資源描述:
《阪崎腸桿菌耐藥性分析、超廣譜β內(nèi)酰胺酶檢測及耐藥機制研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號:R446.5Q754密級:(秘密、機密、絕密)學校代碼:10057研究生學號:08841016阪崎腸桿菌耐藥性分析、超廣譜13一內(nèi)酰胺酶檢測及耐藥機制研究Drugresistanceanalysis,esblesdetectionandmechanismsaboutdrugresistanceagainstcronobactersakazakiistrains專、lp名稱:生物化學與分子生物學指導教師姓名:王碩教授研究生姓名:朱超申請學位級別:理學碩二L論文提交FI期:2011年】月論文課題
2、來源:國家項目學位授予單位:天津科技大學天津科技大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的論文是本人在導師的指導下獨立進行研究工作所取得的成果。除文中特別加以標注引用的內(nèi)容外,本論文不包括任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果內(nèi)容,也不包括為獲得天津科技大學或其它教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。對本文研究做出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔。作者簽名:霽筵同期:刀¨年孑月l畢同知識產(chǎn)權(quán)和專利權(quán)保護聲明本人鄭重聲明:所呈交的論文是本人在導師
3、具體指導下并得到相關(guān)研究經(jīng)費支持下完成的,其數(shù)據(jù)和研究成果歸屬于導師和作者本人,知識產(chǎn)權(quán)單位屬天津科技大學;所涉及的創(chuàng)造性發(fā)明的專利權(quán)及使用權(quán)完全歸天津科技大學所有。本人保證畢業(yè)后,以本論文數(shù)據(jù)和資料發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名第一單位仍然為天津科技大學。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔。作者簽名:察翹同期:刀『『年弓月l牛同學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位淪文的規(guī)定,l刊意學校保留并向國家行關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和Ibf版,I耵J意公柿論文的全部
4、或部分內(nèi)容,允yF論文被查閱和借閱。本人授權(quán)天津科技大學可以將本學位淪文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密lI(請在方框內(nèi)打“巾),在年解密后適用本授權(quán)書。本學位論文屬于不保密l翊(睛在方框內(nèi)打“√”)。作者簽名:粥超同期:朋『年羅月f弘FI導師簽名:蚴、同期:工陰1年多月脾同摘要本研究參照美國臨床和實驗室標準化研究所(CLSI)相關(guān)標準,采用藥敏紙片方法,分別對分離自食品中的19株阪崎腸桿菌進行包括頭孢唑啉、頭孢噻吩、頭孢哌酮、頭孢
5、曲松、頭孢呋辛鈉、頭孢吡肟、慶大霉素、妥布霉素、氨曲南、氨芐西林、環(huán)丙沙星、氯霉素、四環(huán)素、苯唑西林、哌拉西林、美洛培南在內(nèi)的共16種常規(guī)抗生素藥敏檢測。實驗結(jié)果表明,19株阪崎腸桿菌對苯唑西林以及頭孢噻吩的耐藥率分別為100%并n78.95%,而對其余種類抗生素均呈現(xiàn)敏感反應(yīng)。另外,本實驗還采用CLSI中關(guān)于腸桿菌科超廣譜B一內(nèi)酰胺酶檢測標準,采用紙片擴散法對19株阪崎腸桿菌進行了超廣譜13一內(nèi)酰胺酶檢測,同時參照數(shù)據(jù)庫中超廣譜B一內(nèi)酰胺酶基因序列,采用涵蓋四大類13一內(nèi)酰胺酶,總共10種超廣譜p
6、一內(nèi)酰胺酶擴增引物對菌株進行PCR檢測,兩種方法均未發(fā)現(xiàn)超廣譜B一內(nèi)酰胺酶陽性菌株,說明19株阪崎腸桿菌中不存在超廣譜B.內(nèi)酰胺酶。綜合以上結(jié)果說明,目前食品中存在的阪崎腸桿菌仍為耐藥性較弱的菌種,短時期內(nèi)將不會對l臨床治療帶來較大威脅。在阪崎腸桿菌耐藥檢測的基礎(chǔ)卜,本論文還對阪崎腸卡,J:菌耐藥SJLN進行了初步研究。實驗選取對頭孢噻吩耐藥性最強的8號阪崎腸桿菌,利用Tn一5轉(zhuǎn)座子進行隨機突變,以獲得頭孢噻吩耐藥相關(guān)基因,結(jié)果共得到轉(zhuǎn)座成功的阪崎腸桿菌單克隆共108株。以突變前菌株作為參照,通過抑
7、菌濃度實驗,檢測在250rtg/mL的頭孢噻吩存在的條件下,生長受到明顯抑制的阪崎腸桿菌突變株。結(jié)果顯示,共5株阪崎腸桿菌突變株在該濃度頭孢噻吩存在的狀況下,生長受到明顯抑制,表明該5株突變株中轉(zhuǎn)座子元件的插入位點為阪崎腸桿菌對頭孢噻吩的抗性基因。關(guān)鍵詞:阪崎腸桿菌;抗生素;超廣譜S一內(nèi)酰胺酶;轉(zhuǎn)座子;抗性基因ABSTRACTInthisstudy.thestandardsofClinicalandLaboratoryStandardsInstitutewasin仃oducedtoevaluaten
8、ineteenstrainsofCronobacterSakaza肼fwhichwereisolatedfromfoodresourcesforantibioticsusceptibilitybydiskdiffusiontechnique.Andtheantibioticsweusedwerecefazolin,cephalothin,cefoperazone,ceflriaxone,cefuroxine,cefepime,gentamicin,tobramycin