高效液相色譜和氣相色譜的異同點(diǎn)

《高效液相色譜和氣相色譜的異同點(diǎn)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。

1、高效液相色譜和氣相色譜的異同點(diǎn)不同點(diǎn)：一、流動(dòng)相不同：HPLC為液體流動(dòng)相，GC為永久性氣體作流動(dòng)相（通常叫做載氣）二、進(jìn)樣器不同：高效液相為平頭進(jìn)樣針，氣相色譜為尖頭進(jìn)樣針三、色譜柱長(zhǎng)不同：（1）氣相色譜柱通常幾米到幾十米（氣相色譜由于載氣的相對(duì)分析量較低，分子間隙大，故粘度低，流動(dòng)性好，組分在氣相中流動(dòng)速度快，因此可以增加柱長(zhǎng)，以提高柱效）。（2）液相色譜柱通常為幾十到幾百毫米四、分析種類有差異：氣相色譜分析的對(duì)象多為（不適絕對(duì)）：分子質(zhì)量小于1000，低沸點(diǎn)，易揮發(fā)，熱穩(wěn)定性好的化合物。液

2、相色譜：更適用于分析高沸點(diǎn)，難揮發(fā)，熱穩(wěn)定性差，分子質(zhì)量較大（1000--2000）的液體化合物。五：樣品柱前變化不同：氣相色譜的樣品在柱前必須變?yōu)闅怏w（氣化室汽化），而液相色譜的樣品在柱前則無變化。六、所用檢測(cè)器有差異：液相主要為：紫外檢測(cè)器，熒光檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器.....氣相色譜主要為：氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）,熱導(dǎo)檢測(cè)器（TCD）,電子捕獲檢測(cè)器（ECD）,火焰光度檢測(cè)器（FPD）,氮磷檢測(cè)器（NPD）.....相同點(diǎn)：基本原理相同。都是利用物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分配系數(shù)的差別

3、，從而在兩相間反復(fù)多次（1000-1000000次，甚至更多）的分配，使原來分配系數(shù)差別很小的各組分分離開來。vOwen發(fā)現(xiàn)異卵雙生牛的天然免疫耐受現(xiàn)象(1945)，明確自身識(shí)別問題，伯耐特(Burnet，1949)提出免疫耐受理論，梅德華(Medawar，1953)實(shí)驗(yàn)證實(shí)胚胎期耐受理論。耶那(Jerne，1955)提出天然抗體選擇學(xué)說，完成免疫網(wǎng)絡(luò)學(xué)說(1974)，伯耐特等(Burnet&Talmage,1957)完善克隆選擇學(xué)說等免疫防御(immunologic抗感染defense)免疫穩(wěn)

4、定(immunologic消除炎癥或衰老細(xì)胞homeostasis)免疫監(jiān)視(immunologic控制癌變細(xì)胞surveilance)1．高壓：液相色譜法以液體為流動(dòng)相（稱為載液），液體流經(jīng)色譜柱，受到阻力較大，為了迅速地通過色譜柱，必須對(duì)載液施加高壓。一般可達(dá)150～3.5萬KPa?！　?.高速：流動(dòng)相在柱內(nèi)的流速較經(jīng)典色譜快得多，一般可達(dá)1～10ml/min。高效液相色譜法所需的分析時(shí)間較之經(jīng)典液相色譜法少得多，一般少于1h?！　?.高效：近來研究出許多新型固定相，使分離效率大大提高。　　

5、4.高靈敏度：高效液相色譜已廣泛采用高靈敏度的檢測(cè)器，進(jìn)一步提高了分析的靈敏度。如熒光檢測(cè)器靈敏度可達(dá)10-11g。另外，用樣量小，一般幾個(gè)微升?！　?.適應(yīng)范圍寬：氣相色譜法與高效液相色譜法的比較：氣相色譜法雖具有分離能力好，靈敏度高，分析速度快，操作方便等優(yōu)點(diǎn)，但是受技術(shù)條件的限制，沸點(diǎn)太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)都難于應(yīng)用氣相色譜法進(jìn)行分析。而高效液相色譜法，只要求試樣能制成溶液，而不需要?dú)饣虼瞬皇茉嚇訐]發(fā)性的限制。對(duì)于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、相對(duì)分子量大（大于400以上）的有機(jī)物（這些物

6、質(zhì)幾乎占有機(jī)物總數(shù)的75%～80%）原則上都可應(yīng)用高效液相色譜法來進(jìn)行分離、分析。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在已知化合物中，能用氣相色譜分析的約占20%，而能用液相色譜分析的約占70～80%?！　「咝б合嗌V按其固定相的性質(zhì)可分為高效凝膠色譜、疏水性高效液相色譜、反相高效液相色譜、高效離子交換液相色譜、高效親和液相色譜以及高效聚焦液相色譜等類型。用不同類型的高效液相色譜分離或分析各種化合物的原理基本上與相對(duì)應(yīng)的普通液相層析的原理相似。其不同之處是高效液相色譜靈敏、快速、分辨率高、重復(fù)性好，且須在色譜儀中進(jìn)行。編輯

7、本段主要類型及其分離原理　　根據(jù)分離機(jī)制的不同，高效液相色譜法可分為下述幾種主要類型：　　1．液—液分配色譜法(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(ChemicallyBondedPhaseChromatography)　　流動(dòng)相和固定相都是液體。流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個(gè)明顯的分界面。當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí)，服從于下式：　　式中，cs—溶質(zhì)在固定相中濃度；cm--溶質(zhì)在流動(dòng)

8、相中的濃度；Vs—固定相的體積；Vm—流動(dòng)相的體積。LLPC與GPC有相似之處，即分離的順序取決于K，K大的組分保留值大；但也有不同之處，GPC中，流動(dòng)相對(duì)K影響不大，LLPC流動(dòng)相對(duì)K影響較大?！　.正相液—液分配色譜法(NormalPhaseliquidChromatography):流動(dòng)相的極性小于固定液的極性?！　.反相液—液分配色譜法(ReversePhaseliquidChromatography):流動(dòng)相的極性大于固定液的極性?！　.液—液分配色譜法的缺點(diǎn)：盡管流動(dòng)相與固定相