基因轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后加工及逆轉(zhuǎn)錄

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1、第十三章 基因的轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后加工及逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄翻譯復(fù)制基因的遺傳:DNA基因的表達(dá):DNA→RNA→Protein復(fù)制轉(zhuǎn)錄翻譯轉(zhuǎn)錄(transcription)以單鏈DNA為模板,NTP為原料,在DNA依賴的RNA聚合酶催化下合成RNA的過程。復(fù)制轉(zhuǎn)錄模板其中一股鏈(模板鏈)兩股鏈原料dNTPNTP聚合酶DNA依賴的DNA聚合酶DNA依賴的RNA聚合酶產(chǎn)物DNAmRNA,tRNA,rRNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的比較堿基配對(duì)A-T;G-CA-U,T-A;G-C相關(guān)概念模板鏈(templatestrand)反意義鏈(antisensestrand)負(fù)鏈(

2、minusstrand)Watson(W)鏈編碼鏈(codingstrand)有意義鏈(sensestrand)正鏈(plusstrand)Crick(C)鏈5`編碼鏈…AGCTCCAGGTTCCATGGCTAACG…3`3`模板鏈…TCGAGGTCCAAGGTACCGATTGC…5`5`mRNA……CUCCAGGUUCCAUGGCUA……3`※mRNA與編碼鏈序列基本一致不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄(asymmetrictranscription)不同基因的模板鏈,并不固定在DNA雙鏈上的某一鏈,但轉(zhuǎn)錄方向總是5`→3`,因此不同基因的轉(zhuǎn)錄方向不同。編碼鏈

3、模板鏈模板鏈編碼鏈5`3`3`5`基因1轉(zhuǎn)錄方向基因2轉(zhuǎn)錄方向5`5`3`3`第一節(jié)參與轉(zhuǎn)錄的酶類一、原核生物的RNA聚合酶(RNApol)???????????亞基功能σβαβ`參與全酶組裝及全酶識(shí)別啟動(dòng)子與原料NTP及新生RNA鏈結(jié)合,與模板DNA結(jié)合識(shí)別啟動(dòng)子,辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)核心酶全酶催化3`5`磷酸二酯鍵σ因子σ亞基→轉(zhuǎn)錄起始因子以分子量命名e.g.σ70(分子量70kDa)rpoH基因σ32熱激狀態(tài)啟動(dòng)子hsp基因5`3`Hsp(heatshockproteins)5`5`3`3`σ54→參與氮源利用基因的轉(zhuǎn)錄σE→參與細(xì)菌鞭毛生

4、成基因的轉(zhuǎn)錄二、真核生物的RNA聚合酶(RNApol)IIIIII定位轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物對(duì)抑制劑(鵝膏蕈堿)敏感性核仁核質(zhì)核質(zhì)45SrRNAtRNA,5SrRNA,snRNAhnRNA不敏感敏感不同物種敏感性不同RNAPolI→45SrRNA→5.8SrRNA18SrRNA28SrRNARNAPolIII→5SrRNAtRNARNAPolII→hnRNA→mRNA?????原核生物RNAPolRNAPolIRNAPolIII>100KD>100KD19KD40KDRNAPolII>100KD>100KD44KD44KD真核生物RNAPol第二節(jié)轉(zhuǎn)錄過

5、程轉(zhuǎn)錄起始→轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)→轉(zhuǎn)錄終止一、轉(zhuǎn)錄起始1、原核生物轉(zhuǎn)錄起始原核生物啟動(dòng)子特征:-10bp:Pribnow盒5`-TATAAT-3`-35bp:5`-TTGACA-3`5`------------TTGACA------TATAAT-----------------------------3`編碼鏈-35bp-10bp+1bp上游下游調(diào)控序列(啟動(dòng)子)結(jié)構(gòu)基因5`3`啟動(dòng)子的方向性封閉型轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物→開放型轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物-35bp-10bp2、真核生物轉(zhuǎn)錄起始蛋白輔助因子→轉(zhuǎn)錄因子TF-I→RNApolITF-II→RNApolIITF

6、-III→RNApolIII轉(zhuǎn)錄因子(transcriptionfactor,TF):能直接或間接與結(jié)構(gòu)基因上游的調(diào)控序列(DNA序列)或RNApol結(jié)合,影響轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)因子。1)RNApolII催化的轉(zhuǎn)錄起始真核生物啟動(dòng)子特征:-90bp:GC盒(順式作用元件)5`-GGGCGG-3`-70bp:CAAT盒5`-GGC(T)CAATCT-3`-30bp:TATA盒(Hogness盒)5`-TATAA(T)AAT-3`轉(zhuǎn)錄因子:TF-A~J(反式作用因子)TF-IIHTATATF-IIDTF-IIATF-IIBRNApolIITF-IIF

7、TF-IIETF-IIJ解開DNA雙螺旋蛋白激酶ATPtase真核生物RNA-polII不直接與DNA分子結(jié)合,需依靠眾多的轉(zhuǎn)錄因子。各轉(zhuǎn)錄因子TF-II功能TF-IID:與啟動(dòng)子的TATA盒結(jié)合TF-IIA:形成TF-IIA-D復(fù)合物,防止抑制因子結(jié)合TF-IIB:作為其他因子結(jié)合的橋梁TF-IIF:與RNApolII結(jié)合TF-IIE:ATP酶活性,為轉(zhuǎn)錄起始處的局部解鏈提供能量。TF-IIJ:TF-IIH:解開DNA雙鏈蛋白激酶活性,使RNApolII的C端多個(gè)絲氨酸殘基磷酸化2)RNApolI催化的轉(zhuǎn)錄起始+1bp核心元件上游調(diào)控元件

8、3`上游結(jié)合因子UBF5`3`核心元件上游調(diào)控元件上游結(jié)合因子UBFTAFTBPTATARNApolI3)RNApolIII催化的轉(zhuǎn)錄起始A盒B盒+1bpTFIIICTFIIIB

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