《革蘭陰性球菌》PPT課件

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1、革蘭陰性球菌“伯杰鑒定細(xì)菌學(xué)手冊(cè)”第9版將奈瑟菌屬和布蘭漢菌屬歸于群4，將奈瑟菌屬、莫拉菌屬、金氏菌屬和不動(dòng)桿菌屬都?xì)w于奈瑟菌科概述奈瑟菌屬對(duì)人致病的有腦膜炎奈瑟菌(N.gonorrhoeae)和淋病奈瑟菌（N.meningitidis），其余均為人類呼吸道正常菌群莫拉菌屬中的卡他莫拉菌（M.catarrhalis）是致病菌目前對(duì)卡他莫拉菌的歸屬尚未定論一、分類淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌對(duì)人致病寄生在人體內(nèi)鼻咽腔的腐生菌解乳糖奈瑟菌、干燥奈瑟菌、微黃奈瑟菌、粘液奈瑟菌、淺黃奈瑟菌、灰色奈瑟菌、延長(zhǎng)奈瑟菌

2、、去氮奈瑟菌和多糖奈瑟菌第一節(jié)奈瑟菌屬二、腦膜炎奈瑟菌臨床意義寄居于人的鼻咽腔、口腔粘膜上，通過呼吸道分泌物或空氣微滴核而傳播。流行性腦脊髓膜炎冬末春初，多為學(xué)齡兒童、青少年感染后多為隱性感染，少數(shù)可發(fā)展為菌血癥或敗血癥，進(jìn)而累及腦、脊髓膜，形成化膿性腦膜炎可出現(xiàn)嚴(yán)重的臨床癥狀如發(fā)熱、頭痛、腦膜刺激癥陽性、甚至休克和DIC等；菌血癥和細(xì)菌的損傷作用使約半數(shù)患者出現(xiàn)皮下瘀斑盡管可以在鼻咽部形成帶菌狀態(tài)，但侵襲性的腦膜炎奈瑟菌感染多為新近感染，急性發(fā)病，發(fā)病時(shí)機(jī)體內(nèi)缺乏殺菌抗體。主要致病物質(zhì)是內(nèi)毒素：可引

3、起發(fā)熱、微循環(huán)障礙，嚴(yán)重者可致內(nèi)毒素休克、血栓、DIC等依據(jù)莢膜多糖的抗原成分可分為：A、B、C、……等13個(gè)血清群，我國(guó)A群占95.8%，其余為B、C等群。淋病奈瑟菌臨床意義淋病的病原菌主要通過性接觸直接感染在分娩時(shí)通過產(chǎn)道感染新生兒臨床表現(xiàn)為：?jiǎn)渭冃粤懿∨枨谎卓谘什亢透亻T直腸淋病淋菌性結(jié)膜炎播散性淋病致病物質(zhì)包括菌毛、外膜蛋白、蛋白水解酶、脂多糖和鐵調(diào)節(jié)蛋白奈瑟菌形態(tài)革蘭陰性雙球菌直徑0.6~1.5μm腎形或咖啡豆樣，凹面相對(duì)某些菌種形成莢膜三、生物學(xué)特性2．培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求高專性需氧，初次分離需

4、5%~7%CO2和高濕度低于30℃不生長(zhǎng)孵育24h后在培養(yǎng)基上自溶腦膜炎奈瑟菌血瓊脂平板或巧克力瓊脂平板：光滑、濕潤(rùn)、透明或半透明、直徑1~2mm的不溶血、圓形、露珠狀菌落卵黃瓊脂平板：無色、光滑、濕潤(rùn)奶油狀菌落淋病奈瑟菌巧克力或MTM選擇性培養(yǎng)基（萬古霉素）:菌落圓形，光滑濕潤(rùn)、凸起、半透明自溶淋病奈瑟菌在巧克力瓊脂平板上的菌落特征3．生化特性氧化酶陽性，觸酶陽性4．抵抗力很弱四敏感：熱、寒冷、干燥、消毒劑對(duì)青霉素敏感近年來由質(zhì)粒介導(dǎo)的β內(nèi)酰胺酶所致的耐藥在淋病奈瑟菌中產(chǎn)生較多四、微生物檢驗(yàn)（一）腦

