膠原海綿對照組。這樣,24只新西蘭大白兔膝關(guān)節(jié)最終形成4個觀察組:(1)、空白對照組:24個。(2)、I型膠原海綿對照自體軟骨細胞和骨髓基質(zhì)細胞修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的對比研究中文奠要組:24個。(3)、軟骨細胞I型膠原海綿復(fù)合體實驗組:24個。(4)、骨髓基質(zhì)細胞I型膠

4、原海綿復(fù)合體實驗組24個。分別于一個月、兩個月、三個月處死,在觀察期間內(nèi),注意觀察關(guān)節(jié)活動度,關(guān)節(jié)液及關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)情況,并對修復(fù)組織作病理切片HE染色和組織化學(xué)法染色,對第三個月標(biāo)本電鏡觀察,來確定修復(fù)組織是否是透明關(guān)節(jié)軟骨,組織學(xué)評分以及統(tǒng)計學(xué)分析進一步量化修復(fù)組織的性質(zhì)。結(jié)果:il、關(guān)節(jié)活動度:除一例有關(guān)節(jié)腔內(nèi)粘連外,其余得到觀察的關(guān)節(jié)活動不受限制,運動自如。看不出明顯差別,可能與兔子活動姿勢有關(guān)。2、關(guān)節(jié)液:關(guān)節(jié)軟骨缺損被修復(fù)的關(guān)節(jié)液量少、粘稠,透明,為正常關(guān)節(jié)液;有缺損存在的關(guān)節(jié)腔內(nèi)關(guān)節(jié)液較多,稀薄、少許血性,但無明顯積液,可能因為兔子此

5、處的關(guān)節(jié)軟骨為非負(fù)重區(qū)的緣故吧。3、相比之下,骨髓基質(zhì)細胞獲取更容易,創(chuàng)傷小,成活機會大;而軟骨細胞創(chuàng)傷較大,還需要一個消化過程,過程比較復(fù)雜;兩種子細胞在體外擴增速度快,都比較容易成活,都能滿足組織工程的需要。4、I型膠原海綿具有良好組織相容性,是一個比較理想的天然細胞載體,骨髓基質(zhì)細胞與I型膠原海綿組織相容性好,軟骨細胞比骨髓基質(zhì)細胞更好,可能因為軟骨細胞本來生存環(huán)境為膠原緣故吧。5、空白和I型膠原海綿對照組沒有完成關(guān)節(jié)軟骨修復(fù),而骨髓基質(zhì)細胞和軟骨細胞實驗組都得到修復(fù),一個月后標(biāo)本見骨髓基質(zhì)細胞組修復(fù)較慢,軟骨細胞修復(fù)組較好;二個月后標(biāo)本大

6、體所見無差別,甲苯胺蘭異染程度可見軟骨細胞稍比骨髓基質(zhì)細胞組好,三個月后看不出差別,但與正常關(guān)節(jié)軟骨相比仍有區(qū)別,也就是說聲觀察期間內(nèi)沒有達到完全修復(fù),但兩種修復(fù)方法對關(guān)節(jié)軟骨都能達到修復(fù)的目的,兩者無根本差別。第三個月標(biāo)本見修復(fù)組織是透明軟骨。6、電鏡結(jié)果顯示:第三個月的修復(fù)組織無論是細胞還是基質(zhì),都符合透明關(guān)節(jié)軟骨的生物學(xué)特性。兩實驗組之間無顯著差異。j繕鹺鶼自體軟骨細胞和骨髓基質(zhì)細胞修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的對比研究rp文冀要1、骨髓基質(zhì)細胞獲取比軟骨細胞更容易,兩者都有很強的體外擴增能力,都能在I型膠原海綿內(nèi)很好生長,相比之下,軟骨細胞更好;I型

7、膠原海綿具有良好組織相容性,是一個比較理想天然細胞載體。2、兩實驗組在第一個月內(nèi)的修復(fù)組織有差異,二、三個月標(biāo)本上無明顯區(qū)別,兩者都能達到修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨的效果,從第三個月標(biāo)本電鏡結(jié)果顯示:修復(fù)組織為透明軟骨,兩者差異不明顯,與正常軟骨差別不明顯。修復(fù)后關(guān)節(jié)恢復(fù)正常功能,未修復(fù)的關(guān)節(jié)有少量血性關(guān)節(jié)積液。關(guān)鍵詞:自做軟骨細胞j骨髓基質(zhì)細胞j關(guān)節(jié)軟骨j修毀對}‰皂堡墼量塑絲塑量塑莖墮塑墮堡堡莖羔墼量堡塑塑型些塹壅墓塞塑墨ContrastStudyofCulturedAutologousChondroeytesandBoneMarrowStromalCel

8、lsonRepairofChondralDefectsPostgraduate?QinJiSupervisor:ProfCaiDaozh

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