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《膽紅素腦病神經(jīng)細(xì)胞凋亡機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文膽紅素腦病神經(jīng)細(xì)胞凋亡機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究姓名:田巧紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):兒科學(xué)指導(dǎo)教師:徐天鶴2003.5.10重慶醫(yī)科大學(xué)碩十學(xué)位論文英文縮寫A正Anne)(inVAPApaf-IBaxBcl-2CaspaseFCMHENhIDAPBSPCDPIPODPSSABCTUNEL符號(hào)說明英文全文apoptosis—inducingfactorapoptosisapoptoticproteaseactivatingfactor-1BclAssociateXProteinB—celllymphoma-2cyst
2、einylaspaxtatespecieproteaseflowcytometryHcznotoxylinandEosinStainingN-methyl-D-aspartatePhosphateBufferedSalineProgrammedCellDeathPropidiumIodideperoxidasephosphatidylserineStrept--Avidin--BiotinComplexterminaldeoxynucleotidyl11ansferasemediateddUTPnickendlabeling中
3、文名稱凋亡誘導(dǎo)因子膜聯(lián)蛋白V凋亡凋亡蛋白酶活化因子-1Bcl相關(guān)X蛋白B細(xì)胞淋巴瘤-2天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶流式細(xì)胞儀蘇木素一伊紅染色N一甲基-D一天冬氨酸磷酸鹽緩沖的生理鹽水程序性細(xì)胞死亡碘化丙啶過氧化物酶磷脂酰絲氨酸鏈霉親和素一生物素一酶復(fù)合物脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記法鬟慶鞋科夫?qū)W磷l=學(xué)梗論文服紅素腦病神經(jīng)細(xì)胞潤(rùn)亡機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究摘要目的:裙步探討新生豚鼠經(jīng)小腦延髓池注射艟紅素溶液制作艟紅素腦病動(dòng)物模型方法的可行性,研究服紅素腦病模型豚鼠海島神經(jīng)細(xì)胞凋亡及塔死現(xiàn)象、凋亡穗關(guān)爨毫Bcl.2及B
4、ax蛋自表達(dá)鰓魂態(tài)交純,分掇神經(jīng)細(xì)胞TUNEL陽性率與Bcl。2、Bax騷白表達(dá)陽性率及Bcl.2/Ba)【比值的相關(guān)性,以進(jìn)一步闡明膽紅素腦病的避絲墊照翅立機(jī)制。l樹瓣與方法:凄壘5天內(nèi)豹囊生騾蠢睡2靈,麓瓿fff)唆7綴,每緩6只,其巾‘l組為對(duì)照組,其余6組為模型組。向模型組豚鼠小腦延髓池內(nèi)注射膽級(jí)素溶液(注射劑量為lOug]]fl紅素/g制4【重),以建立膽紅索腦病動(dòng)物攘黧,各鬟努掰子繪藥震2、6、12、2毒、48、72小時(shí)瑟頭鞭齄;對(duì)鬈綴經(jīng)小腦延髓池注射生理鹽水0.1ml,于注射后24小時(shí)斷熱取腦。應(yīng)用Annexin
5、V-FITC/PI雙標(biāo)記法、H基:染色法、TUNEL法及免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)糙級(jí)素腦病模黧豚鬣海馬神經(jīng)細(xì)胞翡凋亡及壞死瑰象、凋亡穗關(guān)礞白Bcl.2與Bax蛋白的表達(dá)及兩糟比值的動(dòng)態(tài)變化,分析神經(jīng)細(xì)胞TUNEL陽性搴與Bcl.2、Bax蛋白表達(dá)麓性率及Bcl.2/Bax比值的穩(wěn)關(guān)性。結(jié)果:(1)對(duì)照組豚鼠于麻醉蘇醒后呼吸平穩(wěn),無異常神經(jīng)行為活動(dòng);模型綴騾鬣訾密瑰不閹程廢豹享?xiàng)椊?jīng)行為改變。(2)HE染色愛巍鏡觀察,發(fā)現(xiàn)對(duì)照組豚鼠?,斏窠?jīng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)基本正常;模型組豚鼠腦組織膽紅索黃染,海馬神經(jīng)細(xì)胞體積變小,撥染色質(zhì)濃縮、邊集、碎
6、裘,基本符合綱蕤凋亡的澎態(tài)學(xué)改交;霹器圣霹熬纓箍貔脹,魏漿空純鞠核溶解,有的細(xì)胞呈均勻一致的紅色,形成“紅色神經(jīng)元”即壞死神經(jīng)元。(3)應(yīng)用AnnexinV.FITC/PI雙標(biāo)記法檢測(cè)膽紅索腦瘸模型豚鼠海2重慶藩秘夫?qū)W硬士學(xué)寢論文碼神經(jīng)細(xì)胞凋亡率及壞-死率,發(fā)現(xiàn)模型組豚鼠海馬神經(jīng)繃胞凋亡率于給藥瑤6棗時(shí)明燕野熹,24小時(shí)左右達(dá)到高峰,以惹逐澈降低;模型縫聯(lián)鬣海馬神經(jīng)細(xì)脆壞死率于給藥后64,時(shí)明顯升高,12~24d"時(shí)達(dá)到高峰,以后較快降低。應(yīng)用TUN-EL法所檢測(cè)凋亡率的動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)與AnneXinV.FITC/Pl駁裕記法基
7、本~致。(毒)運(yùn)耀受疫縫織詫學(xué)染氛法檢測(cè)疆縫素腦病模型豚鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞Bcl.2匈Bax蛋白表達(dá)陽性率,發(fā)現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞結(jié)論:新生豚鼠經(jīng)小腦延髓池注射膽紅索溶液制作腮紅素腦病動(dòng)物模型的方法輿有可行性。膽紅素腦瘸模型豚鼠海馬區(qū)存在神經(jīng)細(xì)胞壞死幫凋亡現(xiàn)象;艟紅素逶過弼亡相關(guān)鬣自Bcl.2鞠Bax蛋自的參與麗導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞凋亡,從而介導(dǎo)膽紅素神經(jīng)毒性的發(fā)生。預(yù)防膽紐索腦病的發(fā)生燕至關(guān)重要戇。一。。關(guān)鍵詞:膽紅素高籍,凋亡,Bcl.∥Ba磊x新生蒹鼠關(guān)鍵詞:膽紅素腦瘸,凋亡,.2,,新生豚鼠二重慶醫(yī)拳}天學(xué)顢士學(xué)螢論文ANEXPEmh伍NT
8、ALS汀UDYoN豫E眾P()PT(yflCMEa睦焱NlS泰蓮0FNEUROC鬟TESINBILIRUBINENCEPHALOPATHYObjective:Toexplorethefeasibilityofanimalmodelofbilirubinencephalopat