5、膜炎奈瑟菌1、標(biāo)本采集腦脊液、關(guān)節(jié)液、血液、瘀點(diǎn)穿刺液等采集后立即送檢標(biāo)本運(yùn)送時(shí)需要35℃保溫血平板床邊接種后置35℃孵育血標(biāo)本接種在血液培養(yǎng)瓶中置35℃孵育2、標(biāo)本直接檢查直接涂片檢查腦脊液直接或經(jīng)離心后取沉淀涂片皮膚瘀點(diǎn)滲出液涂片見白細(xì)胞內(nèi)外革蘭陰性雙球菌，可報(bào)告“檢出革蘭陰性雙球菌，疑似腦膜炎奈瑟菌”。有助于流行性腦脊髓膜炎早期診斷抗原檢查膠乳凝集試驗(yàn)和其他凝集試驗(yàn)包括A、C、Y、W125血清型的多價(jià)抗體和血清型B抗體檢測(cè)結(jié)果結(jié)合涂片和培養(yǎng)結(jié)果抗原檢測(cè)陽性結(jié)果可作出快速、推測(cè)性診斷3、分離培養(yǎng)鑒

6、定腦脊液巧克力瓊脂或羊血瓊脂平板咽拭子或鼻咽拭子選擇性培養(yǎng)基上如改良的Thayer-Martin(MTM)、GC-Lect、NewYorkCity(NCY)等培養(yǎng)基血標(biāo)本經(jīng)增菌培養(yǎng)基增菌后，移種至巧克力瓊脂或羊血瓊脂平板置5%~7%CO235℃孵育，每隔24h觀察平板鑒定初步確定為奈瑟菌屬直徑1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落涂片革蘭陰性雙球菌氧化酶觸酶陽性進(jìn)一步：葡萄糖和麥芽糖陽性、其他糖類陰性可確定為腦膜炎奈瑟菌用分型血清確定血清型別平板上未發(fā)現(xiàn)菌落，繼續(xù)觀察72h后無菌生長(zhǎng)可報(bào)告為陰性

7、（二）淋病奈瑟菌檢驗(yàn)程序1．標(biāo)本采集陰道和宮頸分泌物用無菌塑料棒滌綸拭子，伸入陰道后穹隆或?qū)m頸內(nèi)1cm處停留10~15秒時(shí)間，蘸取尿道分泌物棄去前段膿性分泌物，留取后段作為標(biāo)本尿液直腸肛拭標(biāo)本廢棄第一根污染棉簽，用第二根棉簽醮取的分泌物新生兒結(jié)膜炎時(shí)應(yīng)采取眼結(jié)膜表面分泌物2．標(biāo)本直接檢查革蘭染色鏡檢男性尿道分泌物標(biāo)本中可見中性多形核細(xì)胞內(nèi)、外較多革蘭陰性雙球菌，有助于男性淋病早期診斷女性宮頸或直腸拭子標(biāo)本涂片中可見胞內(nèi)、外大量革蘭陰性雙球菌，由于女性陰道和直腸有許多正常菌群寄居，故涂片所見結(jié)果必須由培

8、養(yǎng)結(jié)果證實(shí)方可報(bào)告新生兒結(jié)膜分泌物可見胞內(nèi)、外大量革蘭陰性雙球菌可初步診斷為淋球菌性結(jié)膜炎3．分離培養(yǎng)與鑒定選擇培養(yǎng)基如MTM，Martin-Lewis（ML），或NYC5%CO2孵育每隔24h觀察平板（1）形態(tài)和生化學(xué)鑒定可疑菌落直徑0.5~1mm，灰褐色、光滑、半透明呈露滴狀凸起的菌落確認(rèn)菌落涂片，見革蘭陰性雙球菌氧化酶和觸酶試驗(yàn)陽性葡萄糖陽性，其它糖類陰性培養(yǎng)需觀察72h后無菌生長(zhǎng)可報(bào)告為陰性。（2）免疫學(xué)鑒定直接熒光染色凝集試驗(yàn)或免疫滲濾技術(shù)（3