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《《非特異性免疫實(shí)驗(yàn)》PPT課件》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、一、非特異性免疫吞噬作用示教溶菌酶實(shí)驗(yàn)1個平板/組補(bǔ)體傳統(tǒng)途徑激活實(shí)驗(yàn)——溶血實(shí)驗(yàn)1份/組二、機(jī)體細(xì)胞免疫功能測定1、E玫瑰花環(huán)實(shí)驗(yàn)示教2、淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)示教1一、吞噬細(xì)胞及吞噬作用吞噬作用是指白細(xì)胞游出到炎癥灶，吞噬病原體以及組織碎片的過程。完成此功能的吞噬細(xì)胞主要有兩種，其吞噬異物的過程基本相同，但其結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分則有所不同。中性粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞2實(shí)驗(yàn)方法：中性粒細(xì)胞的吞噬作用金黃色葡萄球菌1-2ml，注入小白鼠腹腔內(nèi)5小時后，解剖，腹腔液涂片，染色觀察小吞噬細(xì)胞吞噬金黃色葡萄球菌的現(xiàn)象3實(shí)驗(yàn)方法：巨噬細(xì)
2、胞的吞噬作用10%雞紅細(xì)胞懸液注入小白鼠腹腔內(nèi)分別于1,6,24小時抽取腹腔液涂片，染色觀察巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的現(xiàn)象4二、溶菌酶試驗(yàn)溶菌酶是正常體液與分泌液中所含的一種低分子量的堿性蛋白質(zhì)，主要來源于巨噬細(xì)胞，是天然免疫中一種重要的體液殺菌成分。肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁中的重要成分，溶菌酶能夠水解肽聚糖從而使細(xì)菌溶解。細(xì)革蘭氏陽性：溶解菌革蘭氏陰性：肽聚糖外面有一層脂多糖和脂蛋白，一般情況下不受溶菌酶的影響。51、實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備：（1）帶菌平板的準(zhǔn)備：處理好溶壁微球菌加入瓊脂內(nèi),到平板,冷凝備用。（2）每平板打4個小孔
3、，如圖。123462、同學(xué)們操作步驟：清水漱口將唾液涂于空平板中用吸管吸出，按下圖滴入孔內(nèi)37℃過夜明天上午測量溶菌環(huán)的直徑，記錄分析74123PBS陰性對照雞蛋清陽性對照3，4加入唾液標(biāo)本8三、補(bǔ)體溶血實(shí)驗(yàn)原理：補(bǔ)體經(jīng)過經(jīng)典途徑激活后產(chǎn)生溶解細(xì)胞等作用。RBC（Ag）+溶血素（Ab）+補(bǔ)體RBC溶解9方法管號2%RBC（Ag）溶血素（Ab）補(bǔ)體生理鹽水結(jié)果10.250.250.250.2520.250.25----0.530.25----0.250.540.25--------0.7510結(jié)果與判斷紅細(xì)胞溶解
4、，液體變?yōu)榧t色透明（+）不溶解，液體均勻渾濁或有少量紅細(xì)胞沉于管底（-）11四、E玫瑰花環(huán)形成實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理T細(xì)胞表面標(biāo)志CD2，即綿羊紅細(xì)胞受體綿羊紅細(xì)胞表面CD58可與CD2結(jié)合可用于T細(xì)胞的計(jì)數(shù)與分離12左:（甲紫染色，800×）：可見2個被綿羊紅細(xì)胞包圍而形成玫瑰環(huán)的T淋巴細(xì)胞；右:（吖啶橙染色）：圖中可見3個染成橙黃色熒光的T淋巴細(xì)胞被綿羊紅細(xì)胞所包圍。T淋巴細(xì)胞玫瑰花環(huán)13實(shí)驗(yàn)結(jié)果凡能結(jié)合三個以上綿羊紅細(xì)胞者為玫瑰花形成陽性細(xì)胞。正常人的花環(huán)形成率50-70%，大致可以代表周圍血中T細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)。14
5、五、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)T細(xì)胞受到特異性抗原或非特異性絲裂原刺激時，可發(fā)生轉(zhuǎn)化。特異性抗原非特異性絲裂原：PHA、ConA等。正常人淋巴細(xì)胞受到PHA刺激后，其轉(zhuǎn)化率為60-80%。15轉(zhuǎn)化細(xì)胞形態(tài)特征細(xì)胞體積：增大細(xì)胞核大?。涸龃笕旧|(zhì)：疏松核仁：清晰有絲分裂：+/-細(xì)胞漿著色空泡或偽足161718
