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《香蕉凝集素基因雙啟動子表達》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、維普資訊http://www.cqvip.com果樹學報2008，25(3)：422～425JoumalofFruitScience香蕉凝集素基因雙啟動子表達張建斌，趙靜，黎耀平，金志強，徐碧玉(中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶生物技術(shù)研究所．海口571101)摘要：為了獲得香蕉果實特異表達的強啟動子，利用PCR方法將2個凝集素(BanLec)基因啟動子串聯(lián)在一起，置換植物表達載體pBll21上的35S啟動子，構(gòu)建BanLec基因雙啟動子攜帶gus植物表達載體pBIL3，用基因槍轉(zhuǎn)化香蕉葉片、根系和果實薄片，瞬時表達結(jié)果顯示BanLec基因串連的雙啟動子依然表現(xiàn)為果實特異性表達，而且表達量明顯高于Ban
2、Lec基因單啟動子及35S啟動子，證明該串連的雙啟動子是一個在香蕉果實中特異表達且表達量較高的強啟動子關(guān)鍵詞：香蕉；凝集素基因；雙啟動子：果實特異表達中圖分類號：$668．4文獻標識碼：A文章編號：1009—9980(2008)03-422—04ActivitycharacterizationofabananalectingenedoublepromoterZHANGJian—bin，ZHAOJing，LIYao—ping，JINZhi—qiang，XUBi-yu(InstituteofTropicalBioscienceandBiotechnology，ChineseAcademyofTro
3、picdAgriculturalSciences，Haikou，Hainan571101China)Abstract：Inordertoacquireanenhancedpromoterexpressedspecificallyinbananafruit，adoubleBanLecgenepromoterwereconstructedbyPCRmethod．The35SpromoterintheexpressionvectorpBI121wassubstitutedwiththedoublepromotertOconstructanewplantexpressedvectorpBIL3，whi
4、chwasthenligatedwithgusgene．Bananaleaves，rootsandfruitsec—tionsweretransformedwiththisvector．Theresultindicatedthatthisdoublepromoterwasfruit—specificanditsexpressionwasstrongerthansingleBanLecgenepromoterand35Spromoter．Keywords：Banana；BanLecgene；Doublepromoter；Fruit—specificexpression香蕉果實是利用轉(zhuǎn)基因方法生產(chǎn)
5、重組藥用蛋異表達的啟動子，其表達活性稍高于35S啟動子}lJ】，白、肽或有價值的化合物的理想生物反應(yīng)器}l1，研究轉(zhuǎn)化番茄研究也證實為果實特異高效表達啟動子，者們期望插入的抗原基因能夠特異地在香蕉果實中已獲國家發(fā)明專利授權(quán)(專利號：ZL2oo410092468．4)。表達，從而使香蕉果實變成I=1服疫苗。這就要求有在此基礎(chǔ)上，我們構(gòu)建了該啟動子的串聯(lián)表達載體，果實組織特異性啟動子。已報道的香蕉轉(zhuǎn)基因研究通過gus瞬時表達研究其活性，期望能夠獲得香蕉中用到的啟動子有花椰菜花葉病毒(CaMV)35S啟果實特異表達的強啟動子，為香蕉果實作為植物生動子【2-4]，玉米泛素蛋白啟動子(Ubi)[5-63
6、。水稻肌動蛋物反應(yīng)器，生產(chǎn)藥用蛋白或者藥用成分提供一個優(yōu)白啟動子(Actin)t7～。這些啟動子均為組成型啟動子。良的啟動子。它們不能實現(xiàn)目的基因在特定組織、特定時間表達。1材料和方法因此克隆適宜于香蕉遺傳轉(zhuǎn)化的果實組織特異性啟動子是把香蕉作為口服疫苗的基礎(chǔ)。近年來國內(nèi)外1．1材料和試劑研究者在香蕉中分離到了一些果實的特異表達的啟材料香蕉(Musaspp．AAAgroup．CV．Brazilian)動子，如ACC氧化酶基因的啟動子[9]和ACC合成酶果實采自熱帶作物生物技術(shù)研究所實驗基地。基因的啟動子}J01，但未見在轉(zhuǎn)基因中應(yīng)用的報道。作化學試劑購自華美公司。載體pBI121、pBIL2、者
7、于2005年克隆了香蕉凝集素基因(BanLecgene)大腸桿菌EscherichiacoliDH5et、農(nóng)桿菌GV3103本啟動子，通過基因槍法對香蕉根、葉、果實的瞬時表實驗室保存。達進行研究，證明Lectin啟動子是一個果實高效特1．2方法收稿日期：2007一l1—05接受日期：2008—03—20基金項目：國家自然科學基金項目(30370987)；江蘇省應(yīng)用基礎(chǔ)項目(BJ200018)作者簡
