稻曲病菌人工培養(yǎng)性狀研究及稻曲球超微結(jié)構(gòu)分析

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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文稻曲病菌人工培養(yǎng)性狀研究及稻曲球超微結(jié)構(gòu)分析姓名：陳麗申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物病理學(xué)指導(dǎo)教師：胡東維20060501致謝本論文是在導(dǎo)師胡東維教授曲悉心拍導(dǎo)下寬成曲。導(dǎo)師從論文選題．喂計反寫作過程中都給予了精心指導(dǎo)，弄提蟲了很多宦貴曲意見與建議。胡老師知識胡博、作風(fēng)嚴(yán)謹(jǐn)，待人誠患．平易近人，在兩年曲的礙霓生生謹(jǐn)中，在科研和生活方面都給予了我無微不至曲指導(dǎo)與關(guān)杯。在此，謹(jǐn)向?qū)熤乱訧幕曝的感豫和崇高的文意／在雨年皓學(xué)習(xí)中，晰江史學(xué)分析溯試中心的徐顥老師，方月鮮老師．洪鍵老師、摹軍英老師、何立平老師和金東

2、寧老師在樣品切片反電鏡觀察等方西伶予了大力支持和幫助。植保系的張曩懌老師在實玲板計和操作方面給予了很多建議和幫助。在此，對他們表示睬深曲謝意，感謝實驗室的各位兄弟姐姝，他們在我的科研與生活中都恰予了無微不至的關(guān)懷和幫助，在實玲馥計和論文寫作中也提出了很多寶貴的意見．他們是陳美軍，李凡．揀利剛．鰣崴科，謝禮，李燕宏．孟春梅。感謝所有和我朝夕相處的同學(xué)們，感謝同宿舍曲妲姝，感謝生物所所有的老師和同學(xué)．感謝他們在生活和學(xué)習(xí)中恰予我曲關(guān)心和幫助／最后．我要感謝我親愛的父母．家人及朋友。在多年的學(xué)習(xí)和生活中，他們給予我極太曲鼓勵和支

3、持．他們的無私奉獻(xiàn)，給了我求是曲信心和勇氣／讓我再次對所有關(guān)心．理解與支持我的老師，家人和朋友表示我衷心的感謝／感謝他們伴隨我走過的點點滴滴．我會采遠(yuǎn)記得和耗福他們的，《8寶弱2006．5．15浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要稻曲病是一種水稻穗部病害，由稻曲病菌Usalaginodeavirens(Cooke)Takahashi在水稻穗部為害產(chǎn)生稻曲球，是一種世界性水稻真菌病害。稻曲病過去僅在中晚稻田零星發(fā)生，20世紀(jì)80年代以來，隨著直立型和密穗型高產(chǎn)水稻品種大力推廣及農(nóng)田肥力的提高，稻曲病的發(fā)生日益嚴(yán)重，它不僅影響稻米的產(chǎn)量和

4、品質(zhì)，而且產(chǎn)生的稻曲病菌毒素，對人和動植物都有毒性，目前已經(jīng)成為水稻產(chǎn)區(qū)的主要病害之一。一般認(rèn)為厚垣孢子是稻曲病主要的初侵染源，在水稻開花前后從穗部進(jìn)行侵染；但也有人猜測稻曲病是系統(tǒng)侵染病害。長期以來，由于稻曲病菌的人工接種成功率極其低下，從而制約了稻曲病菌的侵染途徑與發(fā)育方式的研究。一個行之有效的接種方法一直是稻曲病研究的瓶頸問題。本研究主要對稻曲病菌的分離、純化及人工培養(yǎng)性狀進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，對人工培養(yǎng)的稻曲病菌菌落、稻曲球超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了超微觀察與分析，以揭示自然條件下病原菌侵染和生長的可能途徑，為人工接種技術(shù)的進(jìn)一步

5、突破及探索有效防治稻曲病的策略和抗病育種提供科學(xué)依據(jù)；另外，對稻曲病菌毒素對植物和其它真菌生長的作用進(jìn)行了初步研究，為探索稻曲病菌毒素的生物學(xué)活性及其在致病過程中的作用打下基礎(chǔ)。本研究主要有虬下幾個方面的結(jié)果；一、稻曲病菌的分離、純化與人工培養(yǎng)性狀的研究。通過厚垣孢子懸浮液法在XBZ和PSA培養(yǎng)基上分離純化稻曲病菌，然后轉(zhuǎn)接到PSA培養(yǎng)基上、PS培養(yǎng)液里、麥粒和稻粒培養(yǎng)基上進(jìn)行人工培養(yǎng)。在PSA培養(yǎng)基上，26℃黑暗條件下，隨著繼代培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)稻曲病菌菌株UI-[17的人工培養(yǎng)性狀發(fā)生分化；而稻曲病菌菌株UHl2繼代培養(yǎng)后，其

6、培養(yǎng)性狀沒有發(fā)生變化。稻曲病菌菌株UHl7在PSA培養(yǎng)基上，26℃黑暗條件下培養(yǎng)，20天左右可產(chǎn)生大量的厚垣孢子，形成厚垣孢子的方式主要有3種：(1)整個菌落散生厚垣孢子，不形成厚垣孢子堆；(2)菌落上形成一到多個厚垣孢子堆；(3)菌落上形成厚垣孢子球。其中以前2種情況為主，第3種情況較少。在Ps培養(yǎng)液里，26℃黑暗條件下振蕩培養(yǎng)稻曲病菌，發(fā)現(xiàn)形成厚垣孢子的方式主要有2種：(1)始終不產(chǎn)生厚垣孢5浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文子；(2)先產(chǎn)生黃綠色菌絲球，后在液面形成厚垣孢子菌絲塊。在麥粒和稻粒培養(yǎng)基上，26℃黑暗條件下，稻曲病菌在

7、煮熟的帶殼谷粒上生長明顯比去殼的要慢得多，后期可以產(chǎn)生大量的黃色厚垣孢子堆。二、人工培養(yǎng)的稻曲病菌菌落及稻曲球超微結(jié)構(gòu)觀察與分析。稻曲球SEM分析表明，稻曲球表面是一層密集的厚垣孢子，菌絲與稻粒的胚乳層界限分明，大部分稻曲球中部有大塊的發(fā)育良好的胚乳，并充滿密集的淀粉粒，說明稻曲病菌是在開花灌漿后開始侵染的，而且至少后期是腐生的。稻曲球菌組織的TEM觀察表明，稻曲球內(nèi)部菌組織的菌絲致密，排列整齊，脂肪粒比較豐富；稻曲球外部菌組織的菌絲比較疏松，排列無規(guī)則，脂肪體已經(jīng)解體，模糊不清；在稻曲球中間菌組織中，有的菌絲壁局部加厚，

8、菌絲內(nèi)的脂肪粒十分清晰?？梢?，稻曲病菌具有非常強(qiáng)的腐生性真菌的特征。三、稻曲病菌毒素對植物與真菌生長的作用。稻曲球浸漬液對水稻胚根胚芽都有明顯的抑制作用，抑制率分別為85．8％、45．8％，對胚根的抑制作用明顯高于胚芽，這可能是由于胚根直接接觸稻曲球浸漬液所導(dǎo)致；Ps培養(yǎng)濾液對稻瘟病菌生長的有一定的抑制