《染色體組型分析》PPT課件

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1、遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)之——染色體組型分析廈門大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆杖旧w組型分析的各種數(shù)據(jù)指標(biāo)學(xué)習(xí)染色體組型分析的基本方法實(shí)驗(yàn)原理定義：染色體組型又稱核型，是指將動(dòng)物、植物、真菌等的某一個(gè)體或某一分類群（亞種、種、屬等）的體細(xì)胞內(nèi)的整套染色體，按它們相對恒定的特征排列起來的圖像。核型模式圖是指將一個(gè)染色體組的全部染色體逐個(gè)按其特征繪制下來，再按長短、形態(tài)等特征排列起來的圖像。發(fā)展歷史1920年提出三項(xiàng)技術(shù)促進(jìn)：低滲處理秋水仙素應(yīng)用植物凝激素應(yīng)用染色體分帶技術(shù)：Q帶、G帶、C帶、R帶、T帶、N帶等FISH技術(shù)染色體的特征數(shù)目（2n=？）長度

2、（絕對長度、相對長度）著絲粒位置（MSMSTT）隨體與次溢痕的數(shù)目、大小和位置帶型分析各類常用實(shí)驗(yàn)生物和人細(xì)胞DNA含量與染色體數(shù)目物種染色體數(shù)目DNA含量（bp）MS2λ噬菌體T4枯草桿菌大腸桿菌啤酒酵母果蠅海膽蛙小雞小鼠玉米人111113485226784020463×1035×1045×1052×1064.2×1061.4×1071.4×1081.6×1094.5×1092.1×1094.7×1093×1093.2×109染色體超螺旋染色體的大小燈刷染色體（光鏡觀察）染色體觀察及核型分析應(yīng)用意義染色體組型分析——染色體水平上

3、的表型可確定物種的特征，確定種屬親緣關(guān)系分析生物物種的變異和進(jìn)化過程識別單條染色體、基因定位臨床應(yīng)用（染色體疾病、產(chǎn)前診斷）人類23對染色體組型分析實(shí)驗(yàn)方法染色體數(shù)目確定染色體形態(tài)特征：長度：絕對、相對相對長度=每條染色體的長度/全套染色體長度臂比=長臂/短臂著絲點(diǎn)指數(shù)=短臂/（長+短臂）隨體的有無分組排隊(duì)原則著絲粒類型相同，相對長度相近的分一組同一組的按染色體長短順序配對排列各指數(shù)相同的染色體配為一對可根據(jù)隨體的有無進(jìn)行配對將染色體按長短排隊(duì)，短臂向上實(shí)驗(yàn)用品毫米尺、剪刀、膠水、計(jì)算器、白紙人染色體放大照片染色體編號(人X染色體)記述

4、一特定帶時(shí)，需要寫明4個(gè)內(nèi)容：染色體號，長短臂，區(qū)的號序和帶的號序。這些內(nèi)容按順序?qū)懀挥瞄g隔或加標(biāo)點(diǎn)。如果某一帶被再細(xì)分，在原帶號數(shù)后加一小數(shù)點(diǎn)，編號原則仍按從著絲粒往臂端序貫編號。如1p31.2代表一號染色體短臂3區(qū)1帶第2亞帶核型描述首先列出染色體總數(shù)，然后是性染色體組成，接著列出異常的染色體數(shù)目或形態(tài)。下列統(tǒng)一的命名符號：A-G染色體組的名稱1-22染色體編號X,Y性染色體del缺失der結(jié)構(gòu)重排的染色體dup重復(fù)inv倒位t易位+/-在染色體符號前表示染色體增加或減少，在染色體符號后表示染色體多出或缺少一部分實(shí)驗(yàn)步驟計(jì)數(shù)，沿邊

5、緣剪下染色體，編號初步目測配對，分組測量長度，計(jì)算相對長度、著絲粒指數(shù)、臂比，相同的染色體間配對將配對好的染色體排列并粘貼在紙上，每一組下面畫一橫線，在兩端注明起止號，并在橫線下的中部寫明A-G組號，染色體從大到小編為1-22號，性染色體單獨(dú)列為一組思考題請描述核型：45，XY,der(14;21)(q21;q14)47，XY,+21生命科學(xué)中的“釣魚”（FISH）技術(shù)遺傳及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)新技術(shù)新方法系列講座發(fā)展歷史熒光原位雜交技術(shù)(fluorescenceinsituHybridization,FISH)問世于70年代后期,其曾多用于

6、染色體異常的研究,近年來隨著FISH所應(yīng)用的探針種類的不斷增多,特別是全COSMID探針及染色體原位抑制雜交技術(shù)的出現(xiàn),使FISH技術(shù)不僅在細(xì)胞遺傳學(xué)方面,而且還廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)研究,如診斷、基因定位等放射性同位素原位雜交技術(shù)原有的放射性同位素原位雜交技術(shù)存在著較多缺點(diǎn)，諸如每次檢驗(yàn)需重新標(biāo)記、已標(biāo)記的探針表現(xiàn)出明顯的不穩(wěn)定性、需要較長時(shí)間的曝光時(shí)間和對環(huán)境的污染等。在觀察結(jié)果時(shí)，需要較多的分裂相進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。此外，由于放射性銀粒和染色體聚集的不同平面，可能引起計(jì)數(shù)上的誤差等。FISH的基本原理很簡單,就是標(biāo)記了熒光的單鏈DNA(探針

7、)和與其互補(bǔ)的DNA(玻片上的標(biāo)本)退火雜交,通過觀察熒光信號在染色體上的位置來反映相應(yīng)基因的情況.熒光原位雜交（FISH）FISH技術(shù)是常規(guī)染色體分析的輔助手段。它是用熒光素標(biāo)記特異探針，與染色體做雜交后，根據(jù)特異的熒光信號來判斷結(jié)果。它可用于標(biāo)記染色體的識別、特異融合基因的檢測、新基因定位，用全染色體涂抹探針識別復(fù)雜的染色體結(jié)構(gòu)異常。FISH具有其不可比擬的優(yōu)點(diǎn)：1.操作簡便，探針標(biāo)記后穩(wěn)定，一次標(biāo)記后可使用二年。2.方法敏感，能迅速得到結(jié)果。3.在同一標(biāo)本上，可同時(shí)幾種不同探針。4.不僅可用于分裂細(xì)胞染色體數(shù)量或結(jié)構(gòu)變化的研究，而

8、且還可用于靜止期細(xì)胞的染色體數(shù)量及基因改變的研究。FISH的技術(shù)特點(diǎn)：FISH選用的標(biāo)本可以是分裂期細(xì)胞染色體也可以是間期細(xì)胞。間期細(xì)胞可以是冰凍切片，也可以是細(xì)胞滴片或印片。生物素（Biotin）地高辛（