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《胎兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在體外向軟骨組織分化的探討》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文胎兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在體外向軟骨組織分化的探討姓名：洪嵩申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：骨外科指導(dǎo)教師：廖文波2003.5.15胎兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在體外向軟骨組織分化的探討研究生洪嵩導(dǎo)師廖文波摘要目的探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenehymalstemeells,MSCs)無支架條件下在體外向軟骨組織定向分化的條件。方法取引產(chǎn)胎兒骨髓懸液，經(jīng)Percoll密度梯度離心，獲取單個(gè)核細(xì)胞，細(xì)胞貼壁、擴(kuò)增后，再以高糖DMEM(TGF邛15ng／m1)進(jìn)行成軟骨細(xì)胞預(yù)誘導(dǎo)，4．7天后獲得成纖維樣單層
2、貼壁的MSCs。以此MSCs為種子細(xì)胞，2x106個(gè)細(xì)胞離心成團(tuán)，在TGF—Dl與IGF．I及其它輔助成分的協(xié)同作用下，體外培養(yǎng)3周后形成組織團(tuán)塊。經(jīng)固定、包埋、切片后行甲苯氨藍(lán)染色，免疫組化方法測(cè)定特異性Ⅱ型膠原。通過圖象分析軟件檢測(cè)組織塊蛋白多糖和Ⅱ型膠原表達(dá)強(qiáng)度，并與胎幾正常軟骨比較。結(jié)果胎幾骨髓單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)過預(yù)誘導(dǎo)，細(xì)胞表達(dá)特異性Ⅱ型膠原，甲苯氨藍(lán)染色藍(lán)染明爨增強(qiáng)；孬經(jīng)離心威鬻、體外誘導(dǎo)培養(yǎng)囂澎藏有斃澤軟骨群緞家塊，其甲苯氨蘸染色爨藍(lán)縶，特異性II型膠愿戈豳性表達(dá)，隧黎分析表明其蛋由多糖及Ⅱ型膠原表
3、達(dá)強(qiáng)度與胎兒正常軟骨相似。結(jié)論胎幾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)商糖DMEM預(yù)誘導(dǎo)后可向軟骨翻簏分托；離心戒霾蓐，在TGF。§1與IGF-I及英它驤黯殘分瓣協(xié)慝作用下具有形成類軟骨組織的能力，本實(shí)驗(yàn)建立酶定向誘導(dǎo)培養(yǎng)系統(tǒng)在無支架條件下可使MSCs向軟骨樣組織分化。莢鍵詞：骨髓嗣一充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞培養(yǎng)生長(zhǎng)日子??申鼙法分類號(hào)：R329。2交藏標(biāo)談霹：Theexplorationofchondrocyticdifferentiationofmesenchymalstemceilswithoutscaffoldinvirt
4、l"OHONGSon91,ANRong-ze2,LIAOWen-b03(1，2，3Departmentoforthopedics，zunyimedicalcollege,zunyi563003，China)Abstracts：ObjectiveToexplorethecultureconditionsthatchondrocyticdifferentiationofmesencchymalstemcellsinvirtro。Methods翟睦＆媾CSWereisolatedfromthenucleatedc
5、ellsfi'aetionofhumanembryonicmarrowwashingfluidbydensitygradientcentrifuge．AndthentheMSCswereinducedinto5choMroeytebyTGF-露l,dexamethascme,t0％FBSin瓣蘸鬈iuDMEMafteri焱thlcultureof10daysinlow霉娘DMEMJm'fialMSCsweretrypsinized，countedandcentrifugedto鑫smallpelletina
6、15mlpolypropylenetube；ThepeUetM螄inducedintochondrocytictissue鼯limitedculWxeconditionsinvirtro．ResultsThehistologicalobservationofthecartilage-liketissueshowedpositivestainingoftduidinebluein3weeks。TheexpressionofthetypeIIcollagenWaSpos?itiv～etoo。TheseW翻t'e
7、s'mailartonatxn'aA猻揪磊蕊embryonicarticularcartilage。ConclusionsMSCse巍疆beusedasfunctionalcellstoconstructtissueengineeredcartilage。Theculturesystemcouldbeused埝induceMSCstocartilage-liketissuewithoutscaffoldmatexiaL[Keywords]MesenehymalstemcellsCaailageCulture
8、Growthfhetor警前言關(guān)節(jié)疾惠在臨床上十分多覓，冀中籀辮六一鄣分是由于各種擦霞產(chǎn)生翡關(guān)節(jié)鼓臀破棼所致。關(guān)節(jié)軟骨一旦摟饞，簿潑修復(fù)，目前臨床常用的治療方法僅能對(duì)癥處理、緩解拄狀、組織工程學(xué)家一直致力予用組織工程化軟骨修復(fù)病損關(guān)節(jié)軟骨Ⅲ。近年來，囂髓閩充質(zhì)子麴胞鑫英強(qiáng)大酶騫我更新、多囪分億能力靄被篇徽鰓織王程化較囂的釋子細(xì)胞瞄^7，8，9l，囂建囊一辣較好酶誘導(dǎo)培棼體系對(duì)于形成組織工程化軟骨是至關(guān)重要的。以往